柚皮提取物的降血脂和抑腫瘤作用張海德１，何繼芹１，楊曉泉２（１．華南熱帶農(nóng)業(yè)大學(xué)工學(xué)院，海南　儋州 ５７１７３７；２．華南理工大學(xué)輕工與食品學(xué)院，廣東　廣州 ５１０６４０）摘 要：目的：探討柚皮提取物的生物活性。

方法：采用動(dòng)物試驗(yàn)研究了柚皮抗氧化物質(zhì)的降血脂和抑腫瘤作用。

結(jié)果：與高脂組相比，樣品組能顯著降低昆明種小白鼠血清膽固醇（ＴＣ）、血清甘油三酯（ＴＧ）和低密度脂蛋白膽固醇（ＬＤＬ－Ｃ）的濃度，并相對(duì)升高高密度脂蛋白膽固醇（ＨＤＬ－Ｃ）的濃度（ｐ＜０．０５）。

試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)柚皮提取液對(duì)Ｓ１８０肉瘤具有抑制作用，抑瘤率為２９．７％，與正常對(duì)照組比較，腫瘤對(duì)照組小鼠的胸腺明顯縮小，平均濕重指數(shù)為１．２１±０．４３ｍｇ／ｋｇ，明顯低于正常對(duì)照組（２．６４±０．８２ｍｇ／ｋｇ）?。ǎ穑迹埃埃保?。

而樣品組小鼠胸腺指數(shù)（１．９６±０．５４ｍｇ／ｋｇ）　明顯高于腫瘤對(duì)照組（ｐ＜０．０５）。

結(jié)論：在一定的劑量下，柚皮提取液能降低高脂昆明種小白鼠血脂；對(duì)荷Ｓ１８０小鼠的腫瘤生長(zhǎng)有抑制作用，并且能增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能。

