【摘要】：炎癥是指機(jī)體對(duì)感染、外來物質(zhì)或其他原因(如抗原抗體復(fù)合物)所致?lián)p傷的一種反應(yīng)。目前研究植物水提取液抗炎活性實(shí)驗(yàn)方法主要有兩種:一種是活體動(dòng)物實(shí)驗(yàn);另一種是細(xì)胞實(shí)驗(yàn)。但這兩種方法都存在費(fèi)時(shí)、費(fèi)力且花費(fèi)大的弊端。而分光光度法是近年來較為常用的體外抗炎方法,利用LOX活性來表征純化合物的抗炎效果,但該方法在藥用植物水提液方面應(yīng)用較少,且有研究表明其檢測(cè)出的結(jié)果不理想且重現(xiàn)性差,所以,在此基礎(chǔ)上本文對(duì)分光光度法進(jìn)行進(jìn)一步的修改和完善,以填補(bǔ)目前LOX活性表征藥用植物水提液抗炎效果的空缺。以肉桂、茵陳蒿、淫羊藿等18種藥用植物按料水的質(zhì)量體積比1:20獲得的水提液為試驗(yàn)材料,通過檢測(cè)水提液為0.5mg/μL生藥濃度時(shí),對(duì)LOX活性的抑制程度來體現(xiàn)其抗炎活性,利用紫外分光光度法檢測(cè)藥用植物水提液與LOX催化底物亞油酸反應(yīng)生成的共軛二烯量在234 nm處的吸光度值,推算出酶活力。結(jié)果表明:1)18種藥用植物水提液的抗炎率在1.13%~96.06%之間,其中石榴皮、厚樸、迷迭香、蚊子草、澤漆和肉桂水提液的LOX活性抗炎率都在80%以上;而甘草、白術(shù)和牛膝這三種植物藥材水提液的抗炎率都在10%以下。2)以迷迭香水提液為例,評(píng)價(jià)該檢測(cè)方法的精密度和重復(fù)性,經(jīng)四次獨(dú)立平行試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)該方法的RSD(相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差)為1.17%(<2.0%)。3)以厚樸水提液為例,對(duì)藥用植物水提液的抗炎活性進(jìn)行精準(zhǔn)定量,通過倍比稀釋試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)在一定濃度范圍內(nèi),水提液濃度的1 g值和抗炎率間存在良好的線性關(guān)系,相關(guān)系數(shù)R~2值為0.958 7,厚樸水提液的抗炎活性IC_(50)值為22.38μg/μL。以上結(jié)果提示,通過體外檢測(cè)LOX的活性變化可以表征藥用植物水提液的抗炎效果,該試驗(yàn)方法相較于以往抗炎活性實(shí)驗(yàn)方法中常用的活體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞實(shí)驗(yàn),具有簡(jiǎn)單、直接、快速、結(jié)果穩(wěn)定且花費(fèi)較低等優(yōu)點(diǎn),整個(gè)檢測(cè)過程可在1 h內(nèi)完成,并可精準(zhǔn)定量水提液的抗炎活性濃度,尤其適用于多種水提液的初篩工作。

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