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肺功能檢測SOP

來源:泰然健康網(wǎng) 時間:2024年12月25日 20:14

肺功能檢測SOP

一、硬件設(shè)置

1.1 大鼠小鼠的實驗設(shè)置切換

在大小鼠的實驗之間切換時,除了更換相應(yīng)的實驗腔體外,還需要調(diào)整控制主機上信號發(fā)生器模塊上的跳線。將信號發(fā)生器模塊從主機上拆下來后,調(diào)整 J2 位置跳線,大鼠設(shè)置為 x8,小鼠設(shè)置為 x4。設(shè)置完成后重新裝回主機,注意對準(zhǔn)上下卡槽輕輕推入,并擰緊固定螺絲。

1.2 設(shè)置正壓

使用閥門控制面板上標(biāo)識有 Positive Pressure 的 8 檔旋鈕來設(shè)置所需要的壓力。一般情況下,設(shè)置為50。通過觀察 Inspiration 位置的 Pressure 顯示器顯示的數(shù)值,來確認新的壓力值。壓力值是會浮動的,所以顯示在 5%以內(nèi)都是可以接受的。

1.3 設(shè)置負壓

使用閥門控制面板上標(biāo)識有 Negative Pressure 的 8 檔旋鈕來設(shè)置所需要的壓力。一般情況下,設(shè)置為50。通過觀察 Expiration 位置的 Pressure 顯示器顯示的數(shù)值,來確認新的壓力值。壓力值是浮動的,所以顯示在 5%以內(nèi)都是可以接受的

1.4 設(shè)置吸氣氣流

確認閥門控制面板上的 FRC 閥門處于 Off 位置,將 Inspiration 閥門撥到 On 的位置。轉(zhuǎn)動左下方Inspiration 旋鈕,直到右側(cè) Inspiration 位置的 Flow 顯示屏顯示所需要的氣體流速值。一般設(shè)定氣體流速的指導(dǎo)原則是:使用 2-3 秒將動物肺部填滿的速率(可以通過實參考預(yù)實驗得到的實驗數(shù)據(jù))。當(dāng)看到Inspiration 位置的 Flow 顯示屏顯示正確值時(參考值:大鼠豚鼠 5.0-7.0,小鼠 0.8),將閥門控制面板上的Inspiration 閥門撥到 Auto 位置。這樣就完成吸氣氣流的設(shè)定了。

1.5 設(shè)置緩慢呼氣氣流

確認閥門控制面板上的 FRC 閥門處于 Off 位置,將 Slow Expiration 閥門撥到 On 的位置。轉(zhuǎn)動左下方Expiration 的銀色旋鈕,直到右側(cè) Expiration 位置的 Flow 顯示屏顯示所需要的氣體流速值。一般設(shè)定氣體流速的指導(dǎo)原則是:在一定時間內(nèi)能夠盡可能地消耗盡實驗動物的肺活量(VC),這時候的氣體流速就是我們所要的。

二、采集軟件設(shè)置

2. 1軟件 Hardware Calibrate設(shè)置

2.1.1進入 FinePointe 軟件點擊 FinePointe 軟件,首次登錄需要創(chuàng)建新用戶賬戶、密碼(密碼可以不設(shè)定),點擊 OK 進入軟件,可以看到上一步設(shè)置的 RC 系統(tǒng)出現(xiàn)在軟件界面右邊位置,確認所有閥門控制開關(guān)都處于 Auto 狀態(tài),點擊 Calibrate 進入校準(zhǔn)定標(biāo)界面。

2.1.2進行 FRC Flow Calibrate

2.1.2.1 點擊 FRC Flow 的 Calibration 按鍵 Flow 板卡的模式調(diào)為 DC 模式,用小一字螺絲刀旋轉(zhuǎn) Balance,使得電壓值為 0,點擊 Next(F8)進入下一步。

2.1.2.2 Flow 板卡切換為 DC Adj 模式,旋轉(zhuǎn) Zero 旋鈕使得讀數(shù)為 0,點擊 Next(F8)進入下一步。

2.1.2.3 Flow 板卡保持為 DC Adj 模式,使用注射器注入(大鼠腔體 1mL,小鼠腔體 0.5mL)空氣到腔體中,當(dāng)波形出現(xiàn)時點擊 Next(F8)→Accept→Finish(F2)完成 FRC Flow 的校準(zhǔn)。

2.1.3 進行 Flow Calibrate

點擊 Flow 的 Calibration 按鍵,F(xiàn)low 板卡的模式保持為 DC Adj 模式,使用注射器注入(大鼠 10mL,小鼠 1mL)空氣到腔體中,當(dāng)波形出現(xiàn)時點擊 Next(F8)→Accept→Finish 完成 Flow 的校準(zhǔn)。

2.1.4 進行 High Flow Calibrate

點擊 High Flow 的 Calibration 按鍵,F(xiàn)low 板卡的模式保持為 DC Adj 模式,使用注射器注入(大鼠 60mL,小鼠 10mL)空氣到腔體中,當(dāng)波形出現(xiàn)時點擊 Next(F8)→Accept→Finish(F2)完成 High Flow 的校準(zhǔn)。

2.1.5 進行 Lung Pressure Calibrate

2.1.5.1 點擊 Lung Pressure 的 Calibration 按鍵,閥門控制面板的 FRC 閥門調(diào)整為 OFF 狀態(tài),M Pressure 板卡的模式調(diào)為 DC 模式,確認調(diào)整 Balance 旋鈕使得波形為 0,點擊 Next(F8)進入下一步。

