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醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本采集和處理方法.ppt

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1、,血液標(biāo)本的采集和處理方法 安慶伊康醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)所 汪全龍,血液 是存在于心血管系統(tǒng)內(nèi)的流體組織,由血漿和血細(xì)胞組成。,血液的生理功能 1、運(yùn)輸功能 2、緩沖功能 3、參與體溫的維持 4、免疫防御功能 5、參與機(jī)體的生理止血,第一節(jié) 血液組成及理化特性,一、血液的組成和血量 血液由血漿和各種血細(xì)胞組成,一個(gè)健康成年人的血量約占體重的7%8%血量的相對(duì)穩(wěn)定是機(jī)體維持正常生命活動(dòng)的重要保證。,1、血液的組成,血液,血液各成分的比容,血漿的化學(xué)成分蛋白質(zhì) 血漿蛋白是血漿中多種蛋白質(zhì)的總稱(chēng),總量為65-85g/L白蛋白 4048g/L 形成膠體滲透壓球蛋白 1530g/L 免疫防御作用纖維蛋白原 24g/

2、L 參與血液凝固,血漿蛋白的功能1、形成血漿滲透壓2、運(yùn)輸作用3、免疫作用4、參與生理止血和纖維蛋白溶解過(guò)程,血漿滲透壓及其作用,血漿滲透壓的大小取決于血漿中溶質(zhì)顆粒的數(shù)目。血漿滲透壓:300 mmolL,主要來(lái)自溶解在血漿中的晶體物質(zhì)。血漿滲透壓的大小與血漿的溶質(zhì)顆粒數(shù)成正比,而與溶質(zhì)顆粒的種類(lèi)、化學(xué)性質(zhì)和大小無(wú)關(guān)。,二、血漿的理化特性,1、晶體滲透壓:血漿中晶體物質(zhì)形成,80%來(lái)自Na和Cl。意義:保持細(xì)胞內(nèi)外的水平衡。因?yàn)榫w物質(zhì)可以自由通過(guò)毛細(xì)血管,使細(xì)胞外液的晶體滲透壓基本相等,但不易通過(guò)細(xì)胞膜。這對(duì)保持細(xì)胞內(nèi)外水平衡和細(xì)胞的正常體積非常重要。,2.膠體滲透壓:3.3 kPa(25

3、mmHg),由血漿蛋白形成,主要是白蛋白。意義:保持血管內(nèi)外的水平衡。由于血漿蛋白不易通過(guò)毛細(xì)血管壁所以在調(diào)節(jié)血管內(nèi)外水的平衡和維持正常的血漿容量起重要作用。,水,水,水,0.9%NaCl 2%NaCl 0.7%NaCl,等滲溶液 高滲溶液 低滲溶液,正常紅細(xì)胞,NaCl溶液,與血漿滲透壓相比,血漿滲透壓:等滲溶液 血漿滲透壓:高滲溶液 血漿滲透壓:低滲溶液,血漿PH值 7.357.45 血漿PH值的相對(duì)恒定有賴(lài)于血液內(nèi)的緩沖物質(zhì)以及肺和腎的正常功能。血漿內(nèi)的主要緩沖對(duì)有(1)NaHCO3/H2CO3(2)蛋白質(zhì)/蛋白質(zhì)鈉鹽(3)Na2HPO4/NaH2PO4 此外肺和腎能排出體內(nèi)過(guò)多的酸或堿

4、,血漿PH值的波動(dòng)范圍就很小。,第二節(jié) 血細(xì)胞的形態(tài)和功能,血細(xì)胞生成部位成人的各種血細(xì)胞均發(fā)源于骨髓,在胚胎早期從是卵黃囊造血,從第二個(gè)月起由肝脾造血,第五個(gè)月起變?yōu)榧t骨髓造血,出生時(shí)幾乎完全依靠骨髓造血,隨著骨髓腔的增長(zhǎng)脂肪細(xì)胞進(jìn)入骨髓,逐步填充多余的骨髓腔,18歲以后主要是在脊椎骨、肋骨、髂骨和長(zhǎng)骨骨骺處才有造血骨髓。所有的血細(xì)胞均起源于造血干細(xì)胞。,一、紅細(xì)胞 是血液中數(shù)量最多的血細(xì)胞 1、形態(tài):無(wú)核,呈中央雙凹圓盤(pán)狀 12 正常值 男性(4.05.5)10L 12 女性(3.55.0)10L,紅細(xì)胞生成的主要原料、合成血紅蛋白的基本原料:鐵和蛋白質(zhì)。成人體內(nèi)共有鐵34 g,其中約70

