1.本發(fā)明屬于化妝品技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種含西洋梨花提取物、茶多酚和肽類的抗氧化美白組合物及其制備方法。

背景技術(shù)：

2.皮膚的顏色深淺受多種因素調(diào)控，但主要取決于皮膚表皮層中黑色素的含量和分布，黑色素的生成過程包括多種酶催化及化學(xué)反應(yīng)，其中酪氨酸酶是黑色素合成的主要限速酶，其活性大小決定黑色素形成的數(shù)量。氧自由基激發(fā)的氧化損傷及酪氨酸酶活性增強(qiáng)誘導(dǎo)皮膚黑色素增多是主要因素。因?yàn)樵谧贤饩€、臭氧等外因的作用下，細(xì)胞遭受紫外線刺激，肌膚角質(zhì)細(xì)胞會(huì)自然分泌一種物質(zhì)-內(nèi)皮素，會(huì)導(dǎo)致黑色素細(xì)胞增殖，使酪氨酸酶活性增加，促進(jìn)黑色素生成，來保護(hù)皮膚免受紫外線、臭氧等外因損傷。盡管黑色素具有光保護(hù)作用，但當(dāng)黑色素過多和異常分布，是會(huì)造成黑色素過量沉著及產(chǎn)生斑塊而影響人的外貌形象，進(jìn)而影響到人的心理。
3.但目前我國(guó)化妝品市場(chǎng)上的美白劑幾乎都以抑制酪氨酸酶的活性為主。由于抑制機(jī)理單一，再加上活性物的滲透性不理想，應(yīng)用在產(chǎn)品上美白效果較差。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

4.本發(fā)明的目的在于提供一種含西洋梨花提取物、茶多酚和肽類的抗氧化美白組合物及其制備方法，為了克服現(xiàn)有的美白效果不佳的缺點(diǎn)，本發(fā)明針對(duì)氧自由基激發(fā)的氧化損傷及酪氨酸酶活性增強(qiáng)誘導(dǎo)皮膚黑色素增多的主要因素，制備出一種含西洋梨花提取物、茶多酚和肽類具有抗氧化美白組合物及其制備方法，能夠增強(qiáng)抗氧化清除自由基的能力，同時(shí)抑制酪氨酸酶的活性，減少黑色素的生成，提高美白的效果。本發(fā)明在西洋梨花提取物、茶多酚、肌肽和九肽-1的基礎(chǔ)上，復(fù)配凝血酸、熊果苷、煙酰胺、四氫甲基嘧啶羧酸，具有協(xié)同增效抗氧化美白的作用。
5.本發(fā)明的目的可以通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：
6.一種含西洋梨花提取物、茶多酚和肽類的抗氧化美白組合物，所述組合物包含以下重量百分比的組分：西洋梨花提取物溶液1-15％、茶多酚 1-5％、四氫甲基嘧啶羧酸0.1-7％、凝血酸0.5-3％、熊果苷0.2-5％、煙酰胺1-10％、丁二醇1-30％、肌肽0.1-5％、九肽-1溶液0.1-5％、乳糖酸0.1-2％、苯氧乙醇溶液0.5-5％、檸檬酸鈉0.1-2％、黃原膠0.01-0.5％、去離子水 13-94％。
7.西洋梨花提取物具有抗氧化作用，能清除羥基自由基和抑制脂質(zhì)過氧化。
8.茶多酚是一種抗氧化能力很強(qiáng)的天然抗氧劑，具有很強(qiáng)的供電子能力并能與皮膚內(nèi)的自由基結(jié)合轉(zhuǎn)化為隋性物質(zhì)，中止自由基的連鎖反應(yīng)，對(duì)自由基具有極強(qiáng)的清除功能。
9.肌肽被譽(yù)為“抗糖基化衛(wèi)士”，能在糖侵蝕肌膚前，通過與糖反應(yīng)的形式，代替體內(nèi)蛋白質(zhì)與糖反應(yīng)，從而幫助保護(hù)蛋白質(zhì)不被糖基化，達(dá)到抗糖化的作用。同時(shí)具有抗氧化特
