血液丙酮酸2012年02月26日修訂版
概述
丙酮酸是糖代謝酵解過(guò)程中的產(chǎn)物,能氧化成二氧化碳和水。正常情況下,血內(nèi)乳酸和丙酮酸維持一定比值(9左右)。當(dāng)機(jī)體處于缺氧代謝情況下,丙酮酸則被還原成乳酸,使比值上升,缺氧越嚴(yán)重比值越高。血清丙酮酸測(cè)定可推測(cè)循環(huán)衰竭的嚴(yán)重程度。
英文名
Blood Pyruvic Acid
血液丙酮酸醫(yī)學(xué)檢查
分類
血液生化檢查、氨基酸、氮化物、有機(jī)酸測(cè)定
原理
丙酮酸測(cè)定的反應(yīng)是乳酸測(cè)定的逆反應(yīng)。在pH 7.5條件下,平衡常數(shù)非常有利于逆反應(yīng)(生成乳酸的方向)。
試劑
(1)0.75mol/L Tris緩沖液:稱取45.4g Tris,溶于蒸餾水中并稀釋至500ml。
(2)13mmol/L NADH溶液:稱取還原型輔酶Ⅰ二鈉鹽10mg,溶于1ml碳酸氫鈉溶液(10g/L)中,冰箱保存,48h內(nèi)使用。
(3)LDH溶液及偏磷酸溶液(30g/L):同乳酸分光光度法測(cè)定。
(4)0.1mol/L丙酮酸標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液:精確稱取1.101g丙酮酸鈉,溶于0.1mol/L鹽酸中并稀釋至100ml,4℃保存。
(5)0.05mol/L丙酮酸標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液:臨用前取標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液,用偏磷酸溶液(30g/L)稀釋2000倍,如取50μl標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液稀釋到100ml,當(dāng)日新鮮配制。
操作方法
無(wú)蛋白上清液制備同全血乳酸測(cè)定,按表1進(jìn)行。
混勻,室溫孵育2min后再讀取吸光度,此后每隔1min讀1次吸光度,直至讀數(shù)穩(wěn)定。
正常值
空腹休息狀態(tài)下,靜脈血丙酮酸濃度為0.03~0.1mmol/L(0.3~0.9mg/dl)。
臨床意義
丙酮酸是糖酵解途徑產(chǎn)物,在正常情況下通過(guò)三羧酸循環(huán)氧化成CO2和水,使血內(nèi)乳酸/丙酮酸比值維持在9左右。當(dāng)機(jī)體處于缺氧狀態(tài),丙酮酸則被還原成乳酸,該比值上升,缺氧越嚴(yán)重比值越高。該比值測(cè)定可推測(cè)循環(huán)衰竭的嚴(yán)重程度。輕微的活動(dòng)會(huì)引起乳酸和丙酮酸同時(shí)升高,但比值不變。
血液丙酮酸的測(cè)定主要用于維生素B1缺乏癥的診斷。維生素B1的焦磷酸酯是丙酮酸在細(xì)胞內(nèi)進(jìn)一步氧化分解為乙酰輔酶A時(shí)的脫羧輔酶。維生素B1缺乏時(shí),體內(nèi)丙酮酸的氧化發(fā)生障礙,使丙酮酸的含量增加。
血中丙酮酸增高還見(jiàn)于糖尿病、心力衰竭、腹瀉,嚴(yán)重肝損傷、急性感染等。
附注
(1)血中丙酮酸極不穩(wěn)定,血液抽出后1min即減低。在偏磷酸沉淀蛋白的上清液中的丙酮酸,置4℃可穩(wěn)定8天。
(2)丙酮酸標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液必須每日新鮮配制,因其中丙酮酸會(huì)發(fā)生聚合,其聚合體的酶促反應(yīng)速率與非聚合體不同。
(3)求乳酸與丙酮酸比值時(shí),應(yīng)求上述分光光度法乳酸與本法丙酮酸的比值。
相關(guān)疾病
腹瀉、肝損傷、糖尿病
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