5、存于血紅蛋白中。、促使紅細(xì)胞發(fā)育成熟的因子:葉酸和維生素B12,加快細(xì)胞的分裂和增殖,促進(jìn)紅細(xì)胞的發(fā)育成熟。,紅細(xì)胞平均壽命120 天。衰老RBC變形能力弱,脆性增加。血流湍急處收機(jī)械沖擊而破損血管內(nèi)破壞。滯留在肝、脾、骨髓的血管或血竇的狹窄處,被巨噬細(xì)胞吞噬血管外破壞。,紅細(xì)胞的生理特性1、紅細(xì)胞的可塑變形性2、紅細(xì)胞的滲透脆性3、紅細(xì)胞的懸浮穩(wěn)定性,紅細(xì)胞的生理功能 主要功能:運(yùn)輸O2和CO2 主要由血紅蛋白完成,紅細(xì)胞中含有豐富的血紅蛋白。正常成年男性約為120gL160gL 女性約為110gL150gL,二、白細(xì)胞,1、白細(xì)胞形態(tài)、數(shù)量和分類(lèi)是有核的細(xì)胞,在血液中呈球形,正常成人白細(xì)胞

6、總數(shù)為(4.010.0)109L,飯后、運(yùn)動(dòng)、妊娠分娩及月經(jīng)期等均可使白細(xì)胞增多。,白細(xì)胞,有粒白細(xì)胞,中性粒細(xì)胞嗜酸性粒細(xì)胞嗜堿性粒細(xì)胞,無(wú)粒白細(xì)胞,淋巴細(xì)胞單核細(xì)胞,白細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)及主要生理功能分類(lèi) 百分比()主要生理功能中性粒細(xì)胞 5070 吞噬細(xì)菌,尤其是入侵的化 膿性細(xì)菌嗜堿性粒細(xì)胞 01 與組織中的肥大細(xì)胞共同參 與過(guò)敏反應(yīng)嗜酸性粒細(xì)胞 14 限制過(guò)敏反應(yīng),參與蠕蟲(chóng)免疫淋巴細(xì)胞 2040 參與特異性免疫單核細(xì)胞 28 吞噬病原微生物及衰老細(xì)胞;識(shí)別殺傷腫瘤細(xì)胞,白細(xì)胞的生理功能1、白細(xì)胞滲出2、趨化性,(1)、中性粒細(xì)胞 50%70%形態(tài):球形,核桿狀或分葉狀,功能:吞噬、殺滅細(xì)菌

7、。,(2)、嗜堿粒細(xì)胞 0-1%形態(tài):球形,核S形或分葉,胞質(zhì)內(nèi)含大小不一,分布不均的嗜堿性顆粒,染成蘭紫色。功能:參與過(guò)敏反應(yīng)。,(3)、嗜酸粒細(xì)胞 0.5-3%形態(tài):球形,核兩葉,胞質(zhì)內(nèi)充滿粗大均勻嗜酸性顆粒,紅染。功能:抗過(guò)敏,抗寄生蟲(chóng)。,(4)、單核細(xì)胞 3-8%形態(tài):圓或橢圓,核腎形或卵圓形。功能:是巨噬細(xì)胞的前身。具有吞噬及免疫功能。,(5)、淋巴細(xì)胞 20-30%形態(tài):圓或橢圓,核圓,一側(cè)有凹陷,胞質(zhì)少。功能:免疫作用,包括T細(xì)胞:主要參與細(xì)胞免疫。B細(xì)胞:主要參與體液免疫。,三、血小板1、血小板的形態(tài)和數(shù)量血小板是骨髓中成熟的巨核細(xì)胞脫落下來(lái)的細(xì)胞質(zhì)碎片,體積小,無(wú)細(xì)胞核。正常