性，是一種天然抗氧化劑，可清除在氧化應(yīng)激過程中使細(xì)胞膜的脂肪酸過度氧化而形成的活性氧自由基(ros)。九肽-1是天然促黑激素α-msh的仿生肽，抑制α-msh與受體的天然配體，防止酪氨酸酶激活，阻斷黑色素。
10.四氫甲基嘧啶羧酸具有獨(dú)特的高極性分子結(jié)構(gòu)，因此其水分子絡(luò)合能力較強(qiáng)，一分子四氫甲基嘧啶羧酸可絡(luò)合四、五個(gè)水分子，幫助高嗜鹽菌在吸入鹽水后將鹽分代謝出細(xì)胞外，同時(shí)在細(xì)胞和蛋白質(zhì)的周圍形成一層“水合殼”，類似一層穩(wěn)定的保護(hù)膜，來減少皮膚水分流失，同時(shí)防御紫外線損害。
11.凝血酸是一種絲氨酸蛋白酶抑制劑，能抑制蛋白酶對(duì)肽鍵水解的催化作用，從而阻止了如發(fā)炎性蛋白酶等酶的活性，進(jìn)而抑制了黑斑部位的表皮細(xì)胞機(jī)能的混亂，抑制黑色素增強(qiáng)因子群，徹底斷絕因紫外線照射而形成的黑色素發(fā)生的途徑。讓黑斑不再變濃、擴(kuò)大及增加，從而能有效地防止和改善皮膚的色素沉積。
12.熊果苷能有效地抑制皮膚中的生物酪氨酸酶活性，阻斷黑色素的形成, 通過自身與酪氨酶直接結(jié)合，加速黑色素的分解與排泄，從而減少皮膚色素沉積。
13.煙酰胺能抑制黑素小體從黑素細(xì)胞轉(zhuǎn)移到角質(zhì)形成細(xì)胞，減少黑素的皮膚沉著。
14.作為本發(fā)明的一種優(yōu)選技術(shù)方案，所述組合物包含以下重量百分比的組分：西洋梨花提取物溶液10-15％、茶多酚2-5％、四氫甲基嘧啶羧酸2-4％、凝血酸1-2％、熊果苷1-3％、煙酰胺3-5％、丁二醇6-15％、肌肽1-4％、九肽-1溶液2-5％、乳糖酸0.5-2％、苯氧乙醇溶液1-3％、檸檬酸鈉0.5-1.5％、黃原膠0.1-0.4％、去離子水30-65％。
15.作為本發(fā)明的一種優(yōu)選技術(shù)方案，所述所述西洋梨花提取物溶液由 69.4％的去離子水、20％的丁二醇、10％的西洋梨花提取物和0.6％的苯氧乙醇組成。
16.作為本發(fā)明的一種優(yōu)選技術(shù)方案，所述所述苯氧乙醇溶液由90％的苯氧乙醇和10％的乙基己基甘油組成。
17.作為本發(fā)明的一種優(yōu)選技術(shù)方案，所述九肽-1溶液由95％的去離子水、4.87％的1,2-己二醇、0.1％的九肽-1和0.03％的乙基己基甘油組成。
18.作為本發(fā)明的一種優(yōu)選技術(shù)方案，所述西洋梨花提取物的提取方法包括以下步驟：
19.取干燥的西洋梨花，粉碎后過60-100目篩，加入提取溶劑浸泡5-10h，然后超聲輔助萃取，去除不溶物后干燥得到西洋梨花提取物。
20.作為本發(fā)明的一種優(yōu)選技術(shù)方案，所述超聲輔助萃取的條件為：超聲功率400-500w，超聲輔助萃取溫度40-45℃，超聲輔助萃取時(shí)間為 10-30min，重復(fù)超聲3-5次。
21.上述含西洋梨花提取物、茶多酚和肽類的抗氧化美白組合物的制備方法包括以下步驟：
22.(1)將去離子水按照配方量加入至真空均質(zhì)罐中，然后將黃原膠按照配方量加入至真空均質(zhì)罐中，均質(zhì)攪拌，然后升溫至75～88℃，保溫 20-40min；
23.(2)降溫至55～70℃，將丁二醇和苯氧乙醇溶液按照配方量依次投入至真空均質(zhì)罐中，攪拌分散均勻；
24.(3)降溫至40～45℃，將西洋梨花提取物溶液、茶多酚、四氫甲基嘧啶羧酸、凝血酸、熊果苷、煙酰胺、肌肽、九肽-1溶液、檸檬酸鈉按照配方量依次投入至真空均質(zhì)罐中，攪拌分散均勻；