2.1.5.2 保持 FRC 閥門為 OFF 狀態(tài),當(dāng) 0cm 水柱施加到傳感器上(即不接任何壓力),信號穩(wěn)定后,點擊 Next(F8)進入下一步 (這一步不用操作設(shè)備,直接點 Next)。

2.1.5.3 調(diào)整 FRC 閥門為 ON 狀態(tài)(綠燈亮),校正水柱加水值 20cm 高度線位置,管子連著一個三通接頭,中間孔連著注射器,三通頭接入到腔體前端氣孔上,當(dāng)信號基線穩(wěn)定時,打入注射器里的氣體,并保持壓住注射器,這時看到水柱上會有明顯的氣泡冒出,20cm 水柱壓力即施加在傳感器上,信號顯示穩(wěn)定后,點擊 Next(F8)-Finish(F2)完成 Lung Pressure 校正。

2.1.6 完成 Calibrate

所有校正完成后,Calibrate 按鍵全部顯示為綠色狀態(tài),建議每天開始進行實驗前做一次定標(biāo),切換大、小鼠腔體后做一次定標(biāo)

2.2 軟件 Study 配置

2.2.1 創(chuàng)建新 Study

2.2.1.1在軟件主界面新建 Study,在左側(cè)右鍵點擊 New Study→ PFT?;蛘咴跇?biāo)題欄 Create Study Options里面選擇相應(yīng)的 Study 類型 PFT Study

2.2.1.2 在彈出界面中填入相應(yīng)的信息。此處以大鼠作為例子,輸入 Study Name,選中動物種類為 Rat,點擊 Next 進入下一步

2.2.1.3 在彈出界面中填入相應(yīng)的信息。保持 Wait to turn on Ventilator 為選擇狀態(tài),使得在進入 RC 測試階段時程序會等待手動操作打開內(nèi)置呼吸機,點擊 Finish 完成,得到新建的 Study。

2.2.1.4 雙擊打開設(shè)置好的 Study,系統(tǒng)會自動創(chuàng)建一個新的 Report。

2.2.2 創(chuàng)建新 Subject

在 Study 界面,點擊 Study Options 中齒輪圖標(biāo),彈出窗口中點擊添加新實驗對象 New Subject,把相應(yīng)實驗動物信息提前輸入到系統(tǒng)當(dāng)中。并且點擊 New Group 可以對添加的實驗動物進行分組。也可以直接在開始采集時逐個添加,到采集完再進行分組。

三、開始采集

4.1 采集前檢查

在開始采集之前,將硬件設(shè)備恢復(fù)成采集狀態(tài),所有閥門控制全部撥到 Auto 狀態(tài),動物開好氣管,接上插管放入腔體內(nèi)。

4.2 開始采集

4.2.1 一切準(zhǔn)備就緒,鼠標(biāo)左鍵點擊設(shè)置好的 Study 拖放到右邊的 PFT 設(shè)備上,或者在 Study 中的 LaunchStation 中直接選中設(shè)置好的設(shè)備,開始進行實驗。

4.2.2 在彈出窗口界面中,可以雙擊選擇左下角 Subjects Without Data 框中提前設(shè)置好的實驗動物,也可以手動輸入動物 ID 和體重,點擊 Create Subject 進行創(chuàng)建,由于下一步的 Calibrate 已經(jīng)完成,這里不需要進行,直接點擊 Finish,進入采集界面。

4.2.3 點擊菜單欄 View 可以切換采集界面顯示的詳情,可以根據(jù)自己的使用情況進行選擇。這里是選擇切換第二種顯示界面,點擊圓形紅色按鍵可以開始采集。

4.2.4 在實驗界面左上角會提示下一步實驗應(yīng)該進行的操作,而右上角則是顯示當(dāng)前所處的實驗狀態(tài)以及時間顯示。點擊右上角狀態(tài)欄(紅框位置)區(qū)域,可以看到當(dāng)前實驗進展流程情況。在實驗進行過程中,一般是默認按照正常流程進行。如果有需要,可以通過鼠標(biāo)雙擊條目,點擊 Apply 變更實驗進度流程。

4.2.5 當(dāng)實驗 3 次 FRC、3 次 PV、3 次 FV 測試完成后將會進行 RC 測試,此時系統(tǒng)會處于等待狀態(tài),點擊菜單欄小扳手按鍵,調(diào)出呼吸機設(shè)置界面,輸入相應(yīng)呼吸參數(shù)(Rate:一般大鼠 60,小鼠 140,其余參數(shù)按默認數(shù)值)后點擊 OFF 紅色按鈕,使得變成 ON 綠色狀態(tài),然后點擊 OK,啟動呼吸機,再點擊紅色開始按鍵,開始 RC 測試。

4.3 完成采集實驗結(jié)束時點擊 File→End Session,在彈出界面勾選上實驗動物,點擊 Next 進行實驗數(shù)據(jù)保存,回到Study 界面,將自動加載實驗數(shù)據(jù),雙擊下方已加載的數(shù)據(jù)條,可以進入查看每個實驗對象在的全部實驗原始數(shù)據(jù)。

五、軟件 Report

5.1 創(chuàng)建新 Report

Study 界面中,左上角是生成的報告,點擊 Create Report 可以創(chuàng)建新的 Report。

5.2 查看導(dǎo)出 Report

雙擊打開報告,可以查看報告中的圖標(biāo)和數(shù)據(jù)對比,點擊 Report Options 下的黃色鉛筆? 圖標(biāo),可以對該報告的設(shè)置進行修改,包括對比的參數(shù)和對象等,點擊工具欄 Data Options 下的 Excel 圖標(biāo),將該報告直接導(dǎo)出為 Excel 格式文件保存。

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