專利名稱：一種酶法合成脂溶性茶多酚的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種酶法合成脂溶性茶多酚的方法，將茶多酚與脂肪酸こ烯酯在有機溶劑體系中經(jīng)脂肪酶促催化反應(yīng)，合成改性脂溶性茶多酚，屬于食品添加劑生物合成領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
氧化是導致食品品質(zhì)劣變的重要因素之一，氧化可使食品發(fā)生·退色、褐變、維生素破壞，降低食品品質(zhì)和營養(yǎng)價值，甚至產(chǎn)生有害物質(zhì)，引起食物中毒。油脂及含油食品在貯藏過程中容易發(fā)生氧化而酸敗，人們長期食用這種高氧化值的油脂，會破壞人體內(nèi)自由基的平衡，從而引起炎癥、腫瘤、腦缺血、加速細胞衰老等病癥?？寡趸瘎┠茏柚够蜓泳徥称费趸崧勈称返姆€(wěn)定性和延長減期。茶多酚作為ー種天然食品添加剤，具有使用安全性高，抗氧化能力強，基本無副作用等特點，該類化合物具有高效的抗癌、抗衰老、抗輻射、清除人體自由基、降血糖、降血脂等一系列藥理功能，在油脂、食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域得到了愈來愈多的應(yīng)用，其經(jīng)濟效益和應(yīng)用前景十分樂觀。我國具有豐富的茶葉資源，從茶葉中提取茶多酚的エ藝成熟，因此，茶多酚作為天然抗氧化劑對食品エ業(yè)的發(fā)展和保護人體健康具有非常重要意義。受自身分子結(jié)構(gòu)限制，茶多酚易溶于水，難溶于油。對油脂性體系，茶多酚的溶解度很小，如果作為精煉食用油或含油食品的抗氧化劑，只能少量溶入，難以加至有效的抗氧化濃度閾值，或者在精煉油中產(chǎn)生沉淀。其優(yōu)異的抗氧化活性難以發(fā)揮作用。為了解決茶多酚在油脂體系中不能均勻分散的問題，常用一些改性方法増加其脂溶性，這些方法包括溶劑法、乳化法、分子修飾法等。前兩種方法得到的產(chǎn)品脂溶性不穩(wěn)定，引入溶劑等雜質(zhì)，長久放置會使茶多酚析出。分子修飾法是利用生物或化學合成的方法，將茶多酚中幾種兒茶素分子結(jié)構(gòu)的某些部位?；蚩峄?，使得新生成的分子由原先的水溶性改性為脂溶性。目前分子修飾法主要有化學法和酶法。利用化學法改性茶多酚存在諸多缺點區(qū)域選擇性差，易產(chǎn)生大量的副產(chǎn)物，產(chǎn)物產(chǎn)率低；采用基團保護等措施，反應(yīng)步驟多，耗時長，且引入溶劑多，分離純化困難；多用堿性催化劑，產(chǎn)生大量含堿廢液，污染環(huán)境等。而酶法分子修飾具有反應(yīng)條件溫和，區(qū)域選擇性高，副反應(yīng)少，反應(yīng)步驟少、簡單可控、環(huán)境友好等優(yōu)點。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是克服上述不足之處，提供一種酶法合成脂溶性茶多酚的方法，以茶多酚和脂肪酸こ烯酯為原料，在脂肪酶的催化作用下合成脂溶性茶多酚。按照本發(fā)明提供的技術(shù)方案，一種酶法合成脂溶性茶多酚的方法，步驟為將茶多酚與脂肪酸こ烯酯按質(zhì)量比4飛I在40(Γ500倍質(zhì)量的有機溶劑中混合，加入相對茶多酚質(zhì)量1°/Γ2%的脂肪酶開始反應(yīng)，在35飛(TC下攪拌反應(yīng)8 24h，反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)液經(jīng)過濾、5(T60°C旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)、在真空度為O. 05、. IMPa條件下真空干燥2-4h得到產(chǎn)品脂溶性茶多酚產(chǎn)物。
