【五分鐘講實(shí)驗(yàn)】腹主動(dòng)脈縮窄慢性心衰模型構(gòu)建詳解！

1.疾病介紹

慢性心力衰竭(CHF)是多種心血管疾病的最終歸宿，嚴(yán)重影響著患者的生活質(zhì)量和健康水平，給家庭和社會(huì)帶來(lái)了沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)和精神痛苦，CHF現(xiàn)已成為全世界嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問(wèn)題。因CHF相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究不能直接在病人身上進(jìn)行，故CHF動(dòng)物模型越來(lái)越廣泛的被應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)研究中。所以建立一種穩(wěn)定、可靠的動(dòng)物心衰模型對(duì)進(jìn)一步研究該類疾病有重要意義?，F(xiàn)今眾多CHF模型建立方法中，腹主動(dòng)脈縮窄術(shù)因經(jīng)濟(jì)、實(shí)用、操作簡(jiǎn)單而成為CHF實(shí)驗(yàn)研究的常用模型。

2.造模機(jī)制

腹主動(dòng)脈狹窄造成左室血液流出道受阻，左室后負(fù)荷加重，心臟的代償機(jī)制導(dǎo)致心肌肥厚，部分動(dòng)物發(fā)展成心衰或肺部動(dòng)脈狹窄，使右心室排血受阻，右心室負(fù)荷增加，體循環(huán)回心血液不能完全進(jìn)入肺循環(huán)時(shí)，出現(xiàn)右心衰竭，發(fā)生內(nèi)臟器官充血和全身水腫等癥狀，造成慢性心力衰竭模型。

1.動(dòng)物建模

① 實(shí)驗(yàn)材料：麻醉系統(tǒng) 、保溫毯、青霉素、手術(shù)刀、彎鑷、生理鹽水、脫脂棉球、棉簽、7號(hào)針頭、4-0手術(shù)縫線等。

② 適應(yīng)性飼養(yǎng)7天。

③ 預(yù)麻醉，腹部備皮，左上腹切口，腹主動(dòng)脈充分暴露，將7號(hào)針頭與腹主動(dòng)脈平行緊貼血管放置，將腹主動(dòng)脈與7號(hào)針頭一起結(jié)扎，拔除針頭， 造成腹主動(dòng)脈管腔環(huán)形縮窄，術(shù)后青霉素肌肉注射，預(yù)防感染。

2.術(shù)后觀察

術(shù)后出現(xiàn)鼠毛蓬松、稀疏、干燥無(wú)光澤，活動(dòng)力降低，呼吸頻率加快，體重增長(zhǎng)緩慢等表現(xiàn)，且上述表現(xiàn)隨建模時(shí)間增長(zhǎng)而愈加明顯。術(shù)后4周后心室肥厚，到8周時(shí)可出現(xiàn)呼吸急促、對(duì)外界刺激反應(yīng)遲鈍、尾巴紫紺和輕度水腫等心力衰竭體征，表明模型組大鼠心功能下降，全身組織血液灌注減少，有缺血缺氧癥狀。

3.模型驗(yàn)證

3.1 超聲心動(dòng)圖檢測(cè)

① 左心室壁厚度（LVPWs，LVPWd）：左心室壁增厚，尤其是在舒張期（LVPWd）。

② 室間隔厚度（IVSs，IVSd）：室間隔增厚，反映了左、右心室之間的功能受損和心臟負(fù)荷增加的情況。

③ 左心室射血分?jǐn)?shù)（LVEF）：左心室射血分?jǐn)?shù)下降，心臟泵血功能減弱，無(wú)法有效將血液泵送到全身，是心功能受損的重要指標(biāo)。

3.2 病理學(xué)檢測(cè)

① HE染色

a. 對(duì)照組：心肌細(xì)胞排列整齊緊湊，組織紋理清晰，橫紋明顯，肌纖維無(wú)斷裂、扭曲，細(xì)胞大小均勻，胞漿著色均勻，細(xì)胞核形態(tài)及大小正常，位于細(xì)胞的中央.

b. 模型組：心肌細(xì)胞排列紊亂，交織成網(wǎng)狀，橫紋不明顯，肌纖維扭曲斷裂明顯，細(xì)胞著色不均勻，部分細(xì)胞核固縮，核周圍可見空白區(qū).

