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Endo H 糖苷內(nèi)切酶H(重組糖苷酶/去糖基化酶)

來(lái)源:泰然健康網(wǎng) 時(shí)間:2024年12月28日 21:06

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

Endo H(糖苷內(nèi)切酶 H)是一種重組糖苷酶,克隆自褶皺鏈霉菌(Streptomyces plicatus),能夠?qū)-糖蛋白中的高甘露糖和某些雜合型寡聚糖的殼二糖核心結(jié)構(gòu)進(jìn)行切割,去除糖蛋白中的N-連接高甘露糖。翌圣Endo H糖苷內(nèi)切酶H在酵母中重組表達(dá),儲(chǔ)存緩沖液中無(wú)甘油有助于在HPLC和質(zhì)譜分析中獲得最佳結(jié)果。本產(chǎn)品帶his標(biāo)簽,常應(yīng)用于抗體及其相關(guān)蛋白完全去糖基化。

    另外,我司還提供其他類型的糖苷酶,如Endo S糖苷內(nèi)切酶S(Cat#20413ES),F(xiàn)ast PNGase F, N-糖苷酶 F(快速版)(Cat#20406ES, 可以在數(shù)分鐘內(nèi)對(duì)抗體、免疫球蛋白、融合蛋白以及其他糖蛋白進(jìn)行徹底和快速的去糖基化),儲(chǔ)存緩沖液中含甘油的PNGase F, N-糖苷酶 F (100000 U/mL)(Cat#20407ES)、儲(chǔ)存緩沖液中無(wú)甘油的PNGase F(Glycerol-free), N-糖苷酶 F (無(wú)甘油,100000 U/mL)(Cat#20405ES)。

組分信息

組分編號(hào)

組分名稱

20414ES92

20414ES97

A

Endo H

10000 U

50000 U

B1

Buffer 1(10×)

100 μL

500 μL

B2

Buffer 2(10×)

200 μL

1000 μL

產(chǎn)品性質(zhì)

中文別名(Chinese synonym)

糖苷內(nèi)切酶 H

英文別名(English synonym)

Endo H

來(lái)源(Source)

酵母

分子量*(Molecular weight)

理論值29 kDa

比活性(Specific activity)

1000000 U/mL

儲(chǔ)存緩沖液(Storage Buffer)

20 mM Tris,50 mM NaCl,5 mM EDTA  PH7.5

酶活定義(Unit Definition)

1個(gè)酶活力單位指在10 μL的反應(yīng)體系中,37℃條件下1小時(shí)從10 μg變性RNase B中除去超過(guò)95%的碳水化合物所需要的酶量。

*由于畢赤酵母真核表達(dá)的影響,SDS-PAGE(不煮沸)顯示目的蛋白的分子量約60 kDa,SDS-PAGE(煮沸)顯示目的蛋白的分子量約29 kDa。

儲(chǔ)存條件

-25~-15℃保存,有效期1年。

使用說(shuō)明

變性條件下蛋白質(zhì)去糖基化

1)在水中加入1 μL Buffer 1和目標(biāo)糖蛋白(1-20 μg),至終體積10 μL;

2)100℃溫度下煮沸10 min使其變性,冰上冷卻,離心10秒;

3)加入2 μL的Buffer 2,8μL去離子水,總反應(yīng)體積20 μL;

4)加入1-2 μL的Endo H,輕輕混勻。在37℃孵育1-3 h。

5)75℃下熱失活10分鐘。

非變性條件下蛋白質(zhì)去糖基化

1)在水中加入2 μL的Buffer 2和目標(biāo)糖蛋白(1-20 μg)至最終體積為 20 μL。

2)加入 2~5 μL 的 EndoH, 輕輕混勻。

3)37°C孵育 4-24 h。

注意:在變性條件下大多數(shù)底物能夠更好的去糖基化,在非變性條件下可能需要增加Endo H的量和延長(zhǎng)孵育時(shí)間。

注意事項(xiàng)

1. 本產(chǎn)品僅作科研用途。

2. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。

Ver.CN20240813

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