由于免疫缺陷病涉及細(xì)胞免疫、體液免疫、吞噬功能和補(bǔ)體系統(tǒng)等多方面的原因，因此其檢測(cè)方法也是多方面、綜合性的；有體內(nèi)試驗(yàn)，也有體外試驗(yàn)；有功能試驗(yàn)，也有細(xì)胞表面標(biāo)志的檢查。

　　一、淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)和外周血像檢查

　　淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)可采用直接計(jì)數(shù)或百分比法，這是最簡(jiǎn)便而直接的免疫缺陷檢查。成人外周血淋巴細(xì)胞的正常值為1.5×109～3×109/l，小兒略高于成人。不論什么年齡，如低于1.2×109/l應(yīng)考慮為細(xì)胞免疫缺陷病。

　　原發(fā)性免疫缺陷常同時(shí)伴有不同程度的貧血、中性粒細(xì)胞和血小板減少，這可能與出現(xiàn)自身抗體有關(guān)。在免疫缺陷病患者可查出抗紅細(xì)胞抗體、抗粒細(xì)胞抗體和抗血小板抗體。t細(xì)胞免疫缺陷病可合并嗜酸性粒細(xì)胞增高或單核細(xì)胞增多癥，偶見(jiàn)血小板增多癥。

　　二、活體組織檢查

　　1．骨髓檢查骨髓檢查對(duì)分析各期中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞的增生和發(fā)育狀況有一定的意義。重癥聯(lián)合免疫缺陷病或網(wǎng)狀組織發(fā)育不全患者，骨髓中的淋巴細(xì)胞及漿細(xì)胞均顯著減少，后者伴有中性粒細(xì)胞減少。bruton綜合征骨髓中很難找到漿細(xì)胞（正常人漿細(xì)胞占有核細(xì)胞的1％～2％，5歲以下的嬰幼兒也極少見(jiàn)到漿細(xì)胞）。

　　2．淋巴結(jié)活檢淋巴結(jié)活檢是免疫缺陷病的常規(guī)檢查方法，屬于病理學(xué)檢查。根據(jù)淋巴細(xì)胞數(shù)量和分布情況，可獲得診斷。并可用疫苗作淋巴結(jié)局部免疫接種，觀察有無(wú)局部淋巴細(xì)胞的增殖反應(yīng)，對(duì)t細(xì)胞和b細(xì)胞缺陷的診斷有幫助。

　　3．直腸粘膜活檢正常情況下出生一個(gè)月后可見(jiàn)到直腸粘膜下固有層中有豐富的漿細(xì)胞，用熒光抗體檢查則見(jiàn)到大量iga類(lèi)的抗體分泌細(xì)胞。在體液免疫缺陷及聯(lián)合免疫缺陷病患者，該區(qū)漿細(xì)胞顯著減少，甚至缺如。

　　三、t細(xì)胞免疫缺陷病的檢查

　?。ㄒ唬w內(nèi)試驗(yàn)

　　皮膚試驗(yàn)顯示有遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)能力，就有力地證明受檢者細(xì)胞介導(dǎo)免疫能力是完善的。

　　皮膚試驗(yàn)常用的抗原是易于在自然環(huán)境中接觸而致敏的那些抗原物質(zhì)，包括白色念珠菌素、鏈激酶－鏈道酶（sk-sd雙鏈酶）、結(jié)核菌素、毛發(fā)癬菌素和腮腺炎病毒等5種抗原。由于個(gè)體的差異，接觸某種抗原的有無(wú)或多少，試劑本身的質(zhì)量和操作誤差等，應(yīng)該數(shù)種抗原同時(shí)試驗(yàn)（至少2～3種），凡是3種以上抗原皮試陽(yáng)性者為正常，如少于2種陽(yáng)性或在48h后應(yīng)直徑小于10mm，則提示免疫缺陷或反應(yīng)性降低。

　　由于小兒天然致敏不充分，因此用以上5種抗原評(píng)價(jià)小兒的免疫功能并不合適，必須人為地造成抗原致敏。常用的人工致敏抗原有二硝基氯苯（dncb）和鑰孔蝛血藍(lán)素（klh）。90％以上的健康人為陽(yáng)性反應(yīng)。但dncb為終生致敏，且對(duì)患兒有皮膚灼傷，因此應(yīng)慎用。

