第I部分：

生物技術(shù)藥物的臨床前安全性評(píng)價(jià)

在1997年7月16日的ICH指導(dǎo)委員會(huì)會(huì)議上進(jìn)入ICH進(jìn)程第四階段，本指導(dǎo)原則被推薦給三方ICH管理機(jī)構(gòu)采納。

1. 前言

1.1 背景

生物技術(shù)藥物（生物藥物）的開發(fā)始于20世紀(jì)80年代初。80年代后期批準(zhǔn)了第一個(gè)上市許可。對(duì)于生物技術(shù)藥物的安全性評(píng)價(jià)，不同的管理機(jī)構(gòu)已發(fā)布了一些指導(dǎo)原則和考慮要點(diǎn)文件。管理機(jī)構(gòu)對(duì)這些文件的回顧，可能會(huì)為開發(fā)新生物藥物提供有用的背景資料。

目前，生物藥物的申報(bào)已積累了大量的經(jīng)驗(yàn)。對(duì)這些經(jīng)驗(yàn)的重要回顧，為本指導(dǎo)原則的制定奠定了基礎(chǔ)。本文的目的在于為設(shè)計(jì)科學(xué)合理的臨床前安全性評(píng)價(jià)試驗(yàn)提供總體原則。

1.2 目的

目前，歐盟、日本和美國(guó)對(duì)于生物技術(shù)藥物的監(jiān)管標(biāo)準(zhǔn)基本一致。三方均采用靈活、個(gè)案處理和基于科學(xué)的方法評(píng)價(jià)臨床前安全性，支持臨床開發(fā)和上市許可。在這一快速發(fā)展的科學(xué)領(lǐng)域，需要地區(qū)之間達(dá)成共識(shí)并且保持持續(xù)對(duì)話。

臨床前安全性評(píng)價(jià)的主要目的是： 1）確定人體使用的安全起始劑量和隨后的劑量遞增方案；2）確定潛在毒性靶器官并研究這種毒性是否可逆；以及3）確定臨床監(jiān)測(cè)的安全性參數(shù)。本文件提供的原則旨在提高支持性臨床前安全性數(shù)據(jù)的質(zhì)量和一致性，以利于生物藥物的開發(fā)。

1.3 范圍

本指導(dǎo)原則的主要目的是推薦一種評(píng)價(jià)生物技術(shù)藥物臨床前安全性的基本模式，適用于采用多種表達(dá)系統(tǒng)的已鑒定細(xì)胞（如細(xì)菌、真菌、昆蟲、植物和哺乳動(dòng)物細(xì)胞）所制備的產(chǎn)品。這些產(chǎn)品可用于體內(nèi)診斷、治療或預(yù)防。其活性物質(zhì)包括蛋白質(zhì)、多肽及其衍生物或由其組成的產(chǎn)品；它們可能是細(xì)胞培養(yǎng)衍生物，或者采用重組DNA技術(shù)，包括通過轉(zhuǎn)基因植物和動(dòng)物生產(chǎn)的產(chǎn)品。例如（包括但不限于）：細(xì)胞因子、纖維蛋白溶酶原激活因子、重組血漿因子、生長(zhǎng)因子、融合蛋白、酶、受體、激素和單克隆抗體。

本文中的原則可能也適用于重組DNA蛋白疫苗、化學(xué)合成多肽、血漿衍生產(chǎn)品、從人組織
提取的內(nèi)源性蛋白和寡核苷酸藥物。

本文件適用范圍不包括抗生素、變應(yīng)原提取物、肝素、維生素、血細(xì)胞成分、常規(guī)的細(xì)菌或病毒疫苗、DNA疫苗或者細(xì)胞和基因療法。

2. 受試物的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

安全性考慮可能涉及藥物中存在的雜質(zhì)或污染物。最好通過純化處理去除雜質(zhì)和污染物，而不是為確保其質(zhì)量建立一套臨床前研究計(jì)劃。在任何情況下，都應(yīng)該充分確證產(chǎn)品的特征，以便對(duì)臨床前安全性研究進(jìn)行合理設(shè)計(jì)。

宿主細(xì)胞如細(xì)菌、酵母、昆蟲、植物和哺乳動(dòng)物細(xì)胞的污染存在潛在的危險(xiǎn)性。宿主細(xì)胞污染物可導(dǎo)致過敏反應(yīng)和其他免疫病理學(xué)反應(yīng)。理論上有與核酸污染物相關(guān)的不良反應(yīng)，但也存在整合到宿主細(xì)胞基因組的可能性。源于昆蟲、植物和哺乳動(dòng)物細(xì)胞或轉(zhuǎn)基因植物和動(dòng)物的產(chǎn)品，還可能有額外的病毒感染風(fēng)險(xiǎn)。

一般來講，用于正規(guī)藥理和毒理試驗(yàn)的產(chǎn)品應(yīng)與擬用于初期臨床試驗(yàn)的產(chǎn)品具有可比性。但是，在藥物開發(fā)進(jìn)程中允許為提高產(chǎn)品的質(zhì)量和產(chǎn)量進(jìn)行正常的生產(chǎn)工藝改進(jìn)。但應(yīng)考慮這種變更對(duì)于動(dòng)物試驗(yàn)結(jié)果外推至人體的可能影響。

在藥物開發(fā)過程中，如果采用了一種新的或改進(jìn)的生產(chǎn)工藝，或者產(chǎn)品或處方出現(xiàn)了重大變更時(shí)，應(yīng)證明產(chǎn)品的可比性。可比性評(píng)價(jià)可基于生化和生物學(xué)特征（即鑒別、純度、穩(wěn)定性和效價(jià)）。有些情況下可能需要進(jìn)行附加研究（即藥代動(dòng)力學(xué)、藥效學(xué)和/或安全性研究）。應(yīng)闡明所用方法的科學(xué)合理性。

3. 臨床前安全性試驗(yàn)

