肺功能檢測(cè)SOP

一、硬件設(shè)置

1.1 大鼠小鼠的實(shí)驗(yàn)設(shè)置切換

在大小鼠的實(shí)驗(yàn)之間切換時(shí)，除了更換相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)腔體外，還需要調(diào)整控制主機(jī)上信號(hào)發(fā)生器模塊上的跳線。將信號(hào)發(fā)生器模塊從主機(jī)上拆下來(lái)后，調(diào)整 J2 位置跳線，大鼠設(shè)置為 x8，小鼠設(shè)置為 x4。設(shè)置完成后重新裝回主機(jī)，注意對(duì)準(zhǔn)上下卡槽輕輕推入，并擰緊固定螺絲。

1.2 設(shè)置正壓

使用閥門(mén)控制面板上標(biāo)識(shí)有 Positive Pressure 的 8 檔旋鈕來(lái)設(shè)置所需要的壓力。一般情況下，設(shè)置為50。通過(guò)觀察 Inspiration 位置的 Pressure 顯示器顯示的數(shù)值，來(lái)確認(rèn)新的壓力值。壓力值是會(huì)浮動(dòng)的，所以顯示在 5%以內(nèi)都是可以接受的。

1.3 設(shè)置負(fù)壓

使用閥門(mén)控制面板上標(biāo)識(shí)有 Negative Pressure 的 8 檔旋鈕來(lái)設(shè)置所需要的壓力。一般情況下，設(shè)置為50。通過(guò)觀察 Expiration 位置的 Pressure 顯示器顯示的數(shù)值，來(lái)確認(rèn)新的壓力值。壓力值是浮動(dòng)的，所以顯示在 5%以內(nèi)都是可以接受的

1.4 設(shè)置吸氣氣流

確認(rèn)閥門(mén)控制面板上的 FRC 閥門(mén)處于 Off 位置，將 Inspiration 閥門(mén)撥到 On 的位置。轉(zhuǎn)動(dòng)左下方Inspiration 旋鈕，直到右側(cè) Inspiration 位置的 Flow 顯示屏顯示所需要的氣體流速值。一般設(shè)定氣體流速的指導(dǎo)原則是：使用 2-3 秒將動(dòng)物肺部填滿的速率（可以通過(guò)實(shí)參考預(yù)實(shí)驗(yàn)得到的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)）。當(dāng)看到Inspiration 位置的 Flow 顯示屏顯示正確值時(shí)（參考值：大鼠豚鼠 5.0-7.0，小鼠 0.8），將閥門(mén)控制面板上的Inspiration 閥門(mén)撥到 Auto 位置。這樣就完成吸氣氣流的設(shè)定了。

1.5 設(shè)置緩慢呼氣氣流

確認(rèn)閥門(mén)控制面板上的 FRC 閥門(mén)處于 Off 位置，將 Slow Expiration 閥門(mén)撥到 On 的位置。轉(zhuǎn)動(dòng)左下方Expiration 的銀色旋鈕，直到右側(cè) Expiration 位置的 Flow 顯示屏顯示所需要的氣體流速值。一般設(shè)定氣體流速的指導(dǎo)原則是：在一定時(shí)間內(nèi)能夠盡可能地消耗盡實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的肺活量（VC），這時(shí)候的氣體流速就是我們所要的。

二、采集軟件設(shè)置

2. 1軟件 Hardware Calibrate設(shè)置

2.1.1進(jìn)入 FinePointe 軟件點(diǎn)擊 FinePointe 軟件，首次登錄需要?jiǎng)?chuàng)建新用戶賬戶、密碼（密碼可以不設(shè)定），點(diǎn)擊 OK 進(jìn)入軟件，可以看到上一步設(shè)置的 RC 系統(tǒng)出現(xiàn)在軟件界面右邊位置，確認(rèn)所有閥門(mén)控制開(kāi)關(guān)都處于 Auto 狀態(tài)，點(diǎn)擊 Calibrate 進(jìn)入校準(zhǔn)定標(biāo)界面。

2.1.2進(jìn)行 FRC Flow Calibrate

2.1.2.1 點(diǎn)擊 FRC Flow 的 Calibration 按鍵 Flow 板卡的模式調(diào)為 DC 模式，用小一字螺絲刀旋轉(zhuǎn) Balance，使得電壓值為 0，點(diǎn)擊 Next(F8)進(jìn)入下一步。

