本發(fā)明屬于生物發(fā)酵資源化，更具體地說(shuō)，本發(fā)明涉及一種基于微生物菌株生物發(fā)酵茶泥廢渣的方法。

背景技術(shù)：

1、微生物是近年來(lái)備受關(guān)注的一種蛋白來(lái)源，比如，微生物飼料主要利用微生物的發(fā)酵作用改變?cè)系睦砘誀?，或提高消化吸收率及其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值，或解毒、或脫毒，或積累有用的中間產(chǎn)物。還有一種是菌體蛋白飼料，是利用來(lái)源廣泛的廢棄物、礦物、纖維素及糖類(lèi)資源培養(yǎng)的微生物菌體蛋白。這兩類(lèi)微生物飼料是不可截然分開(kāi)，發(fā)酵飼料中也包含著營(yíng)養(yǎng)豐富的菌體蛋白，而菌體蛋白的粗制品尤其是固態(tài)法生產(chǎn)的菌體蛋白飼料，亦包含有菌體之外的其他成分。

2、生物發(fā)酵法，是利用功能微生物菌種對(duì)蛋白質(zhì)原料進(jìn)行液態(tài)或固態(tài)發(fā)酵，發(fā)酵法過(guò)程中，活性微生物菌體直接參與生化代謝，作用于大分子蛋白；活性微生物菌體的生化代謝可以修飾某些功能基團(tuán)，還可以合成、分泌附加的小肽物質(zhì)；通過(guò)微生物的代謝、發(fā)酵可以合成許多復(fù)雜的可供于直接利用的初級(jí)代謝產(chǎn)物和次級(jí)代謝產(chǎn)物。

3、茶皂素是一類(lèi)天然提取出來(lái)的淡黃色微細(xì)粉末糖苷化合物，提純脫色后純品為白色微細(xì)柱狀晶體。茶皂素具有原料來(lái)源廣、成本低、操作簡(jiǎn)單和綠色安全等特點(diǎn)，并且是一種性能良好的天然表面活性劑，并且具有溶血作用。茶皂素在提純、脫色過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生一些副產(chǎn)物，稱(chēng)之為茶泥廢渣。雖然無(wú)法直接利用，但是其中富含豐富的多糖類(lèi)物質(zhì)、蛋白原料，針對(duì)現(xiàn)有矛盾，策略目標(biāo)就是提高蛋白源的利用率，盡可能地挖掘其在農(nóng)藥、飼料、養(yǎng)殖等領(lǐng)域的應(yīng)用。

4、因此，本申請(qǐng)?zhí)岢隽艘环N基于微生物菌株生物發(fā)酵的提高蛋白利用率的發(fā)酵方法，利用微生物菌株生物發(fā)酵茶泥廢渣分解大分子蛋白，提高游離氨基酸含量，進(jìn)一步探索茶泥廢渣在畜牧禽類(lèi)水產(chǎn)養(yǎng)殖方向的應(yīng)用，拓展其在醫(yī)藥衛(wèi)生、紡織、日用化工、食品包裝等領(lǐng)域越來(lái)越廣泛的應(yīng)用。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種基于微生物菌株發(fā)酵茶泥廢渣，通過(guò)生物發(fā)酵改善廢渣中游離氨基酸含量的方法。

2、本發(fā)明提供以下技術(shù)方案：

3、一種基于微生物菌株生物發(fā)酵茶泥廢渣的方法，包括以下步驟：

4、茶泥廢渣經(jīng)過(guò)120℃高溫滅菌處理20min，制備茶泥廢渣固體培養(yǎng)基；將培養(yǎng)好的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期發(fā)酵種子液接種到茶泥廢渣固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基中，攪拌均勻，30℃靜置發(fā)酵。

5、發(fā)酵種子液的制備：所有操作均在無(wú)菌條件下進(jìn)行。-80℃冰箱取出凍存菌種，緩慢解凍，滅菌槍頭吸取100μl菌種，加入到40ml已滅菌液體培養(yǎng)基中，放入30℃恒溫?fù)u床180r/min進(jìn)行搖瓶活化。

6、各菌種生長(zhǎng)曲線的測(cè)定及接種時(shí)間的確定：采用分光光度計(jì)比濁法繪制菌種生長(zhǎng)曲線圖，并對(duì)其生長(zhǎng)活躍期進(jìn)行判斷，選擇菌種處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期時(shí)的菌液接種到固體發(fā)酵培養(yǎng)基中。