② Masson染色：模型組可見心肌纖維化生成。

③ 透射電鏡

a. 對(duì)照組：肌絲排列緊密整齊，肌節(jié)明顯，明暗帶清晰，肌絲間可見單排線粒體排列整齊，形態(tài)規(guī)則，無(wú)腫脹；細(xì)胞間未見明顯纖維化組織。

b. 模型組：肌絲排列疏松紊亂，部分肌絲斷裂溶解，肌絲間線粒體數(shù)目明顯增多，排列紊亂，線粒體形態(tài)不規(guī)則，部分線粒體固縮變小；細(xì)胞間有大量纖維化組織出現(xiàn)。

3.3 生物標(biāo)志物：ANP，BNP，NT-proBNP，BMP

① ANP（心房鈉肽）：通常在 10-100 pg/ml 范圍內(nèi)。

② BNP（腦鈉肽）：通常在 10-100 pg/ml 范圍內(nèi)。

③ NT-proBNP（N末端前b型鈉肽前體）：通常在 50-300 pg/ml 范圍內(nèi)。

④ BMP（骨形態(tài)發(fā)生蛋白）：通常在 10-100 pg/ml 范圍內(nèi)。

1.模型特點(diǎn)

建立該模型的關(guān)鍵在于控制血管縮窄程度，嚴(yán)重縮窄可造成急性心力衰竭，中度縮窄時(shí)首先出現(xiàn)心肌肥大，隨著肥大心肌轉(zhuǎn)變?yōu)樗ソ咝募《霈F(xiàn)慢性心力衰竭。

此種方法建立慢性心衰模型，接近臨床動(dòng)脈粥樣硬化等導(dǎo)致的慢性心力衰竭，模型穩(wěn)定可靠，重復(fù)性高，但建立此種模型需要較好的條件和設(shè)備，操作較復(fù)雜，造模時(shí)間較長(zhǎng)，成功率決定于技術(shù)水平。

2.模型構(gòu)建注意事項(xiàng)

① 術(shù)前8小時(shí)禁食，否則手術(shù)中鼓脹的胃體會(huì)影響分離腹主動(dòng)脈的手術(shù)視野，胃附近連著脾處有大量血管，在隔離過(guò)程中也容易損傷導(dǎo)致大出血。 

② 開腹時(shí)要逐層剪開，避免傷到小血管造成出血。同時(shí)在剪開最后一層時(shí)需要用鑷子提起來(lái)再剪，防止鋒利的剪刀直接剪破內(nèi)臟。

③ 暴露手術(shù)視野時(shí)，腸管、胃體、脾的隔離固定需用經(jīng)生理鹽水濕潤(rùn)過(guò)的紗布，同時(shí)在手術(shù)中注意保持濕潤(rùn)。若肝葉擋住視野可放置小棉球進(jìn)入腹腔頂住肝臟使不其下垂，但切記放入小棉球位置和數(shù)量，方便術(shù)后取出。 

④ 分離腹主動(dòng)脈動(dòng)作要輕柔，注意避開附近小的血管，防止術(shù)中出血，出血一方面影響手術(shù)視野，同時(shí)也降低手術(shù)后成活率。另外，不必分離過(guò)長(zhǎng)腹主動(dòng)脈，可容4-0手術(shù)縫線順利穿過(guò)即可。

⑤ 結(jié)扎松緊度的判斷：腹主動(dòng)脈結(jié)扎的松緊程度是縮窄程度的重要影響因素，結(jié)扎緊后立即可觀察到左腎明顯缺血變白，結(jié)扎后向外輕拉針頭，以針頭有明顯阻力，不向外滑脫為宜。 

⑥ 結(jié)扎部位的選擇：結(jié)扎部位需謹(jǐn)慎，多在左腎靜脈水平沿腹主動(dòng)脈向上15~2 cm處將腹主動(dòng)脈于7號(hào)針頭共同結(jié)扎，結(jié)扎點(diǎn)選擇過(guò)上會(huì)增加分離腹主動(dòng)脈難度且在分離過(guò)程中易損傷膈膜導(dǎo)致氣胸；結(jié)扎點(diǎn)過(guò)低則可能結(jié)扎在右腎動(dòng)脈分叉處以下，則不能導(dǎo)致大鼠心臟后負(fù)荷明顯增加而難以造成心力衰竭。 

⑦ 術(shù)后腸粘連腸梗阻的預(yù)防：術(shù)前備皮需盡量清理干凈，防止開腹后鼠毛進(jìn)入腹腔。術(shù)前洗去乳膠手套上滑石粉后進(jìn)行手術(shù)操作，術(shù)前準(zhǔn)備濕潤(rùn)紗布鋪于切口左側(cè)，術(shù)中需用生理鹽水保持外露腸胃濕潤(rùn)，術(shù)后確認(rèn)放置進(jìn)腹腔的棉球全部取出后自然復(fù)位胃、脾和腸管。

