李芳嬋，韋紅勤，陳 清，羅宇東，龐曉云，黃 菁，王蘇妃

（1.廣西中醫(yī)藥大學，南寧 530200；2.廣西壯瑤藥工程技術研究中心，南寧 530200；3.廣西中醫(yī)藥大學制藥廠，南寧 530000）

根據世界衛(wèi)生組織（WHO）數據統計顯示，高血脂癥是全球五大致死病因之一，容易引發(fā)心腦血管疾病，嚴重威脅人們的身體健康［1］。五味祛脂顆粒配方是根據中國“藥食同源”傳統飲食文化和壯瑤藥用藥理論組方擬開發(fā)的具有輔助降血脂功效的保健食品，由藤茶、葛根、決明子、百合、荷葉等藥食同源的藥材組方。本試驗通過建立高血脂癥大鼠模型，觀察五味祛脂顆粒對高血脂大鼠血清高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇、總膽固醇、甘油三酯含量的影響，以期為五味祛脂顆粒的進一步開發(fā)提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 樣品和試劑

高脂飼料按《關于印發(fā)抗氧化功能評價方法等9個保健功能評價方法的通知》國食藥監(jiān)?；?012］107號配制，配方：維持飼料49.3%、蔗糖20%、豬油15%、酪蛋白12.5%、膽固醇1.2%、磷酸氫鈣1.3%、石粉0.5%、膽酸鈉0.2%。維持飼料（北京科澳協力飼料有限公司生產），高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）試劑盒（南京建成生物工程研究所，生產批號20181129）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）試劑盒（南京建成生物工程研究所，生產批號20181116）、總膽固醇（TC）試劑盒（南京建成生物工程研究所，生產批號20181129）、甘油三酯（TG）試劑盒（南京建成生物工程研究所，生產批號20181116）。

1.2 試驗儀器

5810R高速冷凍離心機（德國艾本德公司）、EPOCH全波長酶標儀（美國BIOTEK公司）

1.3 實驗動物

健康雄性SD大鼠（SPF級），體重（150±10）g，購自湖南斯萊克景達實驗動物有限公司，生產許可證：SCXK（湘）2016-0002，質量合格證：No.4300470 0040620。

1.4 試驗方法

1.4.1 五味祛脂顆粒的制備 按比例稱取藤茶、葛根、決明子、百合、荷葉藥材，加10倍量水提取2次，每次1.5 h，過濾濃縮至稠膏，加糖粉、甜菊苷、淀粉等輔料制成。

1.4.2 造模 取SPF級健康雄性SD大鼠98只，適應性喂養(yǎng)維持飼料5 d后，按體重隨機分為空白對照組（8只）和模型組（90只）。模型組給予高脂飼料，空白對照組給予維持飼料，飼喂14 d后，大鼠不禁食眼內眥采血，迅速分離血清，用試劑盒測定大鼠血清的高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）含量。模型組與空白對照組比較，血清甘油三酯升高，血清總膽固醇或低密度脂蛋白膽固醇升高，差異均有顯著性，判定高脂血癥大鼠模型成立。

1.4.3 給藥 取上述高脂血癥模型大鼠40只，根據TC水平將模型組分為模型對照組、陽性組、高劑量組、中劑量組、低劑量組共5組，每組8只。五味祛脂顆粒低、中、高劑量組劑量分別為7.08、14.17、21.25 g/kg（按生藥量算，相當于人體劑量的5、10、15倍），以非諾貝特組為陽性藥，劑量為100 mg/kg。各組每次按照15 mL/kg灌胃給予相應的受試物，空白對照組灌胃給予相同劑量的生理鹽水，模型對照組灌胃給予相同劑量的去離子水，每日1次，連續(xù)給樣30 d。給樣期間，空白對照組繼續(xù)飼喂維持飼料，模型對照組及各劑量組飼喂高脂飼料。每3 d記錄動物體重1次，并根據體重調整給樣量。末次給樣后，大鼠不禁食眼內眥采血，迅速分離血清，用試劑盒測定大鼠血清中HDL-C、LDL-C、TC、TG含量。分組、給藥劑量、給藥體積及給藥次數具體見表1。

表1 五味祛脂顆粒各劑量組給藥劑量、給藥體積、給藥次數

1.4.4 檢測指標 末次給藥后，收集大鼠血液至離心管，4℃冰箱放置1 h，3 000 r/min離心15 min，取血清，按照HDL-C、LDL-C、TC、TG試劑盒檢測要求，檢測血清中HDL-C、LDL-C、TC、TG含量。

1.5 輔助降低血脂功能結果判定

根據《關于印發(fā)抗氧化功能評價方法等9個保健功能評價方法的通知》（國食藥監(jiān)?；?012］107號）中輔助降血脂功能檢驗方法判斷輔助降血脂功能動物試驗結果。

模型組與空白對照組比較，血清甘油三酯升高，血清總膽固醇或低密度脂蛋白膽固醇升高，差異均有顯著性，判定高脂血癥大鼠模型成立。

各劑量組與模型對照組比較，任一劑量組血清總膽固醇或低密度脂蛋白膽固醇降低，且任一劑量組血清甘油三酯降低，差異均有顯著性，同時各劑量組血清高密度脂蛋白膽固醇不顯著低于模型對照組，可判定該受試樣品輔助降低血脂功能試驗結果陽性。

各劑量組與模型對照組比較，任一劑量組的血清總膽固醇或低密度脂蛋白膽固醇降低，差異均有顯著性，同時各劑量組的血清甘油三酯不顯著高于模型對照組，各劑量組血清高密度脂蛋白膽固醇不顯著低于模型對照組，則可判定該受試樣品輔助降低膽固醇功能試驗結果陽性。