3.1 一般原則

臨床前安全性研究的目的在于解釋人體研究啟動(dòng)前至整個(gè)臨床開發(fā)過程中的藥理學(xué)和毒理學(xué)作用。體外和體內(nèi)研究都有助于確定這種特性。對(duì)于那些在結(jié)構(gòu)和藥理作用上與已大量臨床使用的產(chǎn)品類似的生物藥物，可酌情減少毒性試驗(yàn)。

臨床前安全性試驗(yàn)應(yīng)考慮：

1） 相關(guān)動(dòng)物種屬的選擇；

2) 年齡；

3) 生理狀態(tài)；

4) 給藥方式，包括劑量、給藥途徑和給藥方案；

5) 受試品在使用條件下的穩(wěn)定性。

毒性試驗(yàn)應(yīng)遵循藥物非臨床試驗(yàn)質(zhì)量管理規(guī)范（GLP）；但因?yàn)橛行┥锼幬锿枰捎锰厥庠囼?yàn)系統(tǒng)，可能無法完全符合GLP的要求。應(yīng)區(qū)分不符合GLP的條件，并且評(píng)價(jià)其相對(duì)于總體安全性評(píng)價(jià)的相對(duì)意義。在某些情況下，不完全符合GLP要求并不一定意味著這些試驗(yàn)數(shù)據(jù)不能用于支持臨床試驗(yàn)和上市許可。

藥物毒性試驗(yàn)的常規(guī)方法不一定適用于生物藥物，因?yàn)楹笳呓Y(jié)構(gòu)和生物學(xué)性質(zhì)具有專一性和多樣性，包括種屬特異性、免疫原性和非預(yù)期的多功能活性。

3.2 生物活性/藥效學(xué)

生物活性可用體外測(cè)定法評(píng)價(jià)，以確定產(chǎn)品的何種作用及與臨床藥效的相關(guān)性。細(xì)胞系和/或原代細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用，可能有助于檢測(cè)藥物對(duì)細(xì)胞表型和增殖的直接作用。因?yàn)樵S多生物技術(shù)藥物具有種屬特異性，選擇相關(guān)動(dòng)物種屬進(jìn)行毒性試驗(yàn)非常重要。哺乳動(dòng)物細(xì)胞系可用于預(yù)測(cè)體內(nèi)活性的特異性，并且可以定量評(píng)價(jià)生物藥物對(duì)不同種屬（包括人類）的相對(duì)靈敏度。設(shè)計(jì)此類試驗(yàn)可測(cè)定受體結(jié)合、受體親和力和/或藥理作用，幫助選擇合適的動(dòng)物種屬進(jìn)行進(jìn)一步的體內(nèi)藥理和毒理試驗(yàn)。綜合考慮體外和體內(nèi)試驗(yàn)結(jié)果有助于將發(fā)現(xiàn)的情況外推至人體。評(píng)價(jià)藥理作用的體內(nèi)研究，包括作用機(jī)理的解釋，通常用于支持臨床研究中產(chǎn)品擬定用途的合理性。

對(duì)于單克隆抗體，應(yīng)詳細(xì)描述抗體的免疫學(xué)特性，包括抗體的抗原特異性、補(bǔ)體結(jié)合、對(duì)人非靶組織的任何非預(yù)期反應(yīng)和/或細(xì)胞毒性。應(yīng)采用適當(dāng)?shù)拿庖呓M織化學(xué)方法在一系列的人組織上進(jìn)行此類交叉反應(yīng)試驗(yàn)。

3.3 動(dòng)物種屬/模型選擇

由于許多生物技術(shù)藥物的生物學(xué)活性與種屬和/或組織特異性相關(guān)，通常無法在常用種屬（如大鼠和犬）中進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)的毒性試驗(yàn)，而應(yīng)使用相關(guān)種屬動(dòng)物。所謂相關(guān)種屬，是指受試物在此類動(dòng)物上，由于受體或抗原決定簇（對(duì)單克隆抗體而言）的表達(dá)，能產(chǎn)生藥理學(xué)活性?？梢允褂枚喾N技術(shù)（如免疫化學(xué)或者功能試驗(yàn)）確定相關(guān)種屬。有關(guān)受體/抗原決定簇分布的知識(shí)，有助于更多的了解潛在的體內(nèi)毒性。

用于單克隆抗體試驗(yàn)的相關(guān)動(dòng)物種屬應(yīng)能表達(dá)所預(yù)期的抗原決定簇，并能證明其與人體組織具有類似的組織交叉反應(yīng)。這將使評(píng)價(jià)結(jié)合抗原決定簇所致毒性和任何非預(yù)期組織交叉反應(yīng)的能力顯著提高。如果能證明非預(yù)期的組織交叉反應(yīng)與人體相似，即使是一種不表達(dá)預(yù)期抗原決定簇的動(dòng)物種屬，對(duì)毒性評(píng)價(jià)仍有一定意義。

安全性評(píng)價(jià)項(xiàng)目中一般應(yīng)包括兩種相關(guān)種屬的動(dòng)物，但在某些已經(jīng)證明合理的情況下（如只能確定一種相關(guān)種屬的動(dòng)物，或?qū)υ撋锼幬锏纳飳W(xué)活性已經(jīng)十分了解），一種相關(guān)種屬可能已足夠。此外，即使短期毒性研究中必須用兩種動(dòng)物確定毒性，隨后的長(zhǎng)期毒性研究可能仍有理由使用一種動(dòng)物（如當(dāng)兩種動(dòng)物的短期毒性試驗(yàn)結(jié)果相似時(shí)）。