8、成人血小板數(shù)為(100300)109/L。劇烈運(yùn)動(dòng)、妊娠、較大損傷后可使血小板增多。,當(dāng)血小板少于50109/L時(shí),稱(chēng)血小板過(guò)少,人體可出現(xiàn)異常出血傾向。當(dāng)血小板多于1000109/L時(shí),稱(chēng)血小板過(guò)多,則易發(fā)生血栓。血小板平均壽命 714 天。,血小板的生理功能(1).維持血管內(nèi)皮完整性(2).參與生理性止血和血液凝固過(guò)程,第三節(jié) 生理止血和血液凝固,一、生理止血 小血管破損后血液將從血管流出,數(shù)分鐘后即可自行停止,稱(chēng)為生理性止血。,生理性止血大致分為三個(gè)基本步驟,1、血管收縮 表現(xiàn)為受損血管局部和附近的小血管受縮,使局部血流減少。2、血小板止血栓的形成 血管受損后,血小板首先黏附聚集于受損血

9、管內(nèi)皮下,血流中的血小板不斷的的聚集、黏附固定于血管內(nèi)皮上,形成血小板血栓,從而將傷口堵塞,達(dá)到初步止血的作用。,3、血液凝固 血管受損可以啟動(dòng)凝血系統(tǒng),在局部迅速發(fā)生血液凝固,使血漿中的可溶性纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)椴蝗苄缘睦w維蛋白,并交織成網(wǎng),以加固止血栓。,生理性止血過(guò)程的三個(gè)環(huán)節(jié)彼此相互促進(jìn),使生理性止血能及時(shí)而快速地進(jìn)行,是機(jī)體重要的保護(hù)機(jī)制之一。,血液凝固后l2 h,血凝塊發(fā)生回縮,釋出淡黃色的液體,稱(chēng)為血清。,血液分離方法血清與血漿的主要區(qū)別在于血清中不含纖維蛋白原。,二、血液凝固血液由流動(dòng)的液體狀態(tài)變?yōu)椴荒芰鲃?dòng)的凝膠狀態(tài)的過(guò)程稱(chēng)為血液凝固,簡(jiǎn)稱(chēng)凝血。,血液凝固的本質(zhì)是在凝血因子的作用下

10、發(fā)生一系列酶促生化反應(yīng),使血漿中的可溶性纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)椴蝗苄岳w維蛋白的過(guò)程。纖維蛋白交織成網(wǎng),將很多血細(xì)胞網(wǎng)羅在內(nèi),形成血凝塊。血液凝固需要多種凝血因子的參與。,(一)、凝血因子血漿與組織中直接參與血液凝固的物質(zhì)統(tǒng)稱(chēng)為凝血因子,共有12種。編號(hào) 中文名稱(chēng) 編號(hào) 中文名稱(chēng) 因子 纖維蛋白原 因子 抗血友病因子 因子 凝血酶原 因子 血漿凝血激酶 因子 組織因子 因子 斯圖亞特因子 因子 Ca2+因子 血漿凝血激酶前質(zhì) 因子 前加速素 因子 接觸因子 因子 前轉(zhuǎn)變素 因子 纖維蛋白穩(wěn)定因子,(二)、血液凝血過(guò)程 血液凝固是凝血因子按一定順序相繼激活而生成的凝血酶,最終使纖維蛋白原變?yōu)槔w維蛋白。分

11、為三個(gè)步驟:A、凝血酶原復(fù)合物的形成 可通過(guò)內(nèi)源性凝血途徑和外源性凝血途徑生成,進(jìn)而激活凝血酶原。B、凝血酶原的激活 凝血酶原在凝血酶原復(fù)合物的作用下激活成為凝血 酶。C、纖維蛋白的生成 在凝血酶的作用下,使纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成不溶的纖維蛋白。,相繼激活、逐級(jí)放大”,(3)凝血的三個(gè)基本步驟:,1、凝血酶原酶復(fù)合物的形成(因子酶復(fù)合物)根據(jù)凝血因子X(jué)的激活途徑和參與的凝血因子的不同分為 內(nèi)源性凝血途徑 外源性凝血因子,(1)、內(nèi)源性凝血途徑指參與凝血的因子全部來(lái)自血液 通常因血液與帶負(fù)電荷的物質(zhì)如玻璃、血管內(nèi)皮等接觸而啟動(dòng)。,血液與異物接觸 因子結(jié)合到異物表面,激活 激活 因子a 成為a Ca2+