25.(4)攪拌均勻后，檢驗(yàn)ph值合格后出料。
26.優(yōu)選地，步驟(1)所述升溫是指升溫至80-85℃，所述保溫時(shí)間為 30min。
27.優(yōu)選地，步驟(2)所述降溫是指降溫至60-65℃。
28.本發(fā)明的有益效果：
29.(1)本發(fā)明含西洋梨花提取物、茶多酚和肽類的抗氧化美白組合物具有抗氧化美白的作用，西洋梨花提取物能夠清除羥基自由基和抑制脂質(zhì)過氧化；茶多酚具有很強(qiáng)的供電子能力并能與皮膚內(nèi)的自由基結(jié)合轉(zhuǎn)化為隋性物質(zhì)，中止自由基的連鎖反應(yīng)，對(duì)自由基具有極強(qiáng)的清除功能；肌肽可清除在氧化應(yīng)激過程中使細(xì)胞膜的脂肪酸過度氧化而形成的活性氧自由基(ros)，三者協(xié)同清除自由基對(duì)皮膚的損傷；
30.九肽-1是天然促黑激素α-msh的仿生肽，抑制α-msh與受體的天然配體，防止酪氨酸酶激活，阻斷黑色素；熊果苷能有效地抑制皮膚中的生物酪氨酸酶活性，阻斷黑色素的形成，通過自身與酪氨酶直接結(jié)合，加速黑色素的分解與排泄，從而減少皮膚色素沉積；凝血酸能抑制蛋白酶對(duì)肽鍵水解的催化作用，從而阻止了如發(fā)炎性蛋白酶等酶的活性，進(jìn)而抑制了黑斑部位的表皮細(xì)胞機(jī)能的混亂，抑制黑色素增強(qiáng)因子群，徹底斷絕因紫外線照射而形成的黑色素發(fā)生的途徑，三者協(xié)同抑制酪氨酸酶活性。
31.(2)本發(fā)明中的煙酰胺能抑制黑素小體從黑素細(xì)胞轉(zhuǎn)移到角質(zhì)形成細(xì)胞，減少黑素的皮膚沉著；四氫甲基嘧啶羧酸具有獨(dú)特的高極性分子結(jié)構(gòu)，因此其水分子絡(luò)合能力較強(qiáng)，一分子四氫甲基嘧啶羧酸可絡(luò)合四、五個(gè)水分子，幫助高嗜鹽菌在吸入鹽水后將鹽分代謝出細(xì)胞外，同時(shí)在細(xì)胞和蛋白質(zhì)的周圍形成一層“水合殼”，類似一層穩(wěn)定的保護(hù)膜，來減少皮膚水分流失，同時(shí)防御紫外線損害，二者進(jìn)一步配合西洋梨花提取物、茶多酚、肌肽、九肽-1、熊果苷、凝血酸一起提高抗氧化美白功效。
32.(3)本發(fā)明含西洋梨花提取物、茶多酚和肽類的組合物的制備方法，對(duì)其生產(chǎn)工藝步驟及參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化，步驟簡(jiǎn)易，易于制備。
具體實(shí)施方式
33.為更進(jìn)一步闡述本發(fā)明為實(shí)現(xiàn)預(yù)定發(fā)明目的所采取的技術(shù)手段及功效，以下結(jié)合實(shí)施例，對(duì)依據(jù)本發(fā)明的具體實(shí)施方式、結(jié)構(gòu)、特征及其功效，詳細(xì)說明如后。
34.實(shí)施例1
35.一種含西洋梨花提取物、茶多酚和肽類的抗氧化美白組合物，所述組合物包含以下重量百分比的組分：西洋梨花提取物溶液2％、茶多酚3％、四氫甲基嘧啶羧酸1％、凝血酸2％、熊果苷1％、煙酰胺5％、丁二醇20％、肌肽1％、九肽-1溶液2％、乳糖酸0.5％、苯氧乙醇溶液2.5％、檸檬酸鈉 0.5％、黃原膠0.1％、去離子水59.4％。
36.所述所述西洋梨花提取物溶液由69.4％的去離子水、20％的丁二醇、 10％的西洋梨花提取物和0.6％的苯氧乙醇組成。
37.所述所述苯氧乙醇溶液由90％的苯氧乙醇和10％的乙基己基甘油組成。