不相關(guān)種屬動(dòng)物的毒性研究可能會(huì)產(chǎn)生誤導(dǎo)，因而應(yīng)避免。當(dāng)無相關(guān)種屬時(shí)，應(yīng)該考慮使用表達(dá)人源受體的相關(guān)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物或者使用同源蛋白。如果表達(dá)人源受體的相關(guān)轉(zhuǎn)基因動(dòng)物產(chǎn)品與人源受體的相互作用和人體的預(yù)期生理結(jié)果相似，可以完善使用此類產(chǎn)品而獲取的信息。盡管使用同源蛋白也能得到有用的信息，但應(yīng)該注意到，同源蛋白和臨床擬用的產(chǎn)品之間，在生產(chǎn)工藝、雜質(zhì)/污染物的范圍、藥代動(dòng)力學(xué)和確切的藥理學(xué)機(jī)制方面都可能有不同之處。如不能使用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型或者同源蛋白時(shí)，對(duì)采用單一種屬進(jìn)行的有限毒性評(píng)價(jià)（例如包括重要功能終點(diǎn)如心血管和呼吸系統(tǒng)評(píng)價(jià)的重復(fù)給藥<14天的毒性研究）中發(fā)現(xiàn)的某些潛在毒性的評(píng)價(jià)應(yīng)謹(jǐn)慎。

近年來，被認(rèn)為與人類疾病相似的動(dòng)物模型開發(fā)取得了很大進(jìn)步。這些動(dòng)物模型包括誘發(fā)的和自發(fā)的疾病模型、基因敲除和轉(zhuǎn)基因動(dòng)物。這些模型不僅可對(duì)產(chǎn)品的藥理作用、藥代動(dòng)力學(xué)和劑量確定提供進(jìn)一步的認(rèn)識(shí)，也有助于確定安全性（如評(píng)價(jià)疾病的不良進(jìn)展？）。在某些情況下，可以用動(dòng)物疾病模型替代正常動(dòng)物進(jìn)行毒性研究（注釋1）。應(yīng)注意提供使用動(dòng)物疾病模型評(píng)價(jià)安全性的科學(xué)合理性。

3.4 動(dòng)物的數(shù)量/性別

每個(gè)劑量使用的動(dòng)物數(shù)量直接影響毒性檢測(cè)能力。樣本量小可能會(huì)由于僅考慮觀察次數(shù)而忽略嚴(yán)重程度，導(dǎo)致未能觀察到毒性事件。因受樣本量小所受到的限制（往往見于非人類靈長(zhǎng)動(dòng)物研究）可以通過增加觀察次數(shù)和延長(zhǎng)觀察時(shí)間而得到部分補(bǔ)償。一般應(yīng)該使用兩種性別的動(dòng)物，僅使用單一性別動(dòng)物時(shí)，應(yīng)闡明其合理性。

3.5 給藥途徑/劑量選擇

應(yīng)該盡可能接近擬用于臨床的給藥途徑和次數(shù)。需要考慮產(chǎn)品在所用動(dòng)物種屬中的藥代動(dòng)力學(xué)和生物利用度，以及安全、人道？的給藥量。例如，如果活性成分在動(dòng)物體內(nèi)清除較快或者溶解度低，可采用補(bǔ)償?shù)姆绞剑黾訉?shí)驗(yàn)動(dòng)物的給藥次數(shù)（與臨床研究擬用的給藥方案相比）。此時(shí)，應(yīng)確定試驗(yàn)動(dòng)物的暴露水平，并與臨床暴露量相比較。同時(shí)還需要考慮到給藥量、濃度、制劑和給藥部位的影響。如受到生物利用度、給藥途徑、或者動(dòng)物大小/生理狀態(tài)等限制而必須改變給藥途徑時(shí)，使用與臨床不同的給藥途徑也可以接受。

劑量選擇應(yīng)反映劑量-反應(yīng)關(guān)系，包括中毒劑量和未觀察到不良反應(yīng)的劑量（NOAEL）。對(duì)于某些毒性很小或無毒性的產(chǎn)品，不可能規(guī)定一個(gè)特定的最大劑量。在此情況下，應(yīng)提供劑量選擇及其預(yù)計(jì)人體暴露量倍數(shù)的合理性。高劑量選擇時(shí)，應(yīng)該考慮其預(yù)期的藥理/生理作用、足量受試物的可獲得性和預(yù)期的臨床應(yīng)用。當(dāng)產(chǎn)品與所選動(dòng)物細(xì)胞的親和力或效價(jià)低于人體細(xì)胞時(shí)，使用更高劑量進(jìn)行試驗(yàn)非常重要。用于確定足夠安全范圍的人用劑量倍數(shù)，可能隨每一類生物技術(shù)藥物及其臨床適應(yīng)癥而有所不同。

3.6 免疫原性

很多擬用于人的生物技術(shù)藥物對(duì)動(dòng)物有免疫原性。因此這類產(chǎn)品進(jìn)行重復(fù)給藥毒性研究時(shí)，應(yīng)在給藥期間檢測(cè)抗體以幫助解釋研究結(jié)果。應(yīng)明確抗體反應(yīng)特點(diǎn)（如滴度、出現(xiàn)抗體的動(dòng)物數(shù)量、中和或者非中和抗體），并將抗體的出現(xiàn)與所有藥理和/或毒理變化進(jìn)行綜合考慮。特別是在解釋數(shù)據(jù)時(shí)應(yīng)考慮抗體形成對(duì)藥代動(dòng)力學(xué)/藥效學(xué)參數(shù)、不良反應(yīng)發(fā)生率和/或嚴(yán)重程度、補(bǔ)體活化、或者出現(xiàn)新毒性作用的影響。也應(yīng)注意評(píng)價(jià)與免疫復(fù)合物形成和沉積相關(guān)的病理學(xué)變化。

除非大多數(shù)動(dòng)物的免疫反應(yīng)中和了生物藥物的藥理和/或毒理作用，否則檢出抗體不能作為早期終止臨床前安全性研究或者改變研究設(shè)計(jì)設(shè)定的持續(xù)時(shí)間的唯一標(biāo)準(zhǔn)。在大多數(shù)情況下，生物藥物的免疫反應(yīng)是可變的，正如在人體中觀察到的一樣。如對(duì)安全性研究數(shù)據(jù)的解釋不受這些問題的干擾，可以認(rèn)為抗體反應(yīng)沒有特殊意義。