12、因子激活成為a,a+a結(jié)合成復(fù) 激活合物,即因子酶復(fù)合物 生成a,(2)、外源性凝血途徑 由血管外組織產(chǎn)生的組織因子()與血液接觸而啟動(dòng)的凝血過(guò)程,又稱(chēng)組織因子途徑。,凝血過(guò)程當(dāng)血管損傷時(shí),暴露出組織因子,a 磷脂、Ca2+a-組織因子復(fù)合物 激活生成a,通過(guò)a-組織因子復(fù)合物的形成,使內(nèi)源性凝血途徑和外源性凝血途徑相互聯(lián)系,相互促進(jìn),共同完成凝血過(guò)程。生成的a在Ca2+存在的情況下與a在磷脂膜表面形成a-a-Ca2+-磷脂復(fù)合物即凝血酶原酶復(fù)合物。,凝血酶原酶復(fù)合物凝血酶原 凝血酶,相繼激活、逐級(jí)放大”,(3)凝血的三個(gè)基本步驟:,凝血酶的作用使纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w維蛋白單體激活因子生成因子

13、a,使纖維蛋白單體相互聚合,形成不溶于水的纖維蛋白多聚體凝塊。激活因子、等,對(duì)凝血過(guò)程起正反饋促進(jìn)作用。使血小板活化,為凝血酶原酶復(fù)合物的形成提供有效的磷脂表面。,(三)血液凝固過(guò)程的調(diào)控1、血管內(nèi)皮的抗凝作用2、纖維蛋白的吸附、血液的稀釋及單核巨 噬細(xì)胞的吞噬作用。3、生理性抗凝物質(zhì)。A、絲氨酸蛋白酶抑制物:抗凝血酶 B、肝素 C、蛋白質(zhì)C系統(tǒng) D、組織因子途徑抑制物,正常情況下,血管內(nèi)皮完整,血液不會(huì)發(fā)生凝血,即使有損傷發(fā)生時(shí),血液凝固也僅限于受損血管的局部,并不延及未損部位,全身血液循環(huán)不會(huì)受到影響,原因在于血液中存在抗凝物質(zhì)。血液中的抗凝物質(zhì)主要有抗凝血酶和肝素。,三、纖維蛋白溶解系統(tǒng)

14、 纖維蛋白被分解液化的過(guò)程稱(chēng)為纖維蛋白溶解。纖維蛋白溶解 血凝過(guò)程中形成的不溶性纖維蛋白可在纖溶酶的作用下,變成可溶性的纖維蛋白降解產(chǎn)物。,纖維蛋白的溶解,纖溶酶原,纖溶的意義 使纖維蛋白凝塊溶解,防止血栓形成,保證血流通暢,有利于收縮組織的再生和修復(fù)。,凝血和纖溶是機(jī)體的一種保護(hù)性生理過(guò)程,血液凝固系統(tǒng)和纖維蛋白溶解系統(tǒng)是兩個(gè)對(duì)立統(tǒng)一的功能系統(tǒng),它們之間維持著動(dòng)態(tài)平衡,既保證血液暢通,又可防止血管內(nèi)血栓的形成。,紅細(xì)胞凝集 將含不同凝集原的血混合,將會(huì)發(fā)生紅細(xì)胞聚集成簇,這一現(xiàn)象稱(chēng)為紅細(xì)胞凝集;同時(shí)伴有引起凝集的紅細(xì)胞破例,發(fā)生溶血。因此當(dāng)給人體輸入血型不相容的血液時(shí),在血管內(nèi)可發(fā)生紅細(xì)胞凝

15、集和溶血反應(yīng)。,化學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本采集和處理方法,臨床檢驗(yàn)的目的是為臨床提供準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)診斷依據(jù)。為了保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的可靠性,在檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)中必須堅(jiān)持全面質(zhì)量控制(total quality control,TQC.)和全過(guò)程質(zhì)量控制。全過(guò)程質(zhì)量控制包括實(shí)驗(yàn)前(分析前)、實(shí)驗(yàn)中(分析中)和實(shí)驗(yàn)后(分析后)三個(gè)階段的質(zhì)量控制。在實(shí)驗(yàn)誤差中實(shí)驗(yàn)前誤差占70%,因而實(shí)驗(yàn)前質(zhì)量保證對(duì)減少實(shí)驗(yàn)誤差顯得尤其重要。實(shí)驗(yàn)前質(zhì)量保證包括病人準(zhǔn)備、標(biāo)本收集、處理、貯存和運(yùn)輸?shù)?,因而能否正確地、規(guī)范化地采集和處理標(biāo)本,是能否做到實(shí)驗(yàn)前質(zhì)量保證的重要內(nèi)容。在臨床化學(xué)檢驗(yàn)中,血液標(biāo)本是應(yīng)用最多的生物體液,血液標(biāo)本因素是影響臨