7、優(yōu)選地，所述發(fā)酵種子液的菌種為枯草桿菌和米曲霉。

8、優(yōu)選地，所述枯草桿菌和米曲霉的比例為3:1-1:3。

9、優(yōu)選地，所述枯草桿菌和米曲霉的比例為1:1。

10、優(yōu)選地，所述枯草桿菌和米曲霉單獨(dú)生物發(fā)酵處理后同時(shí)接種到茶泥廢渣固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基中。

11、優(yōu)選地，所述靜置發(fā)酵的時(shí)間為24-72h。

12、進(jìn)一步地，采用上述方法生物發(fā)酵后的茶泥廢渣中游離氨基酸含量是發(fā)酵前的8～9倍。

13、因此，本發(fā)明還提供了上述的方法在養(yǎng)殖飼料制備中的應(yīng)用。

14、本發(fā)明的原理：本發(fā)明基于微生物菌株生物發(fā)酵茶泥廢渣固體發(fā)酵底物。利用功能微生物菌種對(duì)蛋白質(zhì)原料進(jìn)行液態(tài)或固態(tài)發(fā)酵，發(fā)酵法過(guò)程中，活性微生物菌體直接參與生化代謝，作用于大分子蛋白；活性微生物菌體的生化代謝可以修飾某些功能基團(tuán)，還可以合成、分泌附加的小肽物質(zhì)；通過(guò)微生物的代謝、發(fā)酵可以合成許多復(fù)雜的可供于直接利用的初級(jí)代謝產(chǎn)物和次級(jí)代謝產(chǎn)物。因此，本發(fā)明利用微生物菌株生物發(fā)酵茶泥廢渣后固體培養(yǎng)基中游離氨基酸的8～9倍增長(zhǎng)，拓展了茶泥廢渣在養(yǎng)殖飼料業(yè)的應(yīng)用前景。

15、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果：

16、本發(fā)明提供了一種基于微生物菌株生物發(fā)酵茶泥廢渣的方法；為微生物菌株生物發(fā)酵茶泥廢渣提供了一種游離氨基酸含量提升方法以及生物發(fā)酵工藝優(yōu)化條件，游離氨基酸的含量提高了8～9倍，拓展了茶泥廢渣在養(yǎng)殖飼料業(yè)的應(yīng)用前景。

17、本發(fā)明中采用的生物發(fā)酵方法便于控制，易于擴(kuò)大生產(chǎn)規(guī)模，產(chǎn)物制備工序簡(jiǎn)化，生產(chǎn)面積需求小，生產(chǎn)效率高，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，產(chǎn)品易于提取、精制備等優(yōu)勢(shì)。

技術(shù)特征：

1.一種基于微生物菌株生物發(fā)酵茶泥廢渣的方法，其特征在于，包括以下步驟：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述發(fā)酵種子液的菌種為枯草桿菌和米曲霉。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，所述枯草桿菌和米曲霉的比例為3:1-1:3。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述枯草桿菌和米曲霉的比例為1:1。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，所述枯草桿菌和米曲霉單獨(dú)生物發(fā)酵處理后同時(shí)接種到茶泥廢渣固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基中。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述靜置發(fā)酵的時(shí)間為24-72h。

7.根據(jù)權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，茶泥廢渣固體培養(yǎng)基的制備方法如下：

8.權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)所述的方法在養(yǎng)殖飼料制備中的應(yīng)用。

技術(shù)總結(jié)
本申請(qǐng)涉及一種基于微生物菌株生物發(fā)酵茶泥廢渣的方法，屬于生物發(fā)酵資源化技術(shù)領(lǐng)域。其包括以下步驟：茶泥廢渣經(jīng)過(guò)120℃高溫滅菌處理20min，制備茶泥廢渣固體培養(yǎng)基；將培養(yǎng)好的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期發(fā)酵種子液接種到茶泥廢渣固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基中，攪拌均勻，30℃靜置發(fā)酵。本發(fā)明中利用微生物菌株生物發(fā)酵茶泥廢渣，實(shí)現(xiàn)了游離氨基酸的8～9倍增長(zhǎng)，增強(qiáng)了茶泥廢渣中大分子蛋白原料的利用率，拓展了茶泥廢渣在養(yǎng)殖飼料業(yè)的應(yīng)用前景。

技術(shù)研發(fā)人員：楊?lèi)?歐陽(yáng)鵬飛,熊斌,歐子言,張曉兵,吳振軍
受保護(hù)的技術(shù)使用者：湖南山潤(rùn)油茶科技發(fā)展有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/1/15

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