在動(dòng)物中誘導(dǎo)了抗體形成并不能預(yù)示在人體可能形成抗體。人體可能產(chǎn)生抗人源蛋白的血清抗體，當(dāng)往往出現(xiàn)抗體后仍存在治療作用。人體罕見出現(xiàn)對(duì)重組蛋白的嚴(yán)重過敏反應(yīng)。就此而言，對(duì)蛋白產(chǎn)品呈陽性的豚鼠過敏研究結(jié)果不能預(yù)測(cè)人體反應(yīng)；因此，這類研究對(duì)此類產(chǎn)品的常規(guī)評(píng)價(jià)幾乎沒有價(jià)值。

4. 特殊考慮

4.1 安全藥理學(xué)

用合適的動(dòng)物模型研究潛在的不良藥理學(xué)活性很重要，必要時(shí)應(yīng)結(jié)合毒性研究和/或臨床研究，對(duì)這些作用進(jìn)行詳細(xì)的觀察。安全藥理學(xué)研究是檢測(cè)與潛在毒性相關(guān)的功能性指標(biāo)，這些功能性指標(biāo)可以通過單獨(dú)的研究也可以結(jié)合在毒性研究中考察。安全藥理學(xué)研究的目的是揭示任何對(duì)主要生理系統(tǒng)功能的影響（如心血管、呼吸、腎臟和中樞神經(jīng)系統(tǒng)）。研究可使用離體器官或其他非整體動(dòng)物的試驗(yàn)系統(tǒng)。所有這些研究可用于解釋特定器官毒性的發(fā)生機(jī)理，應(yīng)慎重考慮所發(fā)生的毒性與人體應(yīng)用和適應(yīng)癥的關(guān)系。

4.2 暴露評(píng)價(jià)4.2.1 藥代動(dòng)力學(xué)和毒代動(dòng)力學(xué)

很難制定統(tǒng)一的生物技術(shù)藥物的藥代動(dòng)力學(xué)研究指導(dǎo)原則。在相關(guān)種屬中進(jìn)行單劑量和多劑量的藥代動(dòng)力學(xué)、毒代動(dòng)力學(xué)和組織分布研究是有用的；但試圖評(píng)價(jià)質(zhì)量平衡的常規(guī)研究用處不大。不同動(dòng)物種屬間藥代動(dòng)力學(xué)的差異對(duì)動(dòng)物研究的預(yù)測(cè)性或評(píng)價(jià)毒性研究中的劑量-反應(yīng)關(guān)系有顯著影響。由免疫介導(dǎo)的清除機(jī)制引起的藥代動(dòng)力學(xué)特征改變，可能會(huì)影響動(dòng)力學(xué)特征和對(duì)毒性試驗(yàn)數(shù)據(jù)的解釋。某些產(chǎn)品可能還出現(xiàn)固有藥效作用的表達(dá)比藥代動(dòng)力學(xué)特征的明顯延遲（如細(xì)胞因子）的現(xiàn)象，或者可能藥效作用的持續(xù)時(shí)間比血漿濃度水平的更長(zhǎng)。

在可能情況下，藥代動(dòng)力學(xué)研究應(yīng)盡可能使用擬用于毒性試驗(yàn)和臨床研究的制劑，給藥途徑也應(yīng)與臨床研究擬用途徑相關(guān)。制劑、濃度、給藥部位和/或給藥量都可能影響吸收模式。如有可能，應(yīng)在毒性研究中監(jiān)測(cè)全身藥物暴露情況。

當(dāng)使用放射性標(biāo)記蛋白時(shí)，重要的是要顯示放射標(biāo)記的受試物仍保持與非標(biāo)記物質(zhì)相當(dāng)?shù)幕钚院蜕飳W(xué)性質(zhì)。因?yàn)轶w內(nèi)代謝迅速或者放射性標(biāo)記連接不穩(wěn)定，可能難以解釋使用放射性標(biāo)記蛋白得到的組織放射活性濃度和/或放射自顯影數(shù)據(jù)。在解釋特定的放射性示蹤氨基酸研究時(shí)應(yīng)謹(jǐn)慎，因?yàn)榘被峥蛇M(jìn)入與藥物無關(guān)的蛋白/肽再循環(huán)。

臨床研究前應(yīng)提供相關(guān)動(dòng)物模型中吸收、處置和清除的信息，以便根據(jù)暴露水平和給藥劑量預(yù)測(cè)安全范圍。

4.2.2 測(cè)定

應(yīng)該在個(gè)案分析的基礎(chǔ)上提出使用一種或多種測(cè)定方法，并闡述其科學(xué)合理性。通?？紤]
使用一種經(jīng)過驗(yàn)證的方法。例如，一種放射標(biāo)記蛋白給藥后定量測(cè)定TCA沉淀部分的放射活性，
可能會(huì)提供足夠的信息，但優(yōu)先考慮使用分析物的特異性分析方法。比較理想的是在動(dòng)物和人
體研究中使用相同的分析方法。應(yīng)該確定血漿/血清中的血漿結(jié)合蛋白和/或抗體對(duì)測(cè)定的可能
影響。

4.2.3 代謝

生物技術(shù)藥物代謝的預(yù)期結(jié)果是降解成為小肽和各種氨基酸。因此，通常對(duì)其代謝途徑已有了解，一般不需要進(jìn)行經(jīng)典的藥物生物轉(zhuǎn)化研究。

應(yīng)了解生物藥物在生物基質(zhì)（如血漿、血清、腦脊液）中的行為以及對(duì)結(jié)合蛋白的可能影響，這對(duì)于了解藥效學(xué)作用非常重要。

4.3 單次給藥毒性研究

單次給藥研究數(shù)據(jù)可能得到劑量與全身和/或局部毒性之間的關(guān)系的有用數(shù)據(jù)，這些數(shù)據(jù)可用于選擇重復(fù)給藥毒性研究的劑量。通過進(jìn)行單次給藥毒性研究（作為藥理或動(dòng)物模型藥效研究的一部分）可收集到劑量-反應(yīng)關(guān)系的信息。應(yīng)考慮將安全藥理學(xué)參數(shù)結(jié)合在這些研究的設(shè)計(jì)中。