16、床化學(xué)分析準(zhǔn)確性和可靠性的最重要、最直接的因素。我國(guó)從我們的國(guó)情出發(fā),參考了美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(NCCLS)的有關(guān)規(guī)定,對(duì)臨床化學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本的有關(guān)問(wèn)題也提出了相應(yīng)的要求。我國(guó)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)委員會(huì)臨床檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)專(zhuān)業(yè)委員會(huì)(CCCLS)已對(duì)“臨床化學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本的收集與處理”提出了“中華人民共和國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)”,旨在通過(guò)標(biāo)本方面的質(zhì)量控制達(dá)到臨床化學(xué)分析的質(zhì)量保證。目前該“標(biāo)準(zhǔn)”文件正在待批中。,化學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本采集和處理方法,一、臨床化學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本的定義二、血液標(biāo)本的采取三、全血處理為血清或血漿四、血清或血漿分離物質(zhì)五、標(biāo)本污染和生物安全,一、臨床化學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本的定義,臨床化學(xué)檢驗(yàn)血液

17、標(biāo)本是指為完成某項(xiàng)或多項(xiàng)臨床化學(xué)檢驗(yàn)項(xiàng)目而采集的一定量的血液,包括抗凝及非抗凝血。,二、血液標(biāo)本的采取,采取部位 1.靜脈采血:應(yīng)用最多的采血方式。常用的靜脈為肘前靜脈、腕背靜脈,小兒和新生兒有時(shí)用頸靜脈和前囟靜脈。2.動(dòng)脈采血:主要用于血?dú)夥治鰰r(shí)。常用的動(dòng)脈為股動(dòng)脈、肱動(dòng)脈、橈動(dòng)脈和臍動(dòng)脈。3.毛細(xì)血管采血:適用于僅需微量血液的試驗(yàn)或嬰幼兒。常用部位為耳垂、指端,小兒有時(shí)為大趾和足跟。采血針刺入皮膚深度應(yīng)為2mm(2.5mm),采血局部應(yīng)無(wú)炎癥、水腫等。標(biāo)本類(lèi)型臨床化學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本分為血清、血漿和全血3種。血清和血漿為臨床常用,除前者不含纖維蛋白原外,其余多數(shù)化學(xué)成分無(wú)差異;全血只有在紅細(xì)胞

18、內(nèi)成分與血漿成分相似時(shí)才用;血?dú)夥治觥⒀t蛋白電泳等時(shí)用全血,一般臨床化學(xué)分析多不用全血。,三、全血處理為血清或血漿,血液標(biāo)本采取后應(yīng)盡可能早地自然地使血清(漿)從與血細(xì)胞接觸的全血中分離出來(lái)。一般應(yīng)于采血后2h內(nèi)分離出血清或血漿。全血處理為血清或血漿分為離心前、離心中和離心后三個(gè)階段,對(duì)各不同階段均有具體要求。,三、全血處理為血清或血漿,(一)離心前階段 即指標(biāo)本采集到離心處理前的一段時(shí)間。1.血清:標(biāo)本離心前一般應(yīng)令其自行凝集,不可用木棍竹簽等剝離凝血塊。通常于室溫(2225)放置3060 min 血標(biāo)本可自發(fā)完全凝集;冷藏標(biāo)本凝集緩慢;加促凝劑時(shí)凝集加快(標(biāo)本采集后應(yīng)輕輕顛倒混合510次

19、,以確保促凝劑作用)。2.血漿:需用血漿標(biāo)本時(shí),必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,而且采血后必須立即輕輕顛倒采血管混合510次(以確保抗凝劑發(fā)揮作用),510 min 后即可分離出血漿。3.冷藏標(biāo)本:標(biāo)本冷藏可抑制細(xì)胞代謝,穩(wěn)定某些溫度依賴(lài)性成分、但全血標(biāo)本一般不能冷藏;血鉀測(cè)定標(biāo)本冷藏不得超過(guò)2h.標(biāo)本需要冷藏(28)時(shí),標(biāo)本采取后應(yīng)立即將標(biāo)本置于2-8冰箱中。,三、全血處理為血清或血漿,(一)離心前階段 4.代謝抑制劑和防腐劑:某些添加劑加入血液標(biāo)本中能抑制細(xì)胞代謝,可以防止血液標(biāo)本貯存時(shí)分析物濃度的變化。血液葡萄糖測(cè)定時(shí),如在血液中加入氟化鈉,在血細(xì)胞未分離的情況下,葡萄糖在2225時(shí)可