關(guān)鍵詞：柚；提取物；降血脂；抑腫瘤Ａｎｔｉｔｕｍｏｒ　ａｎｄ?。粒睿簦椋欤椋穑澹恚椋恪。粒悖簦椋铮睢。铮?Ｐｕｍｍｅｌｏ?。ǎ茫椋簦颍酰蟆。纾颍幔睿洌椋蟆。蹋。希螅猓澹悖耄。校澹澹臁。牛簦颍幔悖簦冢龋粒危恰。龋幔椋洌澹?，ＨＥ　Ｊｉ－ｑｉｎ１，ＹＡＮＧ?。兀椋幔铮瘢酰幔睿玻ǎ保茫铮欤欤澹纾濉。铮妗。裕澹悖瑁睿铮欤铮纾?，?。樱铮酰簦琛。茫瑁椋睿帷。眨睿椋觯澹颍螅椋簦。铮妗。裕颍铮穑椋悖幔臁。粒纾颍椋悖酰欤簦酰颍?，?。模椋幔睿瑁铮?５７１７３７，?。茫瑁椋睿幔唬玻。茫铮欤欤澹纾濉。铮妗。蹋椋纾瑁簟。桑睿洌酰螅簦颍。幔睿洹。疲铮铮洹。裕澹悖瑁睿铮欤铮纾?，?。樱铮酰簦琛。茫瑁椋睿帷。眨睿椋觯澹颍螅椋簦。铮妗。裕澹悖瑁睿铮欤铮纾?，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ ５１０６４０，?。茫瑁椋睿幔粒猓螅簦颍幔悖簟。海希猓辏澹悖簦椋觯澹骸。樱簦酰洌。簦瑁濉。猓椋铮幔悖簦椋觯椋簦。铮妗。澹簦颍幔悖簟。妫颍铮怼。穑酰恚恚澹欤铩。穑澹澹欤。停澹簦瑁铮洌螅骸。裕瑁濉。幔睿簦椋欤椋穑澹恚椋恪。幔悖簦椋铮睢。幔睿洹。幔睿簦椋簦酰恚铮颍悖幔穑幔悖椋簦。铮妗。簦瑁濉。澹簦颍幔悖簟。鳎澹颍濉。螅簦酰洌椋澹洹。猓。恚椋悖濉。椋睢。觯椋觯铮。遥澹螅酰欤簦螅骸。裕瑁濉。螅幔恚穑欤濉。纾颍铮酰稹。铮妗。恚椋悖濉。瑁幔洹。螅椋纾睿椋妫椋悖幔睿簦欤。欤铮鳎澹颉。悖铮睿悖澹睿簦颍幔簦椋铮睢。铮妫簦铮簦幔臁。悖瑁铮欤澹螅簦澹颍铮臁。ǎ裕茫。簦颍椋纾欤悖澹颍椋洌濉。ǎ裕牵?，?。幔睿洹。欤铮鳌。洌澹睿螅椋簦。欤椋穑铮穑颍铮簦澹椋睢。悖瑁铮欤澹螅簦澹颍铮臁。ǎ蹋模蹋茫。ǎ穑迹埃埃担。螅椋纾睿椋妫椋悖幔睿簦欤。瑁椋纾瑁澹颍悖铮睿悖澹睿簦颍幔簦椋铮睢。铮妗。瑁椋纾琛。洌澹睿螅椋簦。欤椋穑铮穑颍铮簦澹椋睢。悖瑁铮欤澹螅簦澹颍铮臁。ǎ龋模蹋茫。ǎ穑迹埃埃担。椋睢。螅澹颍酰怼。铮妗。恚椋悖濉。簦瑁幔睢。簦瑁幔簟。铮妗。簦瑁濉。瑁椋纾琛。欤椋穑椋洹。悖铮睿簦颍铮欤纾颍铮酰穑。裕瑁濉。颍幔簦濉。铮妗。椋睿瑁椋猓椋簦椋睿纭。樱保福啊。纾颍铮鳎簦琛。椋睢。螅幔恚穑欤濉。纾颍铮酰稹。鳎幔蟆。玻梗罚ィ。裕瑁濉。恚澹幔睢。鳎澹簟。鳎澹椋纾瑁簟。铮妗。簦瑁恚酰蟆。纾欤幔睿洹。铮妗。簦酰恚铮颉。悖铮睿簦颍铮臁。纾颍铮酰穑鳎幔蟆。保玻薄溃埃矗常恚纾耄?，?。螅椋纾睿椋妫椋悖幔睿簦欤。欤铮鳎澹颉。簦瑁幔睢。簦瑁幔簟。铮妗。簦瑁濉。睿铮颍恚幔臁。悖铮睿簦颍铮臁。纾颍铮酰稹。鳎瑁椋悖琛。鳎幔蟆。玻叮础溃埃福玻恚纾耄纭。ǎ穑迹埃埃保?，?。幔睿洌簦瑁濉。恚澹幔睢。鳎澹簟。鳎澹椋纾瑁簟。铮妗。簦瑁恚酰蟆。纾欤幔睿洹。铮妗。螅幔恚穑欤濉。纾颍铮酰稹。鳎幔蟆。保梗丁溃埃担矗恚纾耄?，　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ?。瑁椋纾瑁澹颉。簦瑁幔睢。簦瑁幔簟。铮妗。簦瑁濉。簦酰恚铮颉。悖铮睿簦颍铮欤纾颍铮酰稹。ǎ穑迹埃埃担。茫铮睿悖欤酰螅椋铮睿骸。裕瑁濉。澹簦颍幔悖簟。悖铮酰欤洹。洌澹悖澹幔螅濉。簦瑁濉。欤椋穑澹恚椋帷。悖铮睿悖澹睿簦颍幔簦椋铮睢。铮妗。鳎瑁椋簦濉。耍酰睿恚椋睿纭。恚椋悖?，?。椋睿瑁椋猓椋簟。簦瑁濉。纾颍铮鳎簦瑁铮妗。簦酰恚铮颉。樱保福啊。幔睿洹。椋恚穑颍铮觯濉。簦瑁濉。椋恚恚酰睿椋簦。幔猓椋欤椋簦。铮妗。簦瑁濉。恚椋悖澹耍澹。鳎铮颍洌螅海穑酰恚恚澹欤?；ｅｘｔｒａｃｔ；ａｎｔｉｌｉｐｅｍｉｃ；ａｎｔｉｔｕｍｏｒ中圖分類號(hào)：Ｑ９４６ 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Ａ 文章編號(hào)：１００２－６６３０（２００５）增刊－００７３－０４收稿日期：２００５－０７－１５作者簡(jiǎn)介：張海德（１９７０－），男，副教授，博士，研究方向?yàn)檗r(nóng)產(chǎn)品深加工、天然產(chǎn)物化學(xué)。

天然抗氧化劑很受大眾的歡迎，從植物產(chǎn)品中提取具有功能性的天然抗氧化物質(zhì)，是國(guó)際上天然產(chǎn)物研究熱點(diǎn)之一，也是農(nóng)產(chǎn)品精深加工重要內(nèi)容之一，能有效地提升農(nóng)產(chǎn)品附加值。

近年來(lái)的調(diào)查資料表明，心腦血管疾病是除癌癥之外的另一嚴(yán)重危害人類健康的疾病，而高血脂是其最重要的病因，特別是血漿中總膽固醇水平與這類病關(guān)系尤為密切。