所述茶多酚為多酚含量859Γ99%，其中表沒食子兒茶素沒食子酸酷含量為35% 45%的茶多酚產(chǎn)品。所述脂肪酸こ烯酯為こ酸こ烯酷，丙酸こ烯酷，丁酸こ烯酷，戊酸こ烯酷，己酸こ烯酯，新壬酸こ烯酯，新癸酸こ烯酯，月桂酸こ烯酯或棕櫚酸こ烯酯中的ー種。所述有機溶劑為異丙醇，こ腈，四氫呋喃，叔丁醇，叔戊醇，丙酮或甲醇中的ー種或幾種的混合物。本發(fā)明中所述脂肪酶為Novo Nordisk公司生產(chǎn)的脂肪酶LIP0ZYME TL IM (產(chǎn)品說明見實質(zhì)審查參考資料I)和LPOZYME RM IM (產(chǎn)品說明見實質(zhì)審查參考資料2)，AmanoPharmarceutial公司生產(chǎn)的脂肪酶Lipase AYS “Amano”(產(chǎn)品說明見實質(zhì)審查參考資料3)。
本發(fā)明具有如下優(yōu)點本發(fā)明與傳統(tǒng)的化學合成法相比具有反應(yīng)條件溫和，副反應(yīng)少，反應(yīng)步驟少、簡單可控，環(huán)境友好，產(chǎn)品分離相對簡單等優(yōu)點，從而提供一種高效、快速、符合綠色化學和環(huán)境友好發(fā)展方向的茶多酚改性方法。

圖I添加不同抗氧化劑(O. 02%)對食用精煉大豆油透光率的影響。圖2添加不同抗氧化劑(O. 02%)對食用精煉大豆油的過氧化值試驗結(jié)果。
具體實施例方式以下給出實施例，對本發(fā)明作進ー步說明。實施例I
將IOOmg 88%的茶多酚與こ酸こ烯酯按質(zhì)量比4 : I置于IOOmL具塞反應(yīng)瓶中，再加入50mL異丙醇混合均勻，上述反應(yīng)體系移入集熱式磁力加熱攪拌器中，待反應(yīng)體系溫度升至40°C時，加入I. 5mg Novo Nordisk公司生產(chǎn)的脂肪酶LIP0ZYME TL頂開始反應(yīng)，在40°C下攪拌反應(yīng)16h，反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)液經(jīng)過濾、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)、真空干燥得到脂溶性茶多酚產(chǎn)物/5. 8mg。本實施例制備的脂溶性茶多酚產(chǎn)物通過透光率測定結(jié)果(見圖I)表明在油脂中溶解性良好，明顯高于未改性茶多酚。油脂的過氧化值試驗結(jié)果(見圖2)表明，在食用大豆油中，當添加量同為O. 02%時，不同抗氧化劑的抗氧化效果為TBHQ >油溶性茶多酚 > 迷迭香提取物> BHT >未改性茶多酚。實施例2
將50mg 98%的茶多酚與丁酸こ烯酯按質(zhì)量比5 : I置于50mL具塞反應(yīng)瓶中，再加入25mLこ腈混合均勻，上述反應(yīng)體系移入集熱式磁力加熱攪拌器中，待反應(yīng)體系溫度升至50°C時，加入I. Omg Novo Nordisk公司生產(chǎn)的脂肪酶LPOZYME RM頂開始反應(yīng)，在50°C下攪拌反應(yīng)12h，反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)液經(jīng)過濾、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)、真空干燥得到脂溶性茶多酚產(chǎn)物32. 4mg0實施例3
將80mg 95%的茶多酚與新癸酸こ烯酯按質(zhì)量比4 : I置于IOOmL具塞反應(yīng)瓶中，再加入50mL叔丁醇混合均勻，上述反應(yīng)體系移入集熱式磁力加熱攪拌器中，待反應(yīng)體系溫度升至 50°C時，加入 I. Omg Amano Pharmarceutial 公司生產(chǎn)的脂肪酶 Lipase AYS “Amano” 開始反應(yīng),在50°C下攪拌反應(yīng)20h,反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)液經(jīng)過濾、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)、真空干燥得到脂溶性茶多酚產(chǎn)物58. 2mg。 實施例4
