麝鼠香腺脂肪酸合成及轉(zhuǎn)運(yùn)基因表達(dá)與麝鼠香成分變化研究

【摘要】： 麝鼠(Ondatra zibethicus)是一種資源分布廣、適應(yīng)性強(qiáng)、繁殖快的倉(cāng)鼠科鼠類。其成年雄性麝鼠香腺在繁殖期會(huì)分泌麝鼠香,香液中富含大量脂肪酸及其衍生物類和大環(huán)酮類物質(zhì),其成分和天然麝香相似,有潛力填補(bǔ)因麝保護(hù)嚴(yán)格而導(dǎo)致天然麝香產(chǎn)量較低的市場(chǎng)空白。麝鼠香腺發(fā)育變化經(jīng)歷規(guī)律的由膨大到萎縮直至消失消退的過(guò)程,因此,研究麝鼠香腺發(fā)育過(guò)程中不同基因表達(dá)變化至關(guān)重要,有助于探究香腺發(fā)育機(jī)制和泌香規(guī)律從而提高香液的質(zhì)量和產(chǎn)量。本研究通過(guò)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)2月~9月末的麝鼠香腺中脂肪酸從頭合成相關(guān)基因Acc、Fasn;脂肪酸碳鏈延伸相關(guān)基因Elovl 1~7;脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)基因Lpl、Fatp1~Fatp 6、Cd36和Fabp-pm的表達(dá)情況,并選取其中部分基因所翻譯的蛋白進(jìn)行免疫印跡實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證其結(jié)果可靠性。選取Elovl 1對(duì)其多轉(zhuǎn)錄本進(jìn)行生物信息分析。按照麝鼠在天然泌香過(guò)程中是否進(jìn)行過(guò)人工采集,將麝鼠香分為“初提香”和“采集香”,選取麝鼠5月的“初提香”、8月的“初提香”和“采集香”,進(jìn)行氣象色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)檢測(cè)其化學(xué)成分并分析組分含量。結(jié)果顯示,以麝鼠香腺9月末基因相對(duì)表達(dá)量為對(duì)照,所有相關(guān)基因表達(dá)量均出現(xiàn)隨月份變化先上升再下降趨勢(shì),且普遍在麝鼠繁殖期表達(dá)量達(dá)到最高。在脂肪酸從頭合成相關(guān)基因中,以Acc為例,在2月~5月末極顯著上調(diào)(P≤0.01),6月~8月末顯著上調(diào)(P≤0.05);脂肪酸碳鏈延伸相關(guān)基因中,以Elovl 1為例,在2月~7月末極顯著上調(diào)(P≤0.01);脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)基因中,Fatp家族在麝鼠香腺中只表達(dá)Fatp 1、Fatp3和Fatp4,以Fatp 1為例,在3、4月末顯著上調(diào)(P≤0.05)。Elovl 1基因在麝鼠香腺中表達(dá)2個(gè)轉(zhuǎn)錄本,能編碼2個(gè)不同的蛋白,分別由313個(gè)氨基酸和279個(gè)氨基酸組成,均是穩(wěn)定的親脂性、非分泌蛋白,具有7個(gè)跨膜螺旋區(qū),亞細(xì)胞定位均主要位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。長(zhǎng)轉(zhuǎn)錄本表達(dá)占主導(dǎo)地位。麝鼠5月初提香和8月初提香中大環(huán)酮類化合物相對(duì)含量顯著高于脂肪酸類及其衍生物,8月采集香中脂肪酸類及其衍生物相對(duì)含量則較高。實(shí)驗(yàn)分析結(jié)果顯示,脂肪酸合成及轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)基因表達(dá)規(guī)律與麝鼠香腺的發(fā)育、萎縮及泌香周期相吻合,提示相關(guān)基因參與麝鼠香腺發(fā)育和泌香的調(diào)控。脂肪酸類與大環(huán)酮類化合物在麝鼠香中占比變化,暗示麝鼠香在分泌期存在由脂肪酸及其衍生物向大環(huán)酮類化合物轉(zhuǎn)變成熟的趨勢(shì)。

【學(xué)位授予單位】：東北林業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2022

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