38.所述九肽-1溶液由95％的去離子水、4.87％的1,2-己二醇、0.1％的九肽-1和0.03％的乙基己基甘油組成。
39.所述西洋梨花提取物的提取方法包括以下步驟：
40.取干燥的西洋梨花，粉碎后過80目篩，加入提取溶劑浸泡6h，然后在450w功率下和
42℃溫度下超聲輔助萃取20min，重復(fù)萃取5次，去除不溶物后干燥得到西洋梨花提取物。
41.上述含西洋梨花提取物、茶多酚和肽類的抗氧化美白組合物的制備方法包括以下步驟：
42.(1)將去離子水按照配方量加入至真空均質(zhì)罐中，然后將黃原膠按照配方量加入至真空均質(zhì)罐中，均質(zhì)攪拌，然后升溫至78℃，保溫25min；
43.(2)降溫至60℃，將丁二醇和苯氧乙醇溶液按照配方量依次投入至真空均質(zhì)罐中，攪拌分散均勻；
44.(3)降溫至45℃，將西洋梨花提取物溶液、茶多酚、四氫甲基嘧啶羧酸、凝血酸、熊果苷、煙酰胺、肌肽、九肽-1溶液、檸檬酸鈉按照配方量依次投入至真空均質(zhì)罐中，攪拌分散均勻；
45.(4)攪拌均勻后，檢驗(yàn)ph值合格后出料。
46.實(shí)施例2
47.一種含西洋梨花提取物、茶多酚和肽類的抗氧化美白組合物，所述組合物包含以下重量百分比的組分：西洋梨花提取物溶液5％、茶多酚4％、四氫甲基嘧啶羧酸1％、凝血酸2％、熊果苷2％、煙酰胺5％、丁二醇20％、肌肽1％、九肽-1溶液3％、乳糖酸1％、苯氧乙醇溶液2.5％、檸檬酸鈉 0.5％、黃原膠0.1％、去離子水52.9％。
48.所述所述西洋梨花提取物溶液由69.4％的去離子水、20％的丁二醇、 10％的西洋梨花提取物和0.6％的苯氧乙醇組成。
49.所述所述苯氧乙醇溶液由90％的苯氧乙醇和10％的乙基己基甘油組成。
50.所述九肽-1溶液由95％的去離子水、4.87％的1,2-己二醇、0.1％的九肽-1和0.03％的乙基己基甘油組成。
51.所述西洋梨花提取物的提取方法包括以下步驟：
52.取干燥的西洋梨花，粉碎后過100目篩，加入提取溶劑浸泡5h，然后在500w功率下和40℃溫度下超聲輔助萃取20min，重復(fù)萃取4次，去除不溶物后干燥得到西洋梨花提取物。
53.上述含西洋梨花提取物、茶多酚和肽類的抗氧化美白組合物的制備方法包括以下步驟：
54.(1)將去離子水按照配方量加入至真空均質(zhì)罐中，然后將黃原膠按照配方量加入至真空均質(zhì)罐中，均質(zhì)攪拌，然后升溫至80℃，保溫30min；
55.(2)降溫至65℃，將丁二醇和苯氧乙醇溶液按照配方量依次投入至真空均質(zhì)罐中，攪拌分散均勻；
56.(3)降溫至40℃，將西洋梨花提取物溶液、茶多酚、四氫甲基嘧啶羧酸、凝血酸、熊果苷、煙酰胺、肌肽、九肽-1溶液、檸檬酸鈉按照配方量依次投入至真空均質(zhì)罐中，攪拌分散均勻；
57.(4)攪拌均勻后，檢驗(yàn)ph值合格后出料。
58.實(shí)施例3
59.一種含西洋梨花提取物、茶多酚和肽類的抗氧化美白組合物，所述組合物包含以下重量百分比的組分：西洋梨花提取物溶液8％、茶多酚3％、四氫甲基嘧啶羧酸2％、凝血酸2％、熊果苷2％、煙酰胺6％、丁二醇20％、肌肽2％、九肽-1溶液2％、乳糖酸1％、苯氧乙醇溶液3％、檸檬酸鈉1％、黃原膠0.2％、去離子水47.8％。
60.所述所述西洋梨花提取物溶液由69.4％的去離子水、20％的丁二醇、 10％的西洋梨花提取物和0.6％的苯氧乙醇組成。
61.所述所述苯氧乙醇溶液由90％的苯氧乙醇和10％的乙基己基甘油組成。
62.所述九肽-1溶液由95％的去離子水、4.87％的1,2-己二醇、0.1％的九肽-1和0.03％的乙基己基甘油組成。
63.所述西洋梨花提取物的提取方法包括以下步驟：
