產(chǎn)品簡(jiǎn)介  

PNGase F (N-糖苷酶 F)是一種酰胺水解酶，經(jīng)過(guò)和平空間站伊麗莎菌克隆，主要由腦膜炎膿桿菌等革蘭氏陰性菌分泌。翌圣PNGase F, N-糖苷酶 F (100000 U/mL)在酵母中重組表達(dá)（比活性：100000 U/mL），可以裂解由天冬酰胺連接的高甘露糖、雜合和復(fù)雜的寡糖糖蛋白。PNGase F的切割位點(diǎn)為糖蛋白內(nèi)側(cè)N-乙酰葡萄糖胺（GlcNAc）和天冬酰氨殘基之間的酰胺鍵，同時(shí)將酶解后蛋白上的天冬氨酰轉(zhuǎn)化為天冬氨酸。本產(chǎn)品帶His標(biāo)簽，常應(yīng)用于抗體及其相關(guān)蛋白完全去糖基化。

   另外，我司還提供Fast PNGase F, N-糖苷酶 F（快速版）（Cat#20406ES, 可以在數(shù)分鐘內(nèi)對(duì)抗體、免疫球蛋白、融合蛋白以及其他糖蛋白進(jìn)行徹底和快速的去糖基化），PNGase F, N-糖苷酶 F (750000 U/mL)（Cat#20415ES，比活性：750000 U/mL），以及其他類(lèi)型的糖苷酶，如Endo H糖苷內(nèi)切酶H（Cat#20414ES），Endo S糖苷內(nèi)切酶S（Cat#20413ES）。

翌圣為您提供蛋白純化實(shí)驗(yàn)整體解決方案，相關(guān)產(chǎn)品選購(gòu)請(qǐng)參考：蛋白純化系列產(chǎn)品-選購(gòu)指南

產(chǎn)品信息

編號(hào)

組分名稱(chēng)

組分成分

20407ES01

20407ES02

20407-A

PNGase F

PNGase F

15000 U

75000 U

20407-B1

Buffer 1（10×）

5% SDS; 400 mM DTT

150 μL

750 μL

20407-B2

Buffer 2（10×）

200 mM Tris, PH 7.5

300 μL

1500 μL

20407-B3

10% NP-40

10% NP-40 in MilliQ-H2O

300 μL

1500 μL

產(chǎn)品性質(zhì)

中文別名（Chinese synonym）

N-糖酰胺酶F；肽N-糖苷酶 F

英文別名（English synonym）

PNGase F

來(lái)源（Source）

酵母重組表達(dá)

分子量（Molecular weight）

36 kDa

比活性（Specific activity）

100000 U/mL

緩沖液組分（Buffer）

20 mM Tris-HCl pH 7.5, 50 mM NaCl, 5 mM EDTA, 50% Glycerol

酶活定義（Unit Definition）

1個(gè)酶活力單位指在10 μL的反應(yīng)體系中，37℃條件下1小時(shí)從10 μg變性RNase B中除去超過(guò)95%的碳水化合物所需要的酶量。

儲(chǔ)存條件

-25~-15℃保存，有效期1年。

使用方法

1、變性條件下蛋白質(zhì)去糖基化：

1）在水中加入1 μL Buffer 1和目標(biāo)糖蛋白（1-20 μg），至終體積10 μL；

2）100℃溫度下煮沸10 min使其變性，冰上冷卻，離心10秒；

2、非變性條件下蛋白質(zhì)去糖基化：

1）在水中加入2 μL的Buffer 2和目標(biāo)糖蛋白（1-20 μg）至最終體積為 20 μL。

2）加入 2~5 μL 的 PNGase F, 輕輕混勻。

3）37°C 孵育 4-24 h。

注意：在變性條件下大多數(shù)底物能夠更好的去糖基化，在非變性條件下可能需要增加PNGase F的量和延長(zhǎng)孵育時(shí)間。

注意事項(xiàng)

1. PNGase F建議搭配我司提供的配套緩沖液使用，按我司說(shuō)明書(shū)建議的操作量配套緩沖液足夠。如您由于使用體系造成配套緩沖液不足，可咨詢當(dāng)?shù)劁N(xiāo)售進(jìn)行購(gòu)買(mǎi)（Cat#20407-B, 包含20407-B1（750 μL）、20407-B2（1500 μL）、20407-B3（1500 μL））

2. 本產(chǎn)品僅作科研用途。

3. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。

Ver.CN20240614

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