本發(fā)明涉及生物，具體涉及象耳豆根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)海藻糖合成酶相關(guān)蛋白、其編碼基因、dsrna及應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、海藻糖是一類(lèi)非還原性雙糖，主要存在于真菌、細(xì)菌、植物、昆蟲(chóng)和線(xiàn)蟲(chóng)中。研究表明，海藻糖在生物體耐受非生物脅迫(如干旱、缺氧和寒冷等)過(guò)程中，發(fā)揮著重要的作用。在線(xiàn)蟲(chóng)中，海藻糖合成的唯一途徑是通過(guò)tps/tpp途徑進(jìn)行的。在線(xiàn)蟲(chóng)模式生物秀麗隱桿線(xiàn)蟲(chóng)中，尿苷二磷酸葡萄糖和葡萄糖-6-磷酸首先通過(guò)tps產(chǎn)生海藻糖-6-磷酸，隨后通過(guò)tpp脫磷酸產(chǎn)生海藻糖。在秀麗隱桿線(xiàn)蟲(chóng)中，cetps1，cetps2和cegob通過(guò)調(diào)控海藻糖的合成，能夠影響秀麗隱桿線(xiàn)蟲(chóng)的壽命及對(duì)高溫和缺氧的耐受力。在水稻干尖線(xiàn)蟲(chóng)中，abtps和abtpp通過(guò)調(diào)控海藻糖的合成參與著線(xiàn)蟲(chóng)厭氧生活與對(duì)滲透壓的耐受力。在松材線(xiàn)蟲(chóng)中，bxtps與bxtpp通過(guò)調(diào)控海藻糖的合成參與著抗逆型蟲(chóng)態(tài)dj3的形成。

2、象耳豆根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)(meloidogyne enterolobii)是造成我國(guó)農(nóng)業(yè)嚴(yán)重?fù)p失的重要根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)。近些年的調(diào)查表明，象耳豆根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)的分布區(qū)域已經(jīng)從最先報(bào)道的我國(guó)海南和廣東省，逐步擴(kuò)散至廣西、福建、云南、湖南、陜西和寧夏等省份。其分布區(qū)域的擴(kuò)展有環(huán)境因素，如全球變暖氣溫升高的影響；但同樣可能有線(xiàn)蟲(chóng)自身因素，如低溫耐受能力提高的影響。然而在這方面，相關(guān)的研究還非常缺乏。海藻糖作為一類(lèi)在昆蟲(chóng)和植物中廣泛報(bào)道的低溫保護(hù)劑，其關(guān)鍵合成酶基因tps和tpp尚未在象耳豆根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)中完成鑒定和克隆，因此無(wú)法確定其最終功能。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明旨在通過(guò)對(duì)象耳豆根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)中tps和tpp基因進(jìn)行鑒定和克隆，明確其在根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)低溫耐受過(guò)程中所發(fā)揮的作用，為解析象耳豆根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)分布區(qū)域向北擴(kuò)展的原因，從而更好進(jìn)行根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)病害防控提供基礎(chǔ)。另外，對(duì)tps與tpp功能的研究，也可以為創(chuàng)制新型殺線(xiàn)劑提供潛在靶標(biāo)。

2、本發(fā)明的目的之一，提供象耳豆根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)海藻糖合成酶相關(guān)蛋白，所述蛋白的氨基酸序列如seq id no.1和seq id no.2所示。

3、本發(fā)明的目的之二，提供編碼所述蛋白的基因，所述基因的核苷酸序列如seq idno.3和seq id no.4所示。

4、本發(fā)明的目的之三，提供沉默所述的基因的dsrna，所述dsrna的核苷酸序列如seqid no.5和seq id no.6所示。

5、本發(fā)明的目的之四，提供所述蛋白、所述基因或所述dsrna在調(diào)控象耳豆根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)海藻糖合成中的應(yīng)用。

6、本發(fā)明的目的之五，提供所述蛋白、所述基因或所述dsrna在降低象耳豆根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)低溫耐受能力中的應(yīng)用。