64.取干燥的西洋梨花，粉碎后過100目篩，加入提取溶劑浸泡8h，然后在450w功率下和45℃溫度下超聲輔助萃取20min，重復(fù)萃取3次，去除不溶物后干燥得到西洋梨花提取物。
65.上述含西洋梨花提取物、茶多酚和肽類的抗氧化美白組合物的制備方法包括以下步驟：
66.(1)將去離子水按照配方量加入至真空均質(zhì)罐中，然后將黃原膠按照配方量加入至真空均質(zhì)罐中，均質(zhì)攪拌，然后升溫至85℃，保溫30min；
67.(2)降溫至65℃，將丁二醇和苯氧乙醇溶液按照配方量依次投入至真空均質(zhì)罐中，攪拌分散均勻；
68.(3)降溫至40℃，將西洋梨花提取物溶液、茶多酚、四氫甲基嘧啶羧酸、凝血酸、熊果苷、煙酰胺、肌肽、九肽-1溶液、檸檬酸鈉按照配方量依次投入至真空均質(zhì)罐中，攪拌分散均勻；
69.(4)攪拌均勻后，檢驗(yàn)ph值合格后出料。
70.實(shí)施例4
71.一種含西洋梨花提取物、茶多酚和肽類的抗氧化美白組合物，所述組合物包含以下重量百分比的組分：西洋梨花提取物溶液11％、茶多酚3％、四氫甲基嘧啶羧酸2％、凝血酸1％、熊果苷1％、煙酰胺3％、丁二醇8％、肌肽1％、九肽-1溶液3％、乳糖酸0.5％、苯氧乙醇溶液1％、檸檬酸鈉 0.5％、黃原膠0.3％、去離子水64.7％。
72.所述所述西洋梨花提取物溶液由69.4％的去離子水、20％的丁二醇、 10％的西洋梨花提取物和0.6％的苯氧乙醇組成。
73.所述所述苯氧乙醇溶液由90％的苯氧乙醇和10％的乙基己基甘油組成。
74.所述九肽-1溶液由95％的去離子水、4.87％的1,2-己二醇、0.1％的九肽-1和0.03％的乙基己基甘油組成。
75.所述西洋梨花提取物的提取方法包括以下步驟：
76.取干燥的西洋梨花，粉碎后過60目篩，加入提取溶劑浸泡6h，然后在400w功率下和45℃溫度下超聲輔助萃取28min，重復(fù)萃取4次，去除不溶物后干燥得到西洋梨花提取物。
77.上述含西洋梨花提取物、茶多酚和肽類的抗氧化美白組合物的制備方法包括以下步驟：
78.(1)將去離子水按照配方量加入至真空均質(zhì)罐中，然后將黃原膠按照配方量加入至真空均質(zhì)罐中，均質(zhì)攪拌，然后升溫至82℃，保溫30min；
79.(2)降溫至60℃，將丁二醇和苯氧乙醇溶液按照配方量依次投入至真空均質(zhì)罐中，攪拌分散均勻；
80.(3)降溫至45℃，將西洋梨花提取物溶液、茶多酚、四氫甲基嘧啶羧酸、凝血酸、熊果苷、煙酰胺、肌肽、九肽-1溶液、檸檬酸鈉按照配方量依次投入至真空均質(zhì)罐中，攪拌分散
均勻；
81.(4)攪拌均勻后，檢驗(yàn)ph值合格后出料。
82.實(shí)施例5
83.一種含西洋梨花提取物、茶多酚和肽類的抗氧化美白組合物，所述組合物包含以下重量百分比的組分：西洋梨花提取物溶液15％、茶多酚5％、四氫甲基嘧啶羧酸4％、凝血酸2％、熊果苷3％、煙酰胺5％、丁二醇15％、肌肽3％、九肽-1溶液5％、乳糖酸2％、苯氧乙醇溶液2％、檸檬酸鈉1.5％、黃原膠0.3％、去離子水37.2％。
84.所述所述西洋梨花提取物溶液由69.4％的去離子水、20％的丁二醇、 10％的西洋梨花提取物和0.6％的苯氧乙醇組成。
85.所述所述苯氧乙醇溶液由90％的苯氧乙醇和10％的乙基己基甘油組成。
86.所述九肽-1溶液由95％的去離子水、4.87％的1,2-己二醇、0.1％的九肽-1和0.03％的乙基己基甘油組成。
87.所述西洋梨花提取物的提取方法包括以下步驟：
88.取干燥的西洋梨花，粉碎后過80目篩，加入提取溶劑浸泡10h，然后在500w功率下和40℃溫度下超聲輔助萃取15min，重復(fù)萃取5次，去除不溶物后干燥得到西洋梨花提取物。