4.4 重復(fù)給藥毒性研究

重復(fù)給藥研究的動(dòng)物種屬選擇考慮參見第3.3節(jié)。給藥途徑和方案（如每天給藥vs間斷給藥）應(yīng)該反映臨床擬用途徑或者用藥（暴露）情況。如果可行，這些研究應(yīng)該包括毒代動(dòng)力學(xué)評(píng)價(jià)。

研究設(shè)計(jì)一般應(yīng)包括恢復(fù)期，以確定藥理學(xué)/毒理學(xué)作用的可逆性或潛在惡化和/或潛在的延遲毒性效應(yīng)。對(duì)于藥理/毒理作用持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)的生物藥物，其恢復(fù)期試驗(yàn)動(dòng)物的監(jiān)測(cè)期應(yīng)延長(zhǎng)，直至證實(shí)毒性反應(yīng)的可逆性。重復(fù)給藥研究的期限應(yīng)根據(jù)臨床暴露的預(yù)期持續(xù)時(shí)間和適應(yīng)癥確定。大多數(shù)生物技術(shù)藥物的動(dòng)物給藥期限為1-3個(gè)月。對(duì)于計(jì)劃短期使用（如≤7天）或者治療危及生命的急性疾病的生物藥物，2周的重復(fù)給藥研究足以？可支持其臨床研究以及上市許可。對(duì)于擬用于慢性適應(yīng)癥的生物藥物，一般研究期限為6個(gè)月，盡管某些情況下研究期限短些或長(zhǎng)些都已用于支持批準(zhǔn)上市。計(jì)劃長(zhǎng)期使用的生物藥物，應(yīng)科學(xué)地闡明長(zhǎng)期毒性研究期限的合理性。

4.5 免疫毒性研究

免疫毒理學(xué)評(píng)價(jià)的內(nèi)容之一是潛在的免疫原性（參見第3.6節(jié)）。很多生物技術(shù)藥物試圖用來刺激或抑制免疫系統(tǒng)，因而不僅影響體液免疫也影響細(xì)胞免疫。注射部位的炎癥反應(yīng)可能是一種刺激性反應(yīng)，重要的是應(yīng)認(rèn)識(shí)到單純注射損傷和/或制劑賦形劑的特定毒性作用也可導(dǎo)致注射部位的毒性反應(yīng)。此外，靶細(xì)胞表面抗原的表達(dá)可能被改變，這暗示有自身免疫的可能。免疫毒理學(xué)試驗(yàn)中可能要進(jìn)行篩查試驗(yàn)，而后進(jìn)行機(jī)理研究以闡明這些問題。但常規(guī)的階梯式試驗(yàn)方法或者標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)組合不推薦用于生物技術(shù)藥物的免疫毒性評(píng)價(jià)。

4.6 生殖能力和發(fā)育毒性研究

應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品、臨床適應(yīng)癥和目標(biāo)患者人群決定是否需要進(jìn)行生殖/發(fā)育毒性研究（注釋2）。具體的研究設(shè)計(jì)和給藥方案可根據(jù)種屬特異性、免疫原性、生物學(xué)活性和/或較長(zhǎng)的消除半衰期等問題加以修改。例如，當(dāng)存在某些涉及潛在發(fā)育免疫毒性的擔(dān)憂時(shí)，特別是對(duì)于某些具有長(zhǎng)效免疫作用的單克隆抗體，應(yīng)對(duì)研究設(shè)計(jì)進(jìn)行修改，以評(píng)價(jià)新生動(dòng)物免疫功能。

4.7 遺傳毒性研究

常規(guī)用于藥物評(píng)價(jià)的遺傳毒性研究的范圍和類型并不適用于生物技術(shù)藥物，因此不需要進(jìn)行這些研究，而且給予大量的多肽/蛋白質(zhì)可能得到無法解釋的結(jié)果。并不認(rèn)為這類物質(zhì)會(huì)直接與DNA或其他染色體物質(zhì)發(fā)生相互作用（參見注釋3）。

當(dāng)對(duì)產(chǎn)品有擔(dān)憂時(shí)（例如，一種結(jié)合蛋白產(chǎn)品中含有機(jī)連接分子），應(yīng)考慮采用已有和相關(guān)的試驗(yàn)系統(tǒng)，包括新開發(fā)的系統(tǒng)進(jìn)行研究。用標(biāo)準(zhǔn)遺傳毒性研究并不適合檢測(cè)生產(chǎn)過程中的潛在污染物，如為此目的而進(jìn)行研究應(yīng)闡述其合理性。

4.8 致癌性研究

標(biāo)準(zhǔn)致癌性生物試驗(yàn)一般不適用于評(píng)價(jià)生物技術(shù)藥物。但是，可能也需要根據(jù)產(chǎn)品（如生長(zhǎng)因子、免疫抑制劑等）的臨床用藥療程、患者人群和/或生物活性，對(duì)其潛在致癌性進(jìn)行評(píng)價(jià)。當(dāng)存在潛在致癌性的擔(dān)憂時(shí)，可考慮采用多種方法評(píng)價(jià)其風(fēng)險(xiǎn)。

具有支持或者誘導(dǎo)轉(zhuǎn)化細(xì)胞增殖和克隆擴(kuò)增潛力的產(chǎn)品可能具有致瘤性，應(yīng)采用與研究患者人群可能相關(guān)的多種惡性細(xì)胞和正常的人體細(xì)胞，對(duì)其受體表達(dá)進(jìn)行評(píng)價(jià)。應(yīng)確定產(chǎn)品刺激表達(dá)該受體的正?；驉盒约?xì)胞生長(zhǎng)的能力。當(dāng)體外數(shù)據(jù)提示存在潛在致癌性擔(dān)憂時(shí)，可能需要用相關(guān)動(dòng)物模型進(jìn)行進(jìn)一步研究。在長(zhǎng)期重復(fù)給藥毒性研究中檢測(cè)一些靈敏的細(xì)胞增殖指標(biāo)可能會(huì)提供有用的信息。