2.1.2.2 Flow 板卡切換為 DC Adj 模式，旋轉(zhuǎn) Zero 旋鈕使得讀數(shù)為 0，點(diǎn)擊 Next(F8)進(jìn)入下一步。

2.1.2.3 Flow 板卡保持為 DC Adj 模式，使用注射器注入(大鼠腔體 1mL，小鼠腔體 0.5mL)空氣到腔體中，當(dāng)波形出現(xiàn)時(shí)點(diǎn)擊 Next(F8)→Accept→Finish(F2)完成 FRC Flow 的校準(zhǔn)。

2.1.3 進(jìn)行 Flow Calibrate

點(diǎn)擊 Flow 的 Calibration 按鍵，F(xiàn)low 板卡的模式保持為 DC Adj 模式，使用注射器注入(大鼠 10mL，小鼠 1mL)空氣到腔體中，當(dāng)波形出現(xiàn)時(shí)點(diǎn)擊 Next(F8)→Accept→Finish 完成 Flow 的校準(zhǔn)。

2.1.4 進(jìn)行 High Flow Calibrate

點(diǎn)擊 High Flow 的 Calibration 按鍵，F(xiàn)low 板卡的模式保持為 DC Adj 模式，使用注射器注入(大鼠 60mL，小鼠 10mL)空氣到腔體中，當(dāng)波形出現(xiàn)時(shí)點(diǎn)擊 Next(F8)→Accept→Finish(F2)完成 High Flow 的校準(zhǔn)。

2.1.5 進(jìn)行 Lung Pressure Calibrate

2.1.5.1 點(diǎn)擊 Lung Pressure 的 Calibration 按鍵，閥門(mén)控制面板的 FRC 閥門(mén)調(diào)整為 OFF 狀態(tài)，M Pressure 板卡的模式調(diào)為 DC 模式，確認(rèn)調(diào)整 Balance 旋鈕使得波形為 0，點(diǎn)擊 Next(F8)進(jìn)入下一步。

2.1.5.2 保持 FRC 閥門(mén)為 OFF 狀態(tài)，當(dāng) 0cm 水柱施加到傳感器上（即不接任何壓力），信號(hào)穩(wěn)定后，點(diǎn)擊 Next（F8）進(jìn)入下一步 (這一步不用操作設(shè)備，直接點(diǎn) Next)。

2.1.5.3 調(diào)整 FRC 閥門(mén)為 ON 狀態(tài)(綠燈亮)，校正水柱加水值 20cm 高度線位置，管子連著一個(gè)三通接頭，中間孔連著注射器，三通頭接入到腔體前端氣孔上，當(dāng)信號(hào)基線穩(wěn)定時(shí)，打入注射器里的氣體，并保持壓住注射器，這時(shí)看到水柱上會(huì)有明顯的氣泡冒出，20cm 水柱壓力即施加在傳感器上，信號(hào)顯示穩(wěn)定后，點(diǎn)擊 Next(F8)-Finish(F2)完成 Lung Pressure 校正。

2.1.6 完成 Calibrate

所有校正完成后，Calibrate 按鍵全部顯示為綠色狀態(tài)，建議每天開(kāi)始進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前做一次定標(biāo)，切換大、小鼠腔體后做一次定標(biāo)

2.2 軟件 Study 配置

2.2.1 創(chuàng)建新 Study

2.2.1.1在軟件主界面新建 Study，在左側(cè)右鍵點(diǎn)擊 New Study→ PFT?；蛘咴跇?biāo)題欄 Create Study Options里面選擇相應(yīng)的 Study 類型 PFT Study

2.2.1.2 在彈出界面中填入相應(yīng)的信息。此處以大鼠作為例子，輸入 Study Name，選中動(dòng)物種類為 Rat，點(diǎn)擊 Next 進(jìn)入下一步

2.2.1.3 在彈出界面中填入相應(yīng)的信息。保持 Wait to turn on Ventilator 為選擇狀態(tài)，使得在進(jìn)入 RC 測(cè)試階段時(shí)程序會(huì)等待手動(dòng)操作打開(kāi)內(nèi)置呼吸機(jī)，點(diǎn)擊 Finish 完成，得到新建的 Study。

2.2.1.4 雙擊打開(kāi)設(shè)置好的 Study，系統(tǒng)會(huì)自動(dòng)創(chuàng)建一個(gè)新的 Report。

2.2.2 創(chuàng)建新 Subject

在 Study 界面，點(diǎn)擊 Study Options 中齒輪圖標(biāo)，彈出窗口中點(diǎn)擊添加新實(shí)驗(yàn)對(duì)象 New Subject，把相應(yīng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物信息提前輸入到系統(tǒng)當(dāng)中。并且點(diǎn)擊 New Group 可以對(duì)添加的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行分組。也可以直接在開(kāi)始采集時(shí)逐個(gè)添加，到采集完再進(jìn)行分組。