89.上述含西洋梨花提取物、茶多酚和肽類的抗氧化美白組合物的制備方法包括以下步驟：
90.(1)將去離子水按照配方量加入至真空均質(zhì)罐中，然后將黃原膠按照配方量加入至真空均質(zhì)罐中，均質(zhì)攪拌，然后升溫至85℃，保溫30min；
91.(2)降溫至62℃，將丁二醇和苯氧乙醇溶液按照配方量依次投入至真空均質(zhì)罐中，攪拌分散均勻；
92.(3)降溫至40℃，將西洋梨花提取物溶液、茶多酚、四氫甲基嘧啶羧酸、凝血酸、熊果苷、煙酰胺、肌肽、九肽-1溶液、檸檬酸鈉按照配方量依次投入至真空均質(zhì)罐中，攪拌分散均勻；
93.(4)攪拌均勻后，檢驗(yàn)ph值合格后出料。
94.對(duì)比例1
95.在實(shí)施例1基礎(chǔ)上，去掉西洋梨花提取物溶液，用等重量的茶多酚替代。
96.對(duì)比例2
97.在實(shí)施例1基礎(chǔ)上，去掉茶多酚，用等重量的肌肽替代。
98.對(duì)比例3
99.在實(shí)施例1基礎(chǔ)上，去掉肌肽，用等重量的西洋梨花提取物溶液替代。
100.對(duì)比例4
101.在實(shí)施例1基礎(chǔ)上，去掉九肽-1溶液，用等重量的熊果苷替代。
102.對(duì)比例5
103.在實(shí)施例1基礎(chǔ)上，去掉熊果苷，用等重量的凝血酸替代。
104.對(duì)比例6
105.在實(shí)施例1基礎(chǔ)上，去掉凝血酸，用等重量的九肽-1溶液替代。
106.對(duì)比例7
107.在實(shí)施例1基礎(chǔ)上，去掉四氫甲基嘧啶羧酸，用等重量的煙酰胺替代。
108.對(duì)比例8
109.在實(shí)施例1基礎(chǔ)上，去掉煙酰胺，用等重量的四氫甲基嘧啶羧酸替代。
110.性能測(cè)試
111.1.抗氧化dpph自由基清除試驗(yàn)
112.試驗(yàn)材料：實(shí)施例1～5和對(duì)比例1～8制得的抗氧化美白組合物。
113.試驗(yàn)方法：將4ml濃度為6
×
10-5
mol/l的dpph溶液分別加入4ml 實(shí)施例1～5以及對(duì)比例1～8制備的抗氧化美白組合物中，充分混合均勻，立即在518nm下測(cè)試吸光度值記為ai，然后置于室溫避光靜置30min后，測(cè)定吸光度值記為aj，最后測(cè)定只添加dpph溶液的吸光度值記為ac，按以下公式計(jì)算dpph自由基的清除率：清除率＝[1-(ai-aj)/ac]
×
100％；試驗(yàn)結(jié)果如表1所示。
[0114]
表1 dpph自由基清除率
[0115]
組別dpph自由基清除率(％)實(shí)施例178.98實(shí)施例279.61實(shí)施例380.18實(shí)施例481.64實(shí)施例582.19對(duì)比例151.64對(duì)比例250.18對(duì)比例351.23對(duì)比例477.64對(duì)比例578.16對(duì)比例678.06對(duì)比例778.31對(duì)比例878.64由表1測(cè)試結(jié)果可知，與實(shí)施例1相比，對(duì)比例1-3分別去掉了西洋梨花提取物溶液、茶多酚和肌肽，其抗氧化美白組合物的dpph自由基清除率明顯降低。
[0117]
2.酪氨酸酶活性抑制試驗(yàn)
[0118]
試驗(yàn)材料：實(shí)施例1～5和對(duì)比例1～8制得的抗氧化美白組合物。
[0119]