　?。ǘ﹖細(xì)胞表面標(biāo)志檢查

　　1．e受體檢查e受體（cd2）為t細(xì)胞表面的特有標(biāo)志，因此用e花環(huán)形成試驗(yàn)的結(jié)果可代表t細(xì)胞數(shù)量的變化，并可粗略地判定有無(wú)t細(xì)胞免疫缺陷或聯(lián)合免疫缺陷病?；ōh(huán)形成試驗(yàn)由于受許多因素干擾，加之無(wú)標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照，因而對(duì)輕微的t細(xì)胞動(dòng)態(tài)變化較難判定，現(xiàn)多改用cd2測(cè)定代替繁鎖的e花環(huán)試驗(yàn)。胸腺發(fā)育不全（digeorge綜合征）、重癥聯(lián)合缺陷病、共濟(jì)失調(diào)性毛細(xì)血管擴(kuò)張癥和wiskott-aldrich綜合征等皆可出現(xiàn)外周血e受體陽(yáng)性細(xì)胞減少，一般可減少正常值的1/2～2/3。有的病例t細(xì)胞雖有其他標(biāo)志，但不能形成e花環(huán)，這表明t細(xì)胞分化成熟不完善，例如在wiskott-aldrich綜合征患者。

　　2．t細(xì)胞及其亞群檢查應(yīng)用cd系統(tǒng)單克隆抗體，使用熒光抗體技術(shù)或流式細(xì)胞儀進(jìn)行測(cè)定，不但可以檢查t細(xì)胞總數(shù)，而且可以檢查其亞群；不但能用于細(xì)胞免疫缺陷病的診斷，還可研究其發(fā)病機(jī)制。最常檢測(cè)的cd標(biāo)志有cd3、cd4、cd8、cd14、cd16、cd19、cd45、cd56等。漿其適當(dāng)配合可明確各類(lèi)淋巴細(xì)胞及主要亞群的變化情況。

　　淋巴細(xì)胞及其亞群的檢測(cè)對(duì)缺陷病的診斷具有重要價(jià)值：t和b細(xì)胞都缺乏提示聯(lián)合免疫缺陷；以t細(xì)胞減少為主者提示細(xì)胞免疫缺陷，伴有不同程度的體液免疫缺陷；以b細(xì)胞減少為主者提示體液免疫缺陷，一般對(duì)細(xì)胞介導(dǎo)免疫影響不大。以上情況可對(duì)大多數(shù)免疫缺陷病有一個(gè)大致的判斷（表27-7），個(gè)別情況下可進(jìn)一步測(cè)定cd4/cd8比值或檢查淋巴細(xì)胞表面的tcr等特殊標(biāo)志。

　　表27-7 部分cd標(biāo)志對(duì)免疫缺陷病類(lèi)型判斷的意義

　　cd陽(yáng)性細(xì)胞變化
 　　受累細(xì)胞及程度
 　　相應(yīng)疾病
 　　跟蹤cd測(cè)定
　　t
 　　b

 　　1.cd3,cd19減少 ＋＋＋
 　?。?
 　　各種類(lèi)型scid  
　　2.cd3減少,cd19正常或稍低 ＋＋＋
   　　x-連鎖scid  
　?。?
 　　  pnp缺乏  
　　＋
   　　毛細(xì)血管共濟(jì)失調(diào) cd3/tcr
　?。?
  　　 digeorge綜合征 cd3/tcr,cd3/cd2
　?。?
 　　＋
 　　wiskott-aldrihc cd3/cd43
  　?。?
 　　  cd7缺乏 cd3/cd7
　　3.cd3正常,cd19稍低，伴ig降低   ＋＋＋
 　　bruton綜合征 cd4/cd45ra
 　　 ＋
 　　不同變異型ig缺陷 cd20/ileu8
　　4.cd3和cd19正?；蚪咏?nbsp;    mhcⅱ類(lèi)分子缺陷 cd20/hla-d
    　　白細(xì)胞粘附分子缺陷,cd8細(xì)胞減少 cd45/cd16

　　（三）t細(xì)胞體外功能試驗(yàn)

　　一般使用pha刺激淋巴細(xì)胞的增殖反應(yīng)。絕對(duì)或相對(duì)缺乏正常t細(xì)胞的患者或帶有干擾刺激作用的血清因子的患者，其刺激指數(shù)都降低。如t細(xì)胞總數(shù)無(wú)明顯減少而刺激指數(shù)降低，則表明t細(xì)胞群體相對(duì)不夠成熟。有些患者，如變異型免疫缺陷病患者，需要較大的pha量才能刺激t細(xì)胞增殖。新生兒出生不久即表現(xiàn)出對(duì)pha的反應(yīng)性，因而出生后一周若出現(xiàn)pha刺激反應(yīng)，即可排除嚴(yán)重細(xì)胞免疫缺陷的可能。

