ICS13.100C75

DB12

天津市地方標準

DB12/T465—2012

預防性健康檢查糞便中沙門氏菌、志賀氏菌的檢測方法

DetectionmethodsofSalmonellaandShigellawhoneedtopasspreventivehealthcheck

2012-11-14發(fā)布2013-02-15實施

天津市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布

I

DB12/T465—2012

前言

本標準按照GB/T1.1-2009《標準化工作導則第1部分：標準的結(jié)構(gòu)和編寫》的標準文本的格式和文字進行編寫。

本標準由天津市南開區(qū)疾病預防控制中心提出。

本標準起草單位：天津市南開區(qū)疾病預防控制中心、天津正大乾坤生物科技有限公司。本標準主要起草人：柳光斌、陳金枝、龐作章、馬均彪、王楠、于磊、沈宗林。

II

DB12/T465—2012

引言

本文件的發(fā)布機構(gòu)提請注意，聲明符合本文件時，可能涉及到6.1.2條采便管與微生物采樣增菌培養(yǎng)管內(nèi)容的采便套管和采便棒相關的專利的使用。

本文件的發(fā)布機構(gòu)對于該專利的真實性、有效性和范圍無任何立場。

該專利持有人已向本文件的發(fā)布機構(gòu)保證，他愿意同任何申請人在合理且無歧視的條款和條件下，就專利授權(quán)許可進行談判。該專利持有人的聲明已在本文件的發(fā)布機構(gòu)備案。相關信息可以通過以下聯(lián)系方式獲得：

專利持有人姓名：馬均彪

地址：天津市南開區(qū)東馬路新安花園A-1-604

請注意除上述專利外，本文件的某些內(nèi)容仍可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔識別這些專利的責任。

1

DB12/T465—2012志賀氏菌的檢測方法志賀氏菌的檢測方法

1范圍

本標準規(guī)定了預防性健康檢查糞便中沙門氏菌、志賀氏菌的檢測方法的術(shù)語和定義、設備和實驗器具、培養(yǎng)基和試劑、檢驗程序、操作步驟以及結(jié)果報告。

本標準適用于疾病預防控制機構(gòu)和醫(yī)療機構(gòu)對食品、公共場所等行業(yè)從業(yè)人員，進行沙門氏菌和志賀氏菌健康帶菌者的檢測和確認。

2術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件。2.1

采便管Collectingpipe

由采便套管和采便棒構(gòu)成的采便裝置，采便套管內(nèi)裝有經(jīng)鈷60輻射滅菌的SN液體增菌液培養(yǎng)基。2.2

帶菌者Carriers

無任何臨床表現(xiàn)，從糞便中分離到沙門氏菌（傷寒和副傷寒菌）或志賀氏菌的人群。

3設備和實驗器具

3.1冰箱：4℃~8℃。

3.2恒溫培養(yǎng)箱：36℃±1℃。

3.3電子天平：感量0.1g。

3.4錐形瓶:容量500mL，250mL。

3.5無菌培養(yǎng)皿：直徑90mm。

4培養(yǎng)基和試劑

4.1沙門氏菌和志賀氏菌增菌液（SN）：見附錄A中A.1。

4.2沙門氏菌、志賀氏菌（SS）瓊脂培養(yǎng)基：見附錄A中A.2。

4.3HE瓊脂：見附錄A中A.3。

4.4木糖賴氨酸脫氧膽鹽（XLD）瓊脂：見附錄A中A.4。

2

DB12/T465—2012

4.5克氏雙糖鐵瓊脂（KIA）見附錄A中糞便A.5。

4.6三糖鐵（TSI）瓊脂：見附錄A中糞便A.6。

4.7動力-吲哚-尿素（MIU）培養(yǎng)基：見附錄A中A.7。

4.8蛋白胨水、靛基質(zhì)試劑：見附錄A中A.8。

4.9氰化鉀（KCN）培養(yǎng)基：見附錄A中A.9。

4.10賴氨酸鐵瓊脂（LIA）：見附錄A中A.10。

4.11糖發(fā)酵管：見附錄A中A.11。

4.12鄰硝基酚阝-D半乳糖苷（ONPG）培養(yǎng)基：見附錄A中A.12。

4.13半固體瓊脂：見附錄A中A.13。

4.14丙二酸鈉培養(yǎng)基：見附錄A中A.14。

4.15沙門氏菌屬O、H和Vi診斷血清。

4.16志賀氏菌屬診斷血清

5糞便中沙門氏菌、志賀氏菌的檢驗程序

沙門氏菌、志賀氏菌的檢驗程序見圖1：

3

DB12/T465—2012

糞便采集

!

接種SN增菌液

36℃±1℃

18h～24h

HE或XLD或SS瓊脂平板和麥康凱瓊脂平板分離

36℃±1℃

18h～24h

挑取可疑菌落

!

接種KIA或TSI，及MIU、LIA

36℃±1℃!18h～24h

血清學分型↓↓

血清學分型

系統(tǒng)生化鑒定

↓

報告

圖1沙門氏菌、志賀氏菌檢驗程序圖

6操作步驟

6.1糞便標本采集

6.1.1肛

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