試驗(yàn)方法：參考相關(guān)文獻(xiàn)(王白強(qiáng).皮膚黑素成因分析與美白祛斑功效評(píng)價(jià)體系的研究〔j〕.化學(xué)工程與裝備，2008，(02)：14-18.〔2017-09-29〕.) 配制各組反應(yīng)液，37℃恒溫水浴，將酪氨酸酶加入至酪氨酸溶液中，通過酶標(biāo)儀(multiskanfc，thermo)測(cè)定溶液濃度為1.0％抗氧化美白組合物在475nm處的吸光度，得到的酪氨酸酶活性抑制率如下表2所示。
[0120]
表2酪氨酸酶活性抑制率
[0121][0122][0123]
由表2測(cè)試結(jié)果可知，與實(shí)施例1相比，對(duì)比例4-6分別去掉了九肽
??
1溶液、熊果苷和凝血酸，其抗氧化美白組合物的酪氨酸酶活性抑制率均明顯降低。
[0124]
3.小鼠模型評(píng)價(jià)
[0125]
測(cè)試樣品：以實(shí)施例1-5和對(duì)比例1-8制備的抗氧化美白組合物為實(shí)驗(yàn)組，以左旋維生素c為陽性對(duì)照組。
[0126]
測(cè)試方法：
[0127]
(1)6周齡雄性icr小鼠150只，在正常溫度下(23
±
2℃)濕度(55％
±
10％)和光照(12小時(shí)光照/12小時(shí)黑暗，無紫外線照射)喂養(yǎng)一周；
[0128]
(2)在小鼠的背部剃出超過2cmx2cm的脫毛區(qū)，使用色差儀測(cè)量脫毛區(qū)的皮膚白度值，記為w0，隨后進(jìn)行紫外照射，照射強(qiáng)度為2mw/cm2，照射時(shí)間15min，連續(xù)照射7天；
[0129]
(3)7天后使用色差儀測(cè)量脫毛區(qū)的皮膚白度值，記為w1，如果數(shù)值比未照射前數(shù)值w0降低20表明造模成功；
[0130]
(4)將icr小鼠分為15組，每組各10只，第1-13組為實(shí)驗(yàn)組，分別涂抹實(shí)施例1-5和對(duì)比例1-8制備得到的抗氧化美白組合物，第14組為陽性對(duì)照組，涂抹左旋維生素c，第15組為空白組，不進(jìn)行任何涂抹處理；
[0131]
(5)各組小鼠每天涂抹1次，連續(xù)涂抹4周，4周后用色差儀測(cè)定小鼠脫毛區(qū)的皮膚白度值，記為w2；
[0132]
(6)計(jì)算公式：白度增長(zhǎng)率＝(w2-w1)/w1*100％；小鼠皮膚白度測(cè)試結(jié)果如下表3所示。
[0133]
表3小鼠皮膚白度測(cè)試結(jié)果
[0134]
[0135][0136]
由表3測(cè)試結(jié)果可知，與實(shí)施例1相比，對(duì)比例1-3分別去掉了西洋梨花提取物溶液、茶多酚和肌肽，其抗氧化美白組合物的dpph自由基清除率明顯降低，因此小鼠皮膚白度增長(zhǎng)率也明顯降低；與實(shí)施例1相比，對(duì)比例4-6分別去掉了九肽-1溶液、熊果苷和凝血酸，其抗氧化美白組合物的酪氨酸酶活性抑制率均明顯降低，因此，小鼠皮膚白度增長(zhǎng)率也明顯降低；與實(shí)施例1相比，對(duì)比例7去掉了四氫甲基嘧啶羧酸，對(duì)比例8去掉了煙酰胺，小鼠皮膚白度增長(zhǎng)率也進(jìn)一步降低。
[0137]
4.皮膚的美白評(píng)價(jià)
[0138]
測(cè)試樣品：以實(shí)施例1-5和對(duì)比例1-8制備的抗氧化美白組合物為實(shí)驗(yàn)組，設(shè)置1個(gè)空白對(duì)照組。
[0139]
實(shí)驗(yàn)方法：
[0140]
(1)選取140名健康女性，年齡25-40歲；面部有輕度皮膚老化表現(xiàn)(干燥、細(xì)紋、彈性下降和皺紋等)，分成14組，每組10人；
[0141]