三、開(kāi)始采集

4.1 采集前檢查

在開(kāi)始采集之前，將硬件設(shè)備恢復(fù)成采集狀態(tài)，所有閥門(mén)控制全部撥到 Auto 狀態(tài)，動(dòng)物開(kāi)好氣管，接上插管放入腔體內(nèi)。

4.2 開(kāi)始采集

4.2.1 一切準(zhǔn)備就緒，鼠標(biāo)左鍵點(diǎn)擊設(shè)置好的 Study 拖放到右邊的 PFT 設(shè)備上，或者在 Study 中的 LaunchStation 中直接選中設(shè)置好的設(shè)備，開(kāi)始進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

4.2.2 在彈出窗口界面中，可以雙擊選擇左下角 Subjects Without Data 框中提前設(shè)置好的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，也可以手動(dòng)輸入動(dòng)物 ID 和體重，點(diǎn)擊 Create Subject 進(jìn)行創(chuàng)建，由于下一步的 Calibrate 已經(jīng)完成，這里不需要進(jìn)行，直接點(diǎn)擊 Finish，進(jìn)入采集界面。

4.2.3 點(diǎn)擊菜單欄 View 可以切換采集界面顯示的詳情，可以根據(jù)自己的使用情況進(jìn)行選擇。這里是選擇切換第二種顯示界面，點(diǎn)擊圓形紅色按鍵可以開(kāi)始采集。

4.2.4 在實(shí)驗(yàn)界面左上角會(huì)提示下一步實(shí)驗(yàn)應(yīng)該進(jìn)行的操作，而右上角則是顯示當(dāng)前所處的實(shí)驗(yàn)狀態(tài)以及時(shí)間顯示。點(diǎn)擊右上角狀態(tài)欄(紅框位置)區(qū)域，可以看到當(dāng)前實(shí)驗(yàn)進(jìn)展流程情況。在實(shí)驗(yàn)進(jìn)行過(guò)程中，一般是默認(rèn)按照正常流程進(jìn)行。如果有需要，可以通過(guò)鼠標(biāo)雙擊條目，點(diǎn)擊 Apply 變更實(shí)驗(yàn)進(jìn)度流程。

4.2.5 當(dāng)實(shí)驗(yàn) 3 次 FRC、3 次 PV、3 次 FV 測(cè)試完成后將會(huì)進(jìn)行 RC 測(cè)試，此時(shí)系統(tǒng)會(huì)處于等待狀態(tài)，點(diǎn)擊菜單欄小扳手按鍵，調(diào)出呼吸機(jī)設(shè)置界面，輸入相應(yīng)呼吸參數(shù)(Rate：一般大鼠 60，小鼠 140，其余參數(shù)按默認(rèn)數(shù)值)后點(diǎn)擊 OFF 紅色按鈕，使得變成 ON 綠色狀態(tài)，然后點(diǎn)擊 OK，啟動(dòng)呼吸機(jī)，再點(diǎn)擊紅色開(kāi)始按鍵，開(kāi)始 RC 測(cè)試。

4.3 完成采集實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)點(diǎn)擊 File→End Session，在彈出界面勾選上實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，點(diǎn)擊 Next 進(jìn)行實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)保存，回到Study 界面，將自動(dòng)加載實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，雙擊下方已加載的數(shù)據(jù)條，可以進(jìn)入查看每個(gè)實(shí)驗(yàn)對(duì)象在的全部實(shí)驗(yàn)原始數(shù)據(jù)。

五、軟件 Report

5.1 創(chuàng)建新 Report

Study 界面中，左上角是生成的報(bào)告，點(diǎn)擊 Create Report 可以創(chuàng)建新的 Report。

5.2 查看導(dǎo)出 Report

雙擊打開(kāi)報(bào)告，可以查看報(bào)告中的圖標(biāo)和數(shù)據(jù)對(duì)比，點(diǎn)擊 Report Options 下的黃色鉛筆? 圖標(biāo)，可以對(duì)該報(bào)告的設(shè)置進(jìn)行修改，包括對(duì)比的參數(shù)和對(duì)象等，點(diǎn)擊工具欄 Data Options 下的 Excel 圖標(biāo)，將該報(bào)告直接導(dǎo)出為 Excel 格式文件保存。

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