各劑量組與模型對照組比較，任一劑量組血清甘油三酯降低，差異均有顯著性，同時各個劑量組低密度脂蛋白膽固醇及總膽固醇不顯著高于模型對照組，血清高密度脂蛋白不顯著低于模型對照組，則可判定該受試樣品輔助降低甘油三酯功能動物試驗結果陽性。

1.6 統計學方法

采用SPSS 17.0統計軟件處理，數據以平均數±標準差（xˉ±s）表示，先用Leven′s test方法進行方差齊性檢驗，如果符合方差齊性，則采用單因素方差分析（ANOVA）和post HocLSD進行多個試驗組均數間的兩兩比較。如若方差不齊，則用T檢驗進行統計分析。P＜0.05表示差異有顯著意義，P＜0.01表示差異有極顯著意義。

2 結果與分析

2.1 造模14 d后高脂飼料對大鼠血脂的影響

從表2可以看出，飼喂高脂飼料14 d后，與空白對照組比較，模型組大鼠血清總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）均極顯著升高（P＜0.01），判定高脂血癥大鼠模型成立。按總膽固醇（TC）含量將模型組分為高、中、低劑量組、非諾貝特組及模型對照組，模型對照組及各給藥組大鼠血清TC、TG均極顯著高于空白對照組（P＜0.01），LDL-C與空白組比較，無顯著差異（P＞0.05），HDL-C與空白組比較，無顯著差異（P＞0.05），各給藥組血清TC、TG、LDL-C、HDL-C與模型對照組比較，無顯著差異（P＞0.05）。

表2 給予高脂飼料14 d后大鼠分組血脂數據（單位：mmol/L）

2.2 五味祛脂顆粒對大鼠體重的影響

從表3可以看出，與空白對照組比較，模型對照組、五味祛脂顆粒各劑量組大鼠初始體重差異無顯著性，模型組大鼠終末體重增加，差異有統計學意義（P＜0.01）。與模型對照組比較，五味祛脂顆粒各劑量組動物終末體重降低，差異有統計學意義（P＜0.01），表明在本試驗條件下五味祛脂顆粒對大鼠體重有明顯影響，五味祛脂顆?？蓽p緩高血脂模型大鼠體重的增長，可能具有一定的減肥功效。

表3 五味祛脂顆粒對大鼠體重的影響

2.3 末次給藥后五味祛脂顆粒對大鼠血脂含量的影響

從表4可以看出，末次給藥后，模型對照組大鼠的血清TC、TG、LDL-C含量均極顯著高于空白對照組（P＜0.01），HDL-C含量極顯著低于空白對照組（P＜0.01）。與模型對照組比較，五味祛脂顆粒各劑量組TC、TG、LDL-C隨劑量增加而降低，中劑量組、高劑量組有顯著（或極顯著）差異（P＜0.05或P＜0.01），低劑量組也能夠顯著降低TG含量（P＜0.05）；五味祛脂顆粒各劑量組的HDL-C含量與模型組比較，差異有統計學意義（P＜0.05或P＜0.01）。根據《關于印發(fā)抗氧化功能評價方法等9個保健功能評價方法的通知》（國食藥監(jiān)?；?012］107號）中輔助降血脂功能檢驗方法，判斷五味祛脂顆粒具有輔助降血脂功能。

表4 末次給藥后五味祛脂顆粒對大鼠血脂含量的影響（單位：mmol/L）

3 小結與討論

高血脂癥是指人體的血脂紊亂或血脂異常，包括總膽固醇含量升高、甘油三酯含量升高、低密度脂蛋白含量升高，以及高密度脂蛋白含量下降等，會誘發(fā)冠心病、腦中風、高血壓、高血糖等嚴重疾?。?，3］。目前高血脂癥主要應用化學藥物治療，包括他汀類、貝特類、依折麥布、膽酸螯合劑等，這些臨床治療效果明顯，但作用靶點單一，容易引起不良反應；而中藥在高血脂的治療方面歷史悠久，安全性高，多靶點，價格低廉，且可多方聯合應用，標本兼治［4，5］，因此備受關注。

五味祛脂顆粒由藤茶、葛根、決明子、荷葉、百合等藥食同源中藥組方，具有利濕平肝、清熱解暑、活血通絡的功效。藤茶可以通過降低血管滲透性和脆性來保護血管免受細胞被氧化損害引起的傷害，而抑制高脂血癥的形成，具有降脂及治療非酒精性脂肪性肝病的作用［6-10］。葛根可以降低食源性高脂血癥大鼠的血脂水平，降低脂質過氧化程度，提高機體的抗氧化能力，可防治動脈粥樣硬化和減少心腦血管疾病的發(fā)生，葛根素能有效降低大鼠血清中甘油三酯、膽固醇、低密度脂蛋白，而明顯升高HDL含量和HDL-C/TC比，具有明顯的降脂作用［11-13］。決明子中橙黃決明素具有降血脂活性，且其活性與普伐他汀相當［14-16］。荷葉具有降脂減肥、抗氧化及衰老、抗炎抑菌、鎮(zhèn)靜安神抗疲勞等藥理活性［17，18］。百合有助于改善亞健康人群的健康狀態(tài)［19，20］。

研究表明血清中TC、TG、LDL-C含量的升高和HDL-C含量的降低更容易誘發(fā)動脈粥樣硬化和心腦血管疾病，LDL-C是將肝臟合成的膽固醇轉運到全身組織的主要形式。試驗結果表明，五味祛脂顆粒能夠降低高血脂模型大鼠血清中TC、TG、LDL-C的含量，具有輔助降血脂作用，可為后續(xù)的開發(fā)和產業(yè)化應用提供一定的理論依據。

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網址: 五味祛脂顆粒輔助降血脂動物實驗研究 http://m.u1s5d6.cn/newsview1419126.html