(2)1-9組的受試者在潔面后，分別取實(shí)施例1-5和對(duì)比例1-8制備的抗氧化美白組合物適量(1～2ml)涂抹臉部，每日早晚各用1次，持續(xù)6周，第10組的受試者不涂抹任何護(hù)膚品作為空白對(duì)照組；
[0142]
(3)在使用后0周、3周、6周進(jìn)行測(cè)試，測(cè)試前受試者清洗面部，安靜休息30min；
[0143]
(4)使用皮膚黑色素測(cè)試儀mx18測(cè)量每位受試者右頰部最高點(diǎn)，采用點(diǎn)觸式測(cè)量，測(cè)3次取平均值，得到的受試者臉頰黑色素含量測(cè)試結(jié)果如下表4所示。
[0144]
表4受試者臉頰黑色素含量的測(cè)試結(jié)果
[0145]
組別第0周黑色素含量第3周黑色素含量第6周黑色素含量實(shí)施例1184.26
±
2.11165.89
±
0.48121.37
±
1.14實(shí)施例2182.67
±
1.32163.15
±
1.19120.34
±
2.67實(shí)施例3183.07
±
2.04162.18
±
0.95119.67
±
0.59實(shí)施例4182.49
±
1.07161.37
±
1.34119.07
±
1.26實(shí)施例5183.24
±
0.89160.04
±
1.67118.87
±
1.48對(duì)比例1181.98
±
2.17174.62
±
0.57159.48
±
2.01對(duì)比例2182.34
±
1.34175.89
±
1.04159.89
±
0.38對(duì)比例3182.67
±
1.26174.29
±
1.45159.27
±
1.37對(duì)比例4181.96
±
0.67176.88
±
0.67160.27
±
1.17
對(duì)比例5182.16
±
2.11176.18
±
1.08160.07
±
1.12對(duì)比例6183.07
±
0.56175.99
±
0.28159.87
±
0.29對(duì)比例7182.49
±
1.14175.98
±
0.48159.48
±
1.34對(duì)比例8182.67
±
0.99175.64
±
1.04159.14
±
0.37空白對(duì)照組183.04
±
1.33181.48
±
0.25182.37
±
1.48
[0146]
由表4測(cè)試結(jié)果可知，實(shí)施例1-5的抗氧化美白組合物能夠使受試者臉頰黑色素含量在6周時(shí)明顯降低，而受試者在使用對(duì)比例1-8的抗氧化美白組合物6周時(shí)，其臉頰黑色素含量降低程度較少。
[0147]
以上所述，僅是本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，并非對(duì)本發(fā)明作任何形式上的限制，雖然本發(fā)明已以較佳實(shí)施例揭示如上，然而并非用以限定本發(fā)明，任何本領(lǐng)域技術(shù)人員，在不脫離本發(fā)明技術(shù)方案范圍內(nèi)，當(dāng)可利用上述揭示的技術(shù)內(nèi)容做出些許更動(dòng)或修飾為等同變化的等效實(shí)施例，但凡是未脫離本發(fā)明技術(shù)方案內(nèi)容，依據(jù)本發(fā)明的技術(shù)實(shí)質(zhì)對(duì)以上實(shí)施例所作的任何簡(jiǎn)介修改、等同變化與修飾，均仍屬于本發(fā)明技術(shù)方案的范圍內(nèi)。

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