20、穩(wěn)定24h,28 時(shí)可以穩(wěn)定48h;但在新生兒和兒童標(biāo)本,由于紅細(xì)胞壓積高,用氟化鈉難以控制細(xì)胞的糖酵解作用;甲醛草酸鉀抗凝保存劑不適合血糖測(cè)定;氟化鈉麝香草酚混合劑因能抑制酶活性,不適用于酶學(xué)測(cè)定。,三、全血處理為血清或血漿,(一)離心前階段 5.標(biāo)本采集現(xiàn)場(chǎng):(1)標(biāo)本采集后應(yīng)盡快送往實(shí)驗(yàn)室,尤其當(dāng)收集區(qū)溫度超過(guò)22時(shí)此點(diǎn)更為重要;(2)血液標(biāo)本采集后血管必須加塞、管口向上、垂直放置,以減少管中內(nèi)容物振動(dòng),促進(jìn)凝血完全,防止標(biāo)本蒸發(fā)、污染和外濺等;(3)已收集的血液標(biāo)本應(yīng)溫和地處理,要防止標(biāo)本管振蕩所造成的紅細(xì)泡破壞(溶血);溶血可引起細(xì)胞內(nèi)外液濃度改變,影響測(cè)定結(jié)果。有嚴(yán)重影響(使結(jié)果升

21、高)的項(xiàng)目有:神經(jīng)元特異性烯醇化酶、乳酸脫氫酶、血清門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、血清鉀和血紅蛋白;引起值得注意的影響的項(xiàng)目有:血清鐵()、血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶()和血清甲狀腺素();輕度受影響(增加)的有:總蛋白、白蛋白、血清磷、血清鎂、血清鈣和酸性磷酸酶;溶血可影響呈色反應(yīng)終點(diǎn)為紅色的實(shí)驗(yàn),如:酶法測(cè)定血糖、膽固醇、甘油三酯、膽紅素的重氮反應(yīng)、尿素的二乙酰污法。(4)應(yīng)避免對(duì)光線敏感的分析物暴露在人造光或太陽(yáng)光(紫外線)照射下。如 VA、VB6、胡蘿卜素、卟啉、膽紅素等測(cè)定時(shí),標(biāo)本管應(yīng)該用鋁箔或類(lèi)似物質(zhì)包裹保護(hù)起來(lái)。,三、全血處理為血清或血漿,(一)離心前階段 6.標(biāo)本運(yùn)送:全血標(biāo)本應(yīng)盡快從采血現(xiàn)場(chǎng)

22、運(yùn)送至實(shí)驗(yàn)室,如果運(yùn)送距離較遠(yuǎn),特別是因分析物穩(wěn)定性有影響,必要時(shí)可于采血現(xiàn)場(chǎng)分離出血清或血漿后,再送往實(shí)驗(yàn)室;標(biāo)本運(yùn)送過(guò)程中要注意標(biāo)本的包裝、溫度要求、處理方法等,要確保分析成分的穩(wěn)定性;標(biāo)本管在運(yùn)送過(guò)程中要保持管口封閉、向上垂直放置。,三、全血處理為血清或血漿,(一)離心前階段 7.實(shí)驗(yàn)室接受標(biāo)本及離心標(biāo)本準(zhǔn)備:(1)要有標(biāo)本收取記錄(應(yīng)認(rèn)真核對(duì)檢驗(yàn)中清單,對(duì)有關(guān)情況要認(rèn)真記錄,標(biāo)本接收及處理應(yīng)簽字登記);(2)對(duì)接受的標(biāo)本要予以分類(lèi)準(zhǔn)備離心;(3)實(shí)驗(yàn)室接受標(biāo)本后應(yīng)仍保持標(biāo)本管于密閉封口、管口向上,垂直位放置。管塞移去后血中CO2丟失,會(huì)造成pH增加,離子鈣和酸性磷酸酶減少,尤其pH變化