　　四、b細(xì)胞免疫缺陷病的檢查

　　1．血清免疫球蛋白測(cè)定由于免疫球蛋白總量的生理范圍較寬，各種檢測(cè)方法測(cè)得的數(shù)值差異較大，因而判定體液免疫缺陷時(shí)應(yīng)作反復(fù)檢查。測(cè)定免疫球蛋白的方法很多，如單向免疫擴(kuò)散、火箭電泳和免疫濁度法等。對(duì)于igd和ige則應(yīng)用ria或elisa等技術(shù)。免疫球蛋白缺陷主要有兩種：一為所有免疫球蛋白都減少，例如swiss型scid、nezelof綜合征、bruton綜合征等，igg、iga、igm和ige含量均減少，igd可正?；蛏杂猩?，igg水平通常低于100mg/dl；在變異型抗體缺陷癥（b細(xì)胞內(nèi)在缺損或免疫失調(diào)導(dǎo)致的原發(fā)性免疫缺陷?。雰簳簳r(shí)性丙種球蛋白缺乏癥等，免疫球蛋白低下的程度略輕，一般igg在100～500mg/dl之間。二是選擇性免疫球蛋白缺陷，只有一類(lèi)或幾個(gè)亞類(lèi)的免疫球蛋白缺陷，最常見(jiàn)的是選擇性iga缺陷，患者血清中iga＜5mg/dl，外分泌液中測(cè)不出iga，血清igg和igm則正?；蚱?。體液免疫缺陷的類(lèi)型及ig變化則見(jiàn)表27-2。

　　判斷體液免疫缺陷病時(shí)要注意以下幾個(gè)問(wèn)題：①患者多為嬰兒，應(yīng)該注意其生理水平及變化規(guī)律；②對(duì)成人的選擇性免疫球蛋白缺乏癥，應(yīng)注意與惡性單克隆丙種球蛋白病相區(qū)別；③免疫球蛋白生理范圍寬，測(cè)定誤差大，對(duì)于免疫球蛋白水平低于正常值下限者，應(yīng)在數(shù)周內(nèi)經(jīng)多次測(cè)定無(wú)大變化才能確定體液免疫缺陷的診斷。

　　2．免疫球蛋白亞類(lèi)測(cè)定為了確定體液免疫缺陷的類(lèi)型，有時(shí)需要做免疫球蛋白亞類(lèi)的測(cè)定。目前多采用免疫電泳方法，用各亞類(lèi)單克隆抗體進(jìn)行測(cè)定，主要對(duì)選擇性igg亞類(lèi)缺乏癥的診斷有用。

　　3．血型同族凝集素測(cè)定abo血型抗體不是先天產(chǎn)生的，而是出生后對(duì)a物質(zhì)和b物質(zhì)抗體應(yīng)答的結(jié)果，因此檢測(cè)同族凝集素是判定體液應(yīng)答能力的簡(jiǎn)單而有效的方法。正常6個(gè)月的嬰兒，抗a抗體效價(jià)＞1:8，抗b抗體＞1:4；1歲之后，抗a為1:16，抗b為1:8。這種所謂的天然抗體屬于igm，對(duì)bruton癥、scid和選擇性igm缺陷癥，皆可用此法進(jìn)行判定。但是ab血型者正常情況下也不產(chǎn)生抗a和抗b抗體，因此其體液免疫缺陷不能用同族凝集素檢測(cè)進(jìn)行判定。

　　4．特異性抗體產(chǎn)生功能測(cè)定正常人接種疫苗或菌苗后5～7天可產(chǎn)生特異性抗體（igm），如再次免疫會(huì)使抗體效價(jià)更高（igg）。因此在接種疫苗后檢測(cè)抗體產(chǎn)生情況也是判斷體液免疫缺陷的一種有效方法。常用的抗原為傷寒疫苗和白喉類(lèi)毒素，前者可用直接凝集反應(yīng)來(lái)測(cè)定抗體產(chǎn)生，后者可在接種后4周做錫克試驗(yàn)。

　　5．抗iga抗體測(cè)定選擇性iga缺陷的患者體內(nèi)存在一種抗iga自身抗體（很可能是致病原因），檢測(cè)這種抗體可以作為該病的診斷依據(jù)之一。測(cè)定方法是用間接血凝技術(shù)，患者效價(jià)可在1:10以上，而正常人無(wú)此抗體。

　　6．吞噬體試驗(yàn)觀察人體清除噬菌體的能力被認(rèn)為是目前檢測(cè)抗體應(yīng)答能力的最敏感技術(shù)之一。正常人甚至新生兒，均可在注入噬菌體后4～5天內(nèi)將其全部清除；而在抗體形成缺陷者，清除噬菌體的時(shí)間顯著延遲。

　　7．b細(xì)胞表面免疫球蛋白檢測(cè)檢測(cè)smig不但可以測(cè)算b細(xì)胞的數(shù)量，還可根據(jù)smig的類(lèi)別確定b細(xì)胞的成熟期。所有體液免疫缺陷患者皆有一定程度的b細(xì)胞數(shù)量或成熟比例方面的異常。