為了預(yù)防和治療高血脂癥，科學(xué)工作者不斷尋找降脂藥物和利用某些食物或食物成分來(lái)達(dá)到降低血脂的目的。

柚（Ｃｉｔｒｕｓ?。纾颍幔睿洌椋蟆。蹋。铮螅猓澹悖耄偈|香科常綠喬木，原產(chǎn)東南亞，我國(guó)長(zhǎng)江以南各省有栽培。

近年來(lái)的研究表明［１，２］，蕓香科柑橘屬的橘、橙和柚等水果中富含天然抗氧化物質(zhì)，并被分離鑒定為黃酮化合物等，這些水果也是人類主要的膳食黃酮來(lái)源之一［３］。

黃酮化合物具有多種生理活性功能，研究較多的是其抗氧化活性［４，５］、清除自由基作用［６，７］、降血脂作用［８，９］和抗腫瘤作用［１０，１１］等。

本文對(duì)從柚皮中提取分離出含黃酮化合物的組分Ｃ３，進(jìn)行了其降血脂和抑腫瘤作用的研究。

１材料與方法１．１樣品取沙田柚（Ｃｉｔｒｕｓ　ｇｒａｎｄｉｓ?。蹋。希螅猓澹悖搿。觯幔颍。樱瑁幔簦椋幔睿铮?，　購(gòu)于廣州市農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)）的外果皮，破碎成１～４ｍｍ的粒度后，用７０％乙醇溶液在５０℃下的搖床上密封、振動(dòng)浸取４ｈ，過(guò)濾，濾液經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀真空濃縮（Ｔ＜５０℃）后，上聚酰胺柱層析分離，用水－甲醇梯度洗脫，得到抗氧化活性較強(qiáng)的組分Ｃ３，真空濃縮（Ｔ＜５０℃）后，測(cè)得其總黃酮含量為６５．５％。

１．２儀器ＳＨＺ－８８臺(tái)式水浴恒溫振蕩器 江蘇太倉(cāng)市實(shí)驗(yàn)設(shè)備廠；Ｍｏｄｅｌ－３　旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 上海醫(yī)械專機(jī)廠；ＨＬ－５恒流泵 上海滬西分析儀器廠；ＸＷＴ－Ｓ小型臺(tái)式記錄儀 上海自動(dòng)化儀表三廠；ＨＤ－１核酸蛋白檢測(cè)儀 上海滬西分析儀器廠；７１７０Ａ全自動(dòng)生化檢測(cè)儀 日本（日立公司）；ＴＧＬ－１Ｇ高速臺(tái)式離心機(jī) 上海醫(yī)用分析儀器廠；ＪＡ２００３電子天平 上海民橋電子儀器有限公司。

１．３方法１．３．１柚皮提取物的降血脂作用１．３．１．１實(shí)驗(yàn)動(dòng)物小白鼠（昆明種）３０只，購(gòu)于廣州新市石馬實(shí)驗(yàn)動(dòng)物場(chǎng)，體重２５～３０ｇ，雌雄不拘。

實(shí)驗(yàn)期間每日按動(dòng)物體重的２／１０給食，自由飲水。

１．３．１．２檢測(cè)項(xiàng)目血漿的血清膽固醇（ＴＣ），血漿低密度脂蛋白膽固醇（ＬＤＬ－Ｃ），血漿高密度脂蛋白膽固醇（ＨＤＬ－Ｃ），甘油三酯（ＴＧ），載脂蛋白Ａ１，載脂蛋白Ｂ。

１．３．１．３實(shí)驗(yàn)方法將動(dòng)物隨機(jī)分組，每組１０只老鼠。

（Ａ）　正常對(duì)照組；（Ｂ）　高脂對(duì)照組，每日灌胃生理鹽水一次；（Ｃ）　樣品組，每日灌胃樣品液一次。

劑量為０．５ｍｌ／２０ｇ?。猓?ｄ，連續(xù)７ｄ，于末次給藥后２ｈ，除正常對(duì)照組腹腔注射生理鹽水（０．５ｍｌ／只）外，各組動(dòng)物均以小鼠高膽固醇血癥快速造型法，一次腹腔注射７５％蛋黃乳（０．５ｍｌ／只），２０ｈ后，所有動(dòng)物股靜脈取血，靜置，分離血清，然后，在全自動(dòng)生化檢測(cè)儀上測(cè)定ＴＣ、ＨＤＬ－Ｃ、ＬＤＬ－Ｃ等的值。

１．３．２柚皮提取物的抑Ｓ１８０瘤作用１．３．２．１動(dòng)物及分組昆明種小鼠（３０只），購(gòu)于廣州新市石馬實(shí)驗(yàn)動(dòng)物場(chǎng)，體重２５～３０ｇ，小鼠隨機(jī)分成正常對(duì)照組（１０只老鼠）和腫瘤組（２０只），腫瘤組動(dòng)物于接種后再隨機(jī)分成腫瘤對(duì)照組（１０只）和樣品組（１０只）。