23、會(huì)影響某些檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性;(4)標(biāo)本凝集時(shí)間要充分;加抗凝劑的血液標(biāo)本可以立即離心;加促凝劑的標(biāo)本可于采血后515 min 盡早離心;抗凝的全血標(biāo)本(鋅、鋰、原卟啉等測(cè)定時(shí))可以不離心;(5)冷藏(28)標(biāo)本應(yīng)保持這個(gè)溫度直到準(zhǔn)備離心。推薦用溫度控制離心機(jī);(6)離心標(biāo)本前不主張用小木棒或類(lèi)似器材去剝離附著于試管壁和管塞上的凝塊,人為剝離會(huì)誘導(dǎo)溶血。如果必須露出試管壁或取下管塞時(shí),一定要十分注意,動(dòng)作一定要輕柔。,三、全血處理為血清或血漿,(二)離心階段 即指標(biāo)本處于離心機(jī)里的一段時(shí)間。1.離心時(shí)間和相對(duì)離心力(RCF):RCF(10001200),離心時(shí)間為510 min.RCF=0.00

24、001118RN2 N=RCF1051.1118R(N:轉(zhuǎn)分 R:離心半徑 RCF:相對(duì)離心力)按目前常用離心機(jī)大小,一般在2000-3000轉(zhuǎn)即可。2.溫度控制:離心時(shí)產(chǎn)熱不利于分析物穩(wěn)定,臨床化學(xué)分析血液標(biāo)本離心時(shí)推薦采用溫度控制離心機(jī)。一些溫度依賴(lài)性分析物(如促腎上腺皮質(zhì)激素、環(huán)腺苷酸、兒茶酚胺等)應(yīng)在4分離;無(wú)特殊溫度要求的分析物,離心溫度應(yīng)設(shè)定在20 22;溫度低于15可以人為地使血鉀測(cè)定值增高;冷藏運(yùn)送的標(biāo)本必須在要求的溫度下離心。3.離心時(shí)標(biāo)本要配平。,三、全血處理為血清或血漿,(三)離心后階段 指標(biāo)本離心后和用于檢測(cè)的血清或血漿被取出一定量之前的一段時(shí)間。1.血清或血漿與接觸的

25、血細(xì)胞和凝塊的分離應(yīng)在采血后盡快(2小時(shí)內(nèi))完成。2.分離的血清或血漿的貯存:實(shí)驗(yàn)室的室溫和血清或血漿的貯存溫度、時(shí)間,是分析物穩(wěn)定性和測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確性的重要參數(shù):(1)于2225血清或血漿的保存不超過(guò)8h;(2)實(shí)驗(yàn)于8h內(nèi)不能完成時(shí),血清或血漿應(yīng)置28保存;(3)48h內(nèi)不能完成的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目,或分離的血清或血漿需貯存48h以上時(shí),應(yīng)于-20保存;(4)標(biāo)本不可反復(fù)凍融(只能凍融一次),且不可貯存于無(wú)霜冰箱(可造成樣品溫度變化);(5)離心后分離凝膠(凝膠屏障)上面的血清在4可貯存24h,但必須保證凝膠的完整性;但應(yīng)用非凝膠分離物質(zhì)時(shí),離心后必須立即將血清或血漿移出。(6)血清或血漿必須保存于密

26、閉的試管中。,四、血清或血漿分離物質(zhì),是指將血清或血漿從全血中分離出來(lái)的物質(zhì),包括凝膠物質(zhì)與非凝膠物質(zhì)。(一)凝膠物質(zhì) 為一類(lèi)具有特定粘度和特殊比重(介于血清或血漿與凝塊之間的比重)的惰性凝膠物質(zhì),用(10001100)RCF離心10 min,能在血清或血漿與凝塊之間形成不可穿透的凝膠屏障,從而將血清或血漿與其接觸的血細(xì)胞、凝塊分開(kāi)。(二)非凝膠物質(zhì) 是由惰性物質(zhì)(玻璃、塑料、纖維、毛氈等)構(gòu)成的小珠、盤(pán)、濾器、纖維塞等組成。具有介于血清或血漿與凝塊之間的比重,將其輕輕加入血管中,用(1000 1100)RCF 離心10 min時(shí),可透過(guò)血液移動(dòng)至血清或血漿與血細(xì)胞、凝塊之間,形成一個(gè)界面,使血清或血漿被分離出來(lái)。(三)完整的凝膠管系統(tǒng) 該系統(tǒng)是由一個(gè)真空采血管(硅化塑料管)、內(nèi)含惰性凝膠物質(zhì)、促凝劑或抗凝劑組成。使用時(shí)要注意該產(chǎn)品必須具有相應(yīng)性能證書(shū)和有效期,并且必須在其有效期內(nèi)正確使用。,

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