7、本發(fā)明的目的之六，提供所述蛋白、所述基因或所述dsrna在防治象耳豆根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)中的應(yīng)用。

8、本發(fā)明的目的之七，提供一種含有所述dsrna的產(chǎn)品，所述產(chǎn)品包括降低象耳豆根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)海藻糖合成、降低象耳豆根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)低溫耐受能力或防治象耳豆根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)的產(chǎn)品。

9、進(jìn)一步的，所述產(chǎn)品為水溶液劑型，水溶液中的所述dsrna的濃度為1-3μg/μl。

10、本發(fā)明的目的之八，提供一種防治象耳豆根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)的方法，包括：沉默所述基因，降低象耳豆根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)的低溫耐受能力，實(shí)現(xiàn)防治象耳豆根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)的目的。

11、本發(fā)明具有如下有益效果：

12、本發(fā)明闡述了象耳豆根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)體內(nèi)海藻糖合成關(guān)鍵基因metps與metpp的基因功能，明確了metps和metpp在象耳豆根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)低溫耐受過(guò)程中發(fā)揮重要的作用，為象耳豆根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)種群分布區(qū)域向高緯度地區(qū)擴(kuò)展提供了可能的解釋?zhuān)瑫r(shí)為新型殺線(xiàn)劑的研發(fā)提供了潛在的生物學(xué)靶標(biāo)。

技術(shù)特征：

1.象耳豆根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)海藻糖合成酶相關(guān)蛋白，其特征在于，所述蛋白的氨基酸序列如seqid no.1和seq id no.2所示。

2.編碼權(quán)利要求1所述蛋白的基因，其特征在于，所述基因的核苷酸序列如seq idno.3和seq id no.4所示。

3.權(quán)利要求2所述的基因的dsrna。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的dsrna，其特征在于，所述dsrna的核苷酸序列如seq id no.5和seq id no.6所示。

5.權(quán)利要求1所述蛋白、權(quán)利要求2所述基因或權(quán)利要求3所述dsrna在調(diào)控象耳豆根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)海藻糖合成中的應(yīng)用。

6.權(quán)利要求1所述蛋白、權(quán)利要求2所述基因或權(quán)利要求3所述dsrna在降低象耳豆根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)低溫耐受能力中的應(yīng)用。

7.權(quán)利要求1所述蛋白、權(quán)利要求2所述基因或權(quán)利要求3所述dsrna在防治象耳豆根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)中的應(yīng)用。

8.一種含有權(quán)利要求3所述dsrna的產(chǎn)品，其特征在于，所述產(chǎn)品包括降低象耳豆根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)海藻糖合成、降低象耳豆根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)低溫耐受能力或防治象耳豆根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)的產(chǎn)品。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的產(chǎn)品，其特征在于，所述產(chǎn)品為水溶液劑型，水溶液中的所述dsrna的濃度為1-3μg/μl。

10.一種防治象耳豆根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)的方法，其特征在于，包括：沉默權(quán)利要求2所述基因，降低象耳豆根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)的低溫耐受能力，實(shí)現(xiàn)防治象耳豆根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)的目的。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及象耳豆根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)海藻糖合成酶相關(guān)蛋白、其編碼基因、dsRNA及應(yīng)用。所述蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。所述編碼基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。所述dsRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示。將所述dsRNA攝取到象耳豆根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)體內(nèi)，能夠降低象耳豆根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)海藻糖合成、降低象耳豆根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)低溫耐受能力，從而實(shí)現(xiàn)防治象耳豆根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)。本發(fā)明為象耳豆根結(jié)線(xiàn)蟲(chóng)種群分布區(qū)域向高緯度地區(qū)擴(kuò)展提供了可能的解釋?zhuān)瑫r(shí)為新型殺線(xiàn)劑的研發(fā)提供了潛在的生物學(xué)靶標(biāo)。

技術(shù)研發(fā)人員：潘嵩,魏佩瑤,李英梅,卓侃,林柏榮
受保護(hù)的技術(shù)使用者：陜西省生物農(nóng)業(yè)研究所
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/2/19

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