實(shí)驗(yàn)期間，動(dòng)物自由飲水及攝食，飼料為正常動(dòng)物生長(zhǎng)、繁殖用的飼料。

１．３．２．２瘤株及接種Ｓ１８０瘤，購(gòu)于中山醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，常規(guī)于鼠腹腔內(nèi)接種傳代。

實(shí)驗(yàn)接種時(shí)無(wú)菌抽出小鼠腹腔內(nèi)傳代５～６ｄ的腹水，生理鹽水１：５稀釋混勻，接種于小鼠左前腋窩下，每鼠０．２ｍｌ（約１０５個(gè)細(xì)胞）。

４ｄ后小鼠腹部隆起，腹腔內(nèi)已有腹水，以后腹水逐漸增多，表明小鼠已荷瘤。

１．３．２．３實(shí)驗(yàn)方法動(dòng)物接種腫瘤后第２ｄ，每天按時(shí)腹腔注射０．１ｍｌ樣品液二次，持續(xù)７ｄ，正常對(duì)照組與腫瘤對(duì)照組注射等量的生理鹽水。

實(shí)驗(yàn)中，各組可能會(huì)有個(gè)別動(dòng)物因注射或其它原因死亡而淘汰。

實(shí)驗(yàn)的第８ｄ，小鼠脫頸處死，解剖小鼠，完整取出腫瘤、胸腺及脾臟，稱重。

計(jì)算胸腺指數(shù)和脾臟指數(shù)。

所得結(jié)果以下列方式表示：臟器濕重（ｍｇ）臟器指數(shù)（ｍｇ／ｋｇ）＝————————…… （１）小鼠體重（ｋｇ）計(jì)算抑瘤率。

所得結(jié)果以下列方式表示：腫瘤抑制率對(duì)照組平均瘤重－給藥組平均瘤重—————————————————×１００％ （２）對(duì)照組平均瘤重１．４統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用Ｏｒｉｇｉｎ?。叮避浖?duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行Ｆ檢驗(yàn)和ｔ檢驗(yàn)。

２結(jié)果與分析２．１樣品制備把柚皮的乙醇浸取液，濃縮后用聚酰胺柱層析分離。

聚酰胺活化后，濕法裝柱，用水－甲醇溶液梯度洗脫。

得到四個(gè)組分，按洗脫順序分別命名為Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３和Ｃ４，如圖１所示。

從圖１中可看出，四種組分能較好地分開。

聚酰胺柱層析收集到的四種組分的抗氧化活性用亞油酸－硫氰酸鐵法作了比較，以對(duì)照組的抑制百分率為０％計(jì)，結(jié)果如圖２所示。

這些結(jié)果表明，組分Ｃ３是所有組分中抗氧化活性最強(qiáng)的。

本研究把組分Ｃ３的濃縮物作為試驗(yàn)樣品。

２．２柚皮提取物的降血脂作用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血清測(cè)定項(xiàng)目如表１所示。

數(shù)據(jù)采用Ｏｒｉｇｉｎ?。叮避浖谟?jì)算機(jī)上處理，多組平均數(shù)之間差異顯著性用單因素試驗(yàn)的方差分析進(jìn)行Ｆ檢驗(yàn)，組間平均數(shù)差異顯著性用ｔ檢驗(yàn)分析。

總膽固醇（ＴＣ）、甘油三酯（ＴＧ）、低密度脂蛋白（ＬＤＬ）和高密度脂蛋白（ＨＤＬ）等四項(xiàng)指標(biāo)的多組平均數(shù)之間的方差分析的Ｆ檢驗(yàn)表明，它們都存在顯著差異（ｐ＜０．０５）。

組間平均數(shù)差異顯著性用ｔ檢驗(yàn)得知，正常對(duì)照組與高脂對(duì)照組有顯著差異（ｐ＜０．０５），這表明，高脂對(duì)照組造脂成功。

樣品組與高脂對(duì)照組間存在顯著差異（ｐ＜０．０５），說(shuō)明樣品能有效地對(duì)小白鼠的血脂起作用。

試驗(yàn)結(jié)果表明，在一定的劑量下，柚皮提取液能使血清ＴＣ、ＴＧ、ＬＤＬ－Ｃ的濃度顯著下降，并相對(duì)提高血清ＨＤＬ－Ｃ的濃度，說(shuō)明，適量的柚皮提取液對(duì)冠心病和動(dòng)脈粥樣硬化可能有一定的防治作用。

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