人參果中人參皂苷分離技術(shù)及提取物HPLC指紋圖譜研究

為了深入開(kāi)發(fā)利用人參果資源,本文應(yīng)用現(xiàn)代植物化學(xué)分離手段,研究了人參果中人參皂苷大孔吸附樹(shù)脂提取和高速逆流色譜分離;在此基礎(chǔ)上,對(duì)其部分化學(xué)成分進(jìn)行分離及結(jié)構(gòu)鑒定研究。為人參果資源的高效開(kāi)發(fā)及可持續(xù)利用奠定理論及方法學(xué)基礎(chǔ)。本項(xiàng)研究取得了如下進(jìn)展:1.首次應(yīng)用高速逆流色譜(HSCCC)對(duì)人參果中人參皂苷進(jìn)行了制備性分離。以乙酸乙酯-正丁醇-水(1:6:7,下相)為溶劑系統(tǒng),主機(jī)正轉(zhuǎn),轉(zhuǎn)速900r/min,流速2mL/min,固定相保留率40%,人參皂苷Re保留時(shí)間為200～230min,所得人參果皂苷Re經(jīng)HPLC分析,純度達(dá)到98.84%。2.對(duì)人參果皂苷大孔吸附樹(shù)脂吸附提取工藝進(jìn)行了研究,采用高效液相色譜法以Re、Rg1、Rb1、Rc、Rd和Rb2作為對(duì)照品,6種人參皂苷總和作為指標(biāo)對(duì)AB-8、D-101、HPD300、HPD400、HPD500、HPD450和HPD700型大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行了比較,對(duì)比了篩選出適合于人參果中皂苷富集的HPD400型大孔吸附樹(shù)脂,同時(shí)也對(duì)HPD400型大孔吸附樹(shù)脂的洗脫系統(tǒng)進(jìn)行了研究。3.采用超聲提取結(jié)合大孔吸附樹(shù)脂層析柱、硅膠中壓柱色譜對(duì)人參皂苷化學(xué)成分進(jìn)行了分離制備。大孔吸附樹(shù)脂洗脫部分進(jìn)行常規(guī)柱層及中壓柱層析分離,得到5個(gè)化合物B1、B2、B3、B4和B5,經(jīng)理化鑒定和有機(jī)波譜鑒定,確定其化合物分別為:人參皂苷Rg1、Re、Rc、Rd和Rb1。4.建立人參果提取物HPLC指紋圖譜。色譜柱,Shimdzu ODS 5μm(4.6mm×250mm),以流動(dòng)相A:乙腈,B:水,梯度洗脫,0～30min,A:20～20%;30～60min,A:80～20%;60～90min,A:20～20%。檢測(cè)波長(zhǎng)270nm,流速1mL/min;柱溫25℃。根據(jù)10批次供試品測(cè)定結(jié)果,經(jīng)與參照物對(duì)照以及比較所有測(cè)定和記錄的色譜圖,標(biāo)定共有指紋峰15個(gè),指紋圖譜相似度均0.90,經(jīng)過(guò)穩(wěn)定性、重現(xiàn)性、精密度考察,表明該方法穩(wěn)定、可靠,可操作性強(qiáng)。本文創(chuàng)新點(diǎn)如下:1.首次采用HSCCC分離制備人參果中人參皂苷Re。2.首次建立人參果提取物HPLC指紋圖譜。

碩士論文

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