概念

斐林試劑以及由檸檬酸、硫酸銅與氫氧化鈉配制的本尼迪特試劑（班氏試劑）常與醛糖及酮糖在水浴加熱的條件下反應產(chǎn)生氧化亞銅磚紅色沉淀，即試劑本身被還原，所以凡能與上述試劑發(fā)生反應的糖稱為還原糖(reducing sugar)，凡不能與上述試劑發(fā)生反應的糖稱為非還原糖(non reducing sugar)，糖苷不能發(fā)生上述反應 [1]。葡萄糖分子中含有游離醛基，果糖分子中含有游離酮基，乳糖和麥芽糖分子中含有游離的醛基，故它們都是還原糖。

非還原性糖有蔗糖、淀粉、纖維素等，但它們都可以通過水解生成相應的還原性單糖。

性質

能夠還原斐林(H.von Fehling)試劑（本尼迪特試劑）或托倫斯(B.Tollens)試劑的糖稱為還原糖，所有的單糖，不論醛糖、酮糖都是還原糖。 [5

]大部分雙糖也是還原糖，蔗糖和海藻糖 [4]例外。斐林試劑是含Cu2+絡合物的溶液，被還原后得到磚紅色Cu2O的沉淀。托倫斯試劑被還原后能生成單質銀，發(fā)生“銀鏡反應”。

分子結構中含有還原性基團（如游離醛基或游離酮基）的糖，叫還原糖。如葡萄糖。

果糖含有游離的酮基，所以果糖也屬于還原糖 [2]。

還原性質

一般情況下，單糖的還原能力主要來自它的醛基，如葡萄糖，而多糖則大多因為半縮醛羥基的存在。還原后，自己會變成糖酸。如葡萄糖就會變成葡萄糖酸。

如該糖是酮糖，羰基就會斷裂，分解成兩個較小的分子，如果糖。

所有單糖及大部分二糖（除蔗糖等）在本尼迪克特試驗中呈陽性反應，所以大部分單糖及二糖都具有還原性 [2]。 [5

]

實驗原理

還原糖與斐林試劑發(fā)生作用，可以生成磚紅色沉淀。

所需試劑

斐林試劑（主要由質量濃度為0.1g/mL的NaOH溶液和質量濃度為0.05g/mL的CuSO4溶液配制而成）

注意：現(xiàn)配現(xiàn)用

實驗材料準備

植物組織是常用的實驗材料,但必須加以選擇。本實驗最理想的實驗材料是含糖量較高的生物組織(或器官),而且組織的顏色較淺,或近于白色的,如蘋果和梨的果實。經(jīng)試驗比較,顏色反應的明顯程度依次為蘋果、梨、白色甘藍葉、白蘿卜。

操作方法

①向試管內注入2mL待測組織藥液

②向試管內注入1mL斐林試劑（甲液和乙液等量混合均勻后再注入）

③將試管放入盛有50～65℃溫水的大燒杯中加熱約2min

④觀察試管中出現(xiàn)的顏色變化

其他說明

斐林試劑和班氏試劑等都是檢驗還原性糖的試劑，二者的使用方法及原理、成分有區(qū)別。下面就從這幾種試劑的使用原理、成分及使用方法等方面做一簡單總結。

斐林試劑和雙縮脲試劑都由NaOH溶液和CuSO4溶液組成，但二者有如下三點不同：

（1）溶液濃度不同

斐林試劑中溶液為斐林試劑甲(NaOH溶液)其濃度為0.1g/ml,斐林試劑乙(CuSO4溶液)其濃度為0.05g/ml；雙縮脲試劑:雙縮脲試劑A(NaOH溶液)的濃度為0.1g/ml，雙縮脲試劑B(CuSO4溶液)的濃度為0.01g/ml。

（2）使用原理不同

斐林試劑是新配制的溶液，它在加熱條件下與醛基反應，被還原成磚紅色的沉淀，可用于鑒定可溶性還原糖的存在。用斐林試劑鑒定可溶性還原糖時，溶液的顏色變化過程為：淺藍色→棕色→磚紅色（沉淀）。

鑒定生物組織中是否含有蛋白質時，常用雙縮脲法，使用的是雙縮脲試劑，發(fā)生的是雙縮脲反應。雙縮脲反應實質是在堿性環(huán)境下的與雙縮脲試劑發(fā)生的紫色反應。而蛋白質分子中含有很多與雙縮脲結構相似的肽鍵，所以蛋白質都能與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反應，可以用雙縮脲試劑鑒定蛋白質的存在 [3]。

（3）兩種試劑的保存方式不同。斐林試劑甲和斐林試劑乙可強烈產(chǎn)生，很容易沉淀析出，因此斐林試劑一般為現(xiàn)用現(xiàn)配；而班氏試劑的配方中，檸檬酸鈉為一對緩沖物質，產(chǎn)生的數(shù)量有限，與溶液混合后產(chǎn)生的濃度相對較低，不易析出，因此該試劑可長期保存 [3]。

當然，無論用班氏試劑還是斐林試劑，歸根結底都是與醛基在沸水浴加熱條件下反應而生成磚紅色的沉淀，兩者反應現(xiàn)象一樣，這就是二者的相同之處。

（4）備注：

如果溶液中還原糖含量較低，產(chǎn)生的氧化亞銅便會較少，試驗后只會有綠色、混濁的黃色或橙色等。

在酸性環(huán)境中，Cu2 會變得較為穩(wěn)定，不容易發(fā)生反應，所以不能進行試驗。

醇和醛在這測試亦會產(chǎn)生磚紅色沉淀物，因為兩者都具有在這試驗中產(chǎn)生作用的官能團。

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