在某些情況下，如果產(chǎn)品在嚙齒類動(dòng)物中具有生物活性且無免疫原性，而其他研究又未提供評(píng)價(jià)潛在致癌性的充分信息，則應(yīng)考慮使用一種嚙齒類動(dòng)物進(jìn)行試驗(yàn)。應(yīng)慎重選擇用藥劑量。將藥代動(dòng)力學(xué)和藥效學(xué)終點(diǎn)與比較性受體特征和擬定人體暴露劑量結(jié)合起來考慮，是確定合適劑量的最科學(xué)的方法。應(yīng)闡述劑量選擇的合理性。

4.9 局部耐受性研究

應(yīng)評(píng)價(jià)局部耐受性。應(yīng)對(duì)計(jì)劃上市的制劑進(jìn)行試驗(yàn)，但在某些已證明合理的情況下，對(duì)具有代表性的制劑進(jìn)行試驗(yàn)是可行的。某些情況下，產(chǎn)品的該潛在不良反應(yīng)可在單次或重復(fù)給藥毒性研究中評(píng)價(jià)，因此可避免單獨(dú)進(jìn)行局部耐受性研究。

注釋

注釋 1

動(dòng)物疾病模型可能有助于確定毒性終點(diǎn)、選擇臨床適應(yīng)癥和確定合適的制劑、給藥途徑和治療方案。評(píng)價(jià)研究結(jié)果時(shí)應(yīng)注意這些疾病模型往往缺乏歷史數(shù)據(jù)作為參考。因此，至關(guān)主要的是收集同期對(duì)照數(shù)據(jù)和基線數(shù)據(jù)以優(yōu)化研究設(shè)計(jì)。

注釋 2

關(guān)于特殊類型的化合物（如干擾素）的潛在生殖和/或發(fā)育作用（唯一相關(guān)動(dòng)物種屬為非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物）可能已有大量的資料發(fā)表。在這種情況下，如果機(jī)理研究提示，一個(gè)新的但相關(guān)的分子很可能引起相似的作用時(shí)，則可能無需進(jìn)行正式的生殖毒性和/或發(fā)育毒性研究。上述情況下均應(yīng)該提供評(píng)價(jià)其潛在生殖/發(fā)育作用的科學(xué)依據(jù)。

注釋 3

有些生物藥物可能擔(dān)心由于自發(fā)突變細(xì)胞的累積（如通過促進(jìn)增殖的選擇優(yōu)勢(shì)）而致癌。但標(biāo)準(zhǔn)的遺傳毒性研究組合并不能用于檢測(cè)這類情況。針對(duì)這些問題，可能需要開發(fā)替代的體外或者體內(nèi)模型來進(jìn)行相關(guān)評(píng)價(jià)。

第II部分：

生物技術(shù)藥物的臨床前安全性評(píng)價(jià)

在2011年6月12日已經(jīng)達(dá)到ICH進(jìn)程第四階段，并在2011年6月結(jié)束時(shí)與總指導(dǎo)原則整合，本指導(dǎo)原則被推薦給三方ICH管理機(jī)構(gòu)采納。

序言：

閱讀本附錄時(shí)，應(yīng)該緊密結(jié)合ICH S6總指導(dǎo)原則。一般來說，附錄是指導(dǎo)原則的補(bǔ)充，當(dāng)
附錄與總指導(dǎo)原則內(nèi)容不同時(shí)，應(yīng)以附錄為準(zhǔn)。

1. 前言

1.1 附錄目的

本附錄旨在補(bǔ)充ICH S6總指導(dǎo)原則中討論的以下主題，并進(jìn)行闡述和更新：動(dòng)物種屬選擇、研究設(shè)計(jì)、免疫原性、生殖和發(fā)育毒性、以及潛在致癌性的評(píng)價(jià)。自ICH S6總指導(dǎo)原則發(fā)表后取得的科學(xué)進(jìn)步和獲得的經(jīng)驗(yàn)推動(dòng)了本附錄的制定。本協(xié)調(diào)后的附錄將有助于定義目前的建議以及減小各地區(qū)間存在重大差異的可能性。

本指導(dǎo)原則應(yīng)有助于促進(jìn)臨床試驗(yàn)的及時(shí)進(jìn)行，按照3R（減少/改善/替代）原則減少動(dòng)物的使用，以及減少其他藥物開發(fā)資源的使用。雖然在本指導(dǎo)原則中未進(jìn)行討論，但應(yīng)考慮使用合適的體外替代方法進(jìn)行安全性評(píng)價(jià)。如果所有ICH管理機(jī)構(gòu)都接受，那么這些方法可以替代現(xiàn)行的標(biāo)準(zhǔn)方法。

本指導(dǎo)原則推動(dòng)了新藥物安全且符合倫理要求的開發(fā)和上市。

1.2 背景

本附錄中的建議在歐盟（EU）、日本和美國(guó)之間進(jìn)一步協(xié)調(diào)了非臨床安全性研究，支持不同階段的臨床開發(fā)。當(dāng)前的附錄反映了生物技術(shù)藥物安全性評(píng)價(jià)的相關(guān)共識(shí)。

1.3 指導(dǎo)原則的范圍

本附錄并未改變ICH S6總指導(dǎo)原則的范圍。對(duì)于擬用于腫瘤學(xué)的生物技術(shù)藥物，請(qǐng)參考抗癌藥物的非臨床評(píng)價(jià)指導(dǎo)原則（ICH S9指導(dǎo)原則）。

2. 種屬的選擇

2.1 一般原則

在確定種屬相關(guān)性時(shí)，應(yīng)該考慮若干因素。通常從種屬間目標(biāo)序列同源性的比較開始，之后進(jìn)行體外分析，以便在種屬間進(jìn)行靶標(biāo)相對(duì)結(jié)合親和力、受體/配體結(jié)合率以及動(dòng)力學(xué)的定性和定量比較。