⑧ 大鼠麻醉后體溫下降，故術(shù)中和術(shù)后都需注意保暖。 

⑨ 術(shù)后可喂養(yǎng)8小時(shí)糖鹽水（4%葡萄糖、0.9%氯化鈉），同時(shí)觀察大鼠是否有排便腹脹等情況以便確認(rèn)是否有腸粘連梗阻，并需勤換飼養(yǎng)墊料，保持自然環(huán)境清潔。 

⑩ 對(duì)4周及8周建模大鼠行超聲時(shí)需要麻醉固定，但由于八周時(shí)大鼠心功能不全，建議減量注射麻醉藥，以防麻醉過(guò)深導(dǎo)致大鼠意外死亡。

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參考文獻(xiàn)：

[1]Yang ZQ, Han YY, Gao F, Tian JY, Bai R, Guo QH, Liu XC. Shengxian decoction protects against chronic heart failure in a rat model via energy regulation mechanisms. BMC Complement Med Ther. 2023 Jun 17;23(1):200. doi: 10.1186/s12906-023-04035-3. PMID: 37330478; PMCID: PMC10276516.

[2]Onódi Z, Ruppert M, Kucsera D, Sayour AA, Tóth VE, Koncsos G, Novák J, Brenner GB, Makkos A, Baranyai T, Giricz Z, G?rbe A, Leszek P, Gy?ngy?si M, Horváth IG, Schulz R, Merkely B, Ferdinandy P, Radovits T, Varga ZV. AIM2-driven inflammasome activation in heart failure. Cardiovasc Res. 2021 Nov 22;117(13):2639-2651. doi: 10.1093/cvr/cvab202. PMID: 34117866.

[3]朱林強(qiáng),周永焯,謝曉明,等.大鼠腹主動(dòng)脈縮窄術(shù)致大鼠慢性心衰的建模與體會(huì)[J].現(xiàn)代醫(yī)院,2015,15(10):21-24.

[4]陳勇,南瑞雪,何德英,等.桂枝茯苓丸合五苓散干預(yù)慢性心力衰竭大鼠唇舌顏色研究[J/OL].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志,1-5[2024-05-15].http://kns.cnki.net/kcms/detail/11.2787.R.20240321.1021.002.html.

[5]廉坤,李鑫,胡思遠(yuǎn),等.慢性心力衰竭動(dòng)物模型的研究趨勢(shì)與熱點(diǎn)可視化分析[J].中藥新藥與臨床藥理,2024,35(03):394-401.DOI:10.19378/j.issn.1003-9783.2024.03.011.

[6]陳雨意.生物標(biāo)志物對(duì)心力衰竭患者的臨床應(yīng)用價(jià)值探究[D].北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院,2023.DOI:10.27648/d.cnki.gzxhu.2023.001054.

[7]楊國(guó)珍,呂媛媛,秦夢(mèng)云,等.心力衰竭生物標(biāo)志物的研究進(jìn)展[J].心腦血管病防治,2023,23(09):39-42.

[8]韓克,吳格如,席雨濤,等.容量超負(fù)荷心力衰竭大鼠模型的制備及心臟功能的超聲評(píng)價(jià)[J].中國(guó)循證心血管醫(yī)學(xué)雜志,2013,5(05):507-509.

[9]張萌,楊戈.炎性生物標(biāo)志物在心力衰竭中的作用及中醫(yī)藥干預(yù)研究進(jìn)展[J].長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2023,39(12):1400-1406.DOI:10.13463/j.cnki.cczyy.2023.12.021.

關(guān)于晶萊

晶萊生物（GENELINE Co., Ltd）創(chuàng)立于2016年，擁有北京（北京晶萊華科生物技術(shù)有限公司）及長(zhǎng)沙（湖南晶萊生物技術(shù)有限公司）兩個(gè)研發(fā)機(jī)構(gòu)，是專注于生物醫(yī)藥臨床期前研發(fā)與基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)科研服務(wù)的高新技術(shù)企業(yè)。依托北京、長(zhǎng)沙兩地的3000余平實(shí)驗(yàn)平臺(tái)，晶萊構(gòu)建了8個(gè)研究平臺(tái)，能提供動(dòng)物寄養(yǎng)、動(dòng)物模型構(gòu)建、細(xì)胞模型構(gòu)建，藥效研究，各類表型、機(jī)制、通路等研究服務(wù)。

晶萊可開展小鼠、大鼠、豚鼠、地鼠、兔、犬、豬、猴相關(guān)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，可構(gòu)建200余種動(dòng)物疾病模型。

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