　　8．cd抗原檢測(cè)用cd9、cd10和cd19作為b細(xì)胞標(biāo)志也可檢測(cè)b細(xì)胞免疫缺陷病。

　　值得注意的是，t細(xì)胞缺陷、單核－巨噬細(xì)胞缺陷也多伴有不同程度的抗體產(chǎn)生缺陷，并且還可能癥狀比較突出而被先行發(fā)現(xiàn)，所以在檢查時(shí)不要只局限于抗體測(cè)定。

　　五、吞噬細(xì)胞免疫缺陷病的檢查

　　吞噬細(xì)胞指單核巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞兩大類(lèi)，其缺陷表現(xiàn)為趨化性減弱或喪失，例如懶白細(xì)胞病；調(diào)理、吞噬和殺傷功能減弱或喪失，例如慢性肉芽腫病等。檢測(cè)吞噬細(xì)胞免疫缺陷有如下幾種方法：

　　1．rebuck皮窗試驗(yàn)這是一種體內(nèi)試驗(yàn)，用手術(shù)刀擦破表皮，蓋上蓋玻片。2小時(shí)出現(xiàn)大量的中性粒細(xì)胞為正常趨化性，如減慢或減弱說(shuō)明趨化性的缺陷或損傷。該技術(shù)簡(jiǎn)便，對(duì)于估價(jià)吞噬細(xì)胞的趨化性是一種較好的方法，對(duì)于懶白細(xì)胞病、家族性白細(xì)胞趨化缺陷癥等皆有診斷價(jià)值。

　　2．boyden趨化試驗(yàn)利用微孔膜將趨化因子和白細(xì)胞隔開(kāi)，一段時(shí)間后檢查陷于膜中的細(xì)胞數(shù)。其意義與rebuck皮窗試驗(yàn)相同。

　　3．吞噬和殺傷試驗(yàn)這是經(jīng)典的免疫學(xué)試驗(yàn)，主要測(cè)定白細(xì)胞有無(wú)殺菌功能。慢性肉芽腫病患者由于吞噬細(xì)胞缺少過(guò)氧化酶而無(wú)法殺菌，而該病的變種則由于缺乏6-磷酸葡萄糖脫氫酶而導(dǎo)致殺傷功能障礙。

　　4．nbt還原試驗(yàn)這是一種簡(jiǎn)便、敏感的定性方法，可用于檢測(cè)兒童慢性肉芽腫病和嚴(yán)重的6-磷酸葡萄糖脫氫酶缺乏癥。nbt還原試驗(yàn)的正常值在10％以下，超過(guò)15％可作為感染的指標(biāo)；患慢性肉芽腫等病時(shí)，雖有各種感染發(fā)生，nbt還原試驗(yàn)值仍顯著降低，說(shuō)明細(xì)胞的還原殺傷能力的減弱或喪失。

　　六、補(bǔ)體系統(tǒng)免疫缺陷病的檢查

　　補(bǔ)體缺陷的檢查包括總補(bǔ)體活性和單個(gè)成分的測(cè)定。補(bǔ)體缺陷的分析極為困難，因?yàn)樯婕皟蓷l激活途徑近20種成分。不過(guò)一般認(rèn)為ch50、c1q、c4、c3和b因子等幾項(xiàng)檢測(cè)即可大致判斷補(bǔ)體缺陷的情況。原發(fā)性補(bǔ)體缺陷的發(fā)病率較低，且往往與一些自身免疫病相關(guān)，應(yīng)注意鑒別。在遺傳性血管神經(jīng)性水腫患者必須檢測(cè)c1抑制劑才能最終確診。

　　七、獲得性免疫缺陷病的檢查

　　艾滋病的免疫學(xué)檢查包括兩個(gè)方面：抗hiv抗體檢查和t細(xì)胞檢查；前者可參見(jiàn)微生物學(xué)有關(guān)內(nèi)容。t細(xì)胞檢測(cè)可見(jiàn)淋巴細(xì)胞總數(shù)減少（常＜1.5×109/l）、t細(xì)胞減少、cd4/cd8比值下降等；還有皮膚遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)減弱或消失、淋巴細(xì)胞對(duì)各種絲裂原的增殖反應(yīng)性降低等。此外，艾滋病也會(huì)出現(xiàn)血清免疫球蛋白升高，循環(huán)中出現(xiàn)免疫復(fù)合物、血清抑制因子和β2微球蛋白升高等免疫調(diào)節(jié)失衡的伴隨現(xiàn)象。

　　以上所述都是實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)，在進(jìn)行免疫缺陷病診斷時(shí)，還應(yīng)結(jié)合患者的年齡、性別、病史、感染類(lèi)型和其他臨床表現(xiàn)等進(jìn)行全面分析。

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