另外還推薦進(jìn)行功能活性評(píng)價(jià)。可以在種屬特異性細(xì)胞系統(tǒng)和/或體內(nèi)藥理學(xué)或毒理學(xué)研究中證明功能活性。對(duì)已知的生物學(xué)反應(yīng)或藥效學(xué)（PD）標(biāo)記物的調(diào)控，能夠?yàn)橹С址N屬相關(guān)性的功能活性提供證據(jù)。

考慮到預(yù)期給藥方案背景下靶向結(jié)合和功能活性的種屬間差異，提供的模型應(yīng)有把握證實(shí)靶標(biāo)調(diào)控的潛在不良后果。當(dāng)?shù)湫偷慕】蹬R床前種屬靶標(biāo)表達(dá)水平非常低時(shí)（如炎性細(xì)胞因子或者腫瘤抗原），在細(xì)胞系統(tǒng)中的結(jié)合親和力和活性足以指導(dǎo)種屬的選擇。

評(píng)價(jià)動(dòng)物組織交叉反應(yīng)對(duì)種屬選擇的意義有限（參見注釋1）。但在特定的情況下（如上述方法無法用于說明藥理學(xué)相關(guān)種屬時(shí)），組織交叉反應(yīng)（TCR）研究可以通過比較人體和動(dòng)物組織預(yù)期的靶結(jié)合特征指導(dǎo)毒理學(xué)種屬的選擇。

如ICH S6指導(dǎo)原則所述，如果因?yàn)樯锼幬锱c任何種屬的直系同源靶標(biāo)沒有相互作用而不能確定相關(guān)種屬，則可以考慮使用同源分子或者轉(zhuǎn)基因模型。

對(duì)于單克隆抗體和以外源性物質(zhì)（如細(xì)菌、病毒等）為靶標(biāo)的其他相關(guān)抗體產(chǎn)品，可以考慮在一個(gè)種屬（由申辦者說明種屬選擇的合理性）中進(jìn)行短期安全性研究（參見ICH S6指導(dǎo)原則），無需附加毒性研究，包括生殖毒性研究?；蛘撸?dāng)動(dòng)物疾病模型被用于評(píng)價(jià)原理論證時(shí)，可以納入安全性評(píng)價(jià)，提供與潛在靶標(biāo)相關(guān)的安全性信息。如果不可行，則應(yīng)該在臨床研究中采用適當(dāng)?shù)娘L(fēng)險(xiǎn)減輕策略。

對(duì)于與新型毒素/有毒物結(jié)合的抗體-藥物/毒素結(jié)合物（ADC），種屬選擇遵循的一般原則應(yīng)與非結(jié)合抗體相同（參見上述并參見注釋2）。

2.2 一或兩個(gè)種屬

如果有兩種藥理學(xué)相關(guān)的種屬作為臨床候選物（一種嚙齒類和一種非嚙齒類），那么應(yīng)該使用這兩個(gè)種屬進(jìn)行短期（持續(xù)時(shí)間不超過1個(gè)月） 毒性研究。如果這些研究的毒理學(xué)結(jié)果相似，或者根據(jù)產(chǎn)品的作用機(jī)制對(duì)結(jié)果有一定的理解，那么通常在一個(gè)種屬中進(jìn)行長(zhǎng)期毒性研究即可。除非有使用非嚙齒類動(dòng)物的科學(xué)原理支持，否則應(yīng)該使用嚙齒類動(dòng)物種屬進(jìn)行研究。在兩個(gè)非嚙齒類種屬中進(jìn)行研究并不適當(dāng)。

當(dāng)臨床候選物僅在一個(gè)種屬中具有藥理學(xué)活性時(shí)，需要證明在所有一般毒性研究中使用該種屬的合理性。在第二種屬中進(jìn)行同源產(chǎn)品的研究對(duì)于風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估沒有進(jìn)一步的價(jià)值，因此不推薦進(jìn)行。

2.3 同源蛋白的使用

使用同源蛋白是ICH S6指導(dǎo)原則第3.3部分中描述的替代方法之一。使用同源蛋白的研究可
以用于檢測(cè)危害？？，并且可以了解因藥理作用放大而引起不良作用的可能性，但是使用同源
蛋白一般對(duì)定量風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估沒有幫助。因此，為了確定危害？？，只要已經(jīng)證明了研究設(shè)計(jì)和所
選劑量（如最大藥理學(xué)劑量）的科學(xué)合理性，就可以使用一個(gè)對(duì)照組和一個(gè)治療組進(jìn)行安全性
評(píng)價(jià)研究。

3. 研究設(shè)計(jì)

3.1 劑量選擇和PK/PD原則的應(yīng)用

大多數(shù)生物藥物的毒性都與其靶向作用機(jī)制相關(guān)；因此，相對(duì)高劑量會(huì)引起不良反應(yīng)，隨著藥理作用放大而變得明顯。

考慮劑量-反應(yīng)關(guān)系的特征，說明劑量選擇的合理性。通過確認(rèn)以下要素，藥代動(dòng)力學(xué)-藥效學(xué)（PK-PD）方法（如簡(jiǎn)單的暴露-反應(yīng)關(guān)系，或者更加復(fù)雜的模型和模擬方法）有助于高劑量選擇：1）在臨床前種屬中提供最大預(yù)期藥理學(xué)作用的劑量；以及2）提供達(dá)到臨床最大暴露約10倍暴露倍數(shù)的劑量。在臨床前毒性研究中應(yīng)該選擇上述兩種劑量中的較高者，除非有合理證據(jù)證明應(yīng)該選用較低劑量（如最大的可行劑量）。