將IOOmg 98%的茶多酚與月桂酸こ烯酯按質(zhì)量 比6 : I置于IOOmL具塞反應(yīng)瓶中，再加入50mL異丙醇甲醇為I :1混合溶劑混合均勻，上述反應(yīng)體系移入集熱式磁力加熱攪拌器中，待反應(yīng)體系溫度升至45°C時,加入I. 5mg Amano Pharmarceutial公司生產(chǎn)的脂肪酶Lipase AYS “Amano”開始反應(yīng),在45°C下攪拌反應(yīng)8h,反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)液經(jīng)過濾、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)、真空干燥得到脂溶性茶多酚產(chǎn)物71. 2mg。
權(quán)利要求
1.一種酶法合成脂溶性茶多酚的方法，其特征是步驟為將茶多酚與脂肪酸こ烯酯按質(zhì)量比4飛I在40(Γ500倍質(zhì)量的有機溶劑中混合，加入相對茶多酚質(zhì)量19Γ2%的脂肪酶開始反應(yīng)，在35飛(TC下攪拌反應(yīng)8 24h，反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)液經(jīng)過濾、5(T60°C旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)、在真空度為O. 05、. IMPa條件下真空干燥2-4h得到產(chǎn)品脂溶性茶多酚產(chǎn)物。
2.如權(quán)利要求I所述酶法合成脂溶性茶多酚的方法，其特征是所述茶多酚為多酚含量85% 99%，其中表沒食子兒茶素沒食子酸酷含量為35% 65%的茶多酚產(chǎn)品。
3.如權(quán)利要求I所述酶法合成脂溶性茶多酚的方法，其特征是所述脂肪酸こ烯酯為こ酸こ烯酷，丙酸こ烯酷，丁酸こ烯酷，戊酸こ烯酷，己酸こ烯酷，新壬酸こ烯酷，新癸酸こ烯酷，月桂酸こ烯酯或棕櫚酸こ烯酯中的ー種。
4.如權(quán)利要求I所述酶法合成脂溶性茶多酚的方法，其特征是所述有機溶劑為異丙醇，こ臆，四氫呋喃，叔丁醇，叔戊醇，丙酮或甲醇中的ー種或幾種的混合物。
5.如權(quán)利要求I所述酶法合成脂溶性茶多酚的方法，其特征是所述脂肪酶為NovoNordisk公司生產(chǎn)的脂肪酶LIP0ZYME TL 頂和 LPOZYME RM 頂，Amano Pharmarceutial 公司生產(chǎn)的脂肪酶Lipase AYS “Amano”。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種酶法合成脂溶性茶多酚的方法，屬于食品添加劑生物合成領(lǐng)域。其將茶多酚與脂肪酸乙烯酯在有機溶劑體系中經(jīng)脂肪酶促催化反應(yīng)，合成改性脂溶性茶多酚。本發(fā)明與傳統(tǒng)的化學合成法相比具有反應(yīng)條件溫和，副反應(yīng)少，反應(yīng)步驟少、簡單可控，環(huán)境友好，產(chǎn)品分離相對簡單等優(yōu)點，從而提供一種高效、快速、符合綠色化學和環(huán)境友好發(fā)展方向的茶多酚改性方法。
文檔編號C12P17/06GK102747117SQ20121026541
公開日2012年10月24日 申請日期2012年7月28日 優(yōu)先權(quán)日2012年7月28日
發(fā)明者朱松, 李哲, 王洪新, 馬朝陽 申請人:江南大學

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