在無法獲取體內(nèi)/離體PD終點(diǎn)時(shí)，可以以PK數(shù)據(jù)為基礎(chǔ)，并且從體外結(jié)合和/或藥理學(xué)數(shù)據(jù)中獲得高劑量選擇的依據(jù)。應(yīng)該考慮校正非臨床種屬和人體之間靶結(jié)合和體外藥理學(xué)活性的差異，以便調(diào)整最高預(yù)期臨床暴露的暴露界限。例如，結(jié)合親和力和/或體外效價(jià)之間相對(duì)較大的差異可能提示在非臨床研究中更適合采用較高劑量。如果在采用這種方法所選的劑量上也無法證實(shí)毒性，那么使用更高倍數(shù)人體劑量進(jìn)行額外毒性研究可能也無法提供其他有用的信息。

3.2 研究期限

對(duì)于長(zhǎng)期使用的產(chǎn)品，只要按照上述第3.1節(jié)的原則選擇高劑量，那么在嚙齒類或者非嚙齒類中進(jìn)行6個(gè)月的重復(fù)給藥毒性研究即可。期限更長(zhǎng)的研究通常也不會(huì)再提供能夠改變臨床開發(fā)進(jìn)程的有用信息。

對(duì)于擬用于晚期癌癥患者長(zhǎng)期用藥的生物藥物產(chǎn)品來說，指導(dǎo)原則毒性研究持續(xù)時(shí)間的原則見ICH S9指導(dǎo)原則。

3.3 恢復(fù)

如果在與臨床相關(guān)的暴露水平出現(xiàn)具有潛在不良臨床影響的藥理和毒理作用，應(yīng)了解該現(xiàn)象是否會(huì)恢復(fù)?？梢酝ㄟ^了解觀察到的個(gè)別作用是否可逆，或者在至少一項(xiàng)研究中，至少在一個(gè)劑量水平設(shè)置一個(gè)非給藥期（由申辦者證明合理性）來獲取該信息。非給藥期的目的是檢查這些作用的可逆性，而不是評(píng)價(jià)延遲的毒性。證實(shí)完全恢復(fù)并不重要。也無需僅為了評(píng)價(jià)潛在免疫原性而額外設(shè)置恢復(fù)期。

3.4 探索性臨床研究

ICH M3（R2）指導(dǎo)原則中概述的探索性臨床研究的支持性靈活方法適用于生物藥物。建議討論這些方法，并與相關(guān)管理機(jī)構(gòu)達(dá)成共識(shí)。

4. 免疫原性

進(jìn)行免疫原性評(píng)價(jià)有助于研究結(jié)果解釋和隨后的研究設(shè)計(jì)。非臨床動(dòng)物研究中的此類分析，與預(yù)測(cè)人源蛋白在人體的潛在免疫原性無關(guān)。

如果存在以下證據(jù)，應(yīng)該在非臨床研究中測(cè)定抗藥抗體：1）PD活性變化；2）在缺乏PD標(biāo)記物時(shí)出現(xiàn)非預(yù)期的暴露變化；或者3）出現(xiàn)免疫介導(dǎo)反應(yīng)（免疫復(fù)合物疾病、血管炎、過敏性反應(yīng)等）。由于在完成研究的活體階段之前很難預(yù)測(cè)是否需要進(jìn)行這種分析，因此這通常有助于確保在研究過程中獲得充分的樣本，以便在需要輔助解釋研究結(jié)果時(shí)，可以對(duì)其進(jìn)行后續(xù)分析。當(dāng)檢測(cè)到ADAs時(shí)，應(yīng)該評(píng)價(jià)它們對(duì)解釋研究結(jié)果的影響（亦可參見第I部分，第3.6節(jié)，第2段，對(duì)免疫原性的影響的進(jìn)一步指導(dǎo)）。

如果檢測(cè)到ADAs、并且在體內(nèi)毒性研究中沒有證實(shí)存在持續(xù)活性的PD標(biāo)記物時(shí)，需要評(píng)估中和作用的可能性。可以在離體生物活性分析中或者以適當(dāng)?shù)腜K-PD聯(lián)合分析形式間接評(píng)價(jià)抗體的中和作用，或者在特異性試驗(yàn)中直接評(píng)估抗體的中和作用。

5. 生殖和發(fā)育毒性

5.1 一般評(píng)論

生殖毒性研究應(yīng)該按照ICH S5（R2）指導(dǎo)原則概述的原則來進(jìn)行?？梢愿鶕?jù)對(duì)種屬特異性、產(chǎn)品的性質(zhì)、以及作用機(jī)制、免疫原性和/或藥代動(dòng)力學(xué)行為和胚胎–胎兒暴露的理解，修改具體的研究設(shè)計(jì)和給藥方案。

一般來講，最好可以在一個(gè)相關(guān)種屬中使用臨床候選物進(jìn)行生殖毒性評(píng)價(jià)。生殖毒性評(píng)價(jià)應(yīng)該只在藥理學(xué)相關(guān)種屬中進(jìn)行。當(dāng)臨床候選物在嚙齒類動(dòng)物和兔中具有藥理學(xué)活性時(shí)，應(yīng)該使用兩個(gè)種屬進(jìn)行胚胎發(fā)育（EFD）研究，除非在一個(gè)種屬中已經(jīng)確認(rèn)有胚胎致死性或者致畸性。

當(dāng)非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物（NHPs）是唯一的相關(guān)種屬時(shí)，應(yīng)該只在非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物中進(jìn)行發(fā)育毒性研究。

當(dāng)臨床候選物只在NHPs具有藥理學(xué)活性時(shí)，在NHPs中進(jìn)行臨床候選物試驗(yàn)是首選做法。如果可以提供充分的科學(xué)合理性，則可以使用替代模型替換NHPs。

如果沒有臨床候選物試驗(yàn)的相關(guān)動(dòng)物種屬，假設(shè)對(duì)模型具有充分的背景知識(shí)（如歷史背景數(shù)據(jù)），可以考慮使用表達(dá)人源靶標(biāo)的轉(zhuǎn)基因小鼠，或在表達(dá)人同源靶標(biāo)的種屬中使用同源蛋白（參見第I部分，注釋1）。對(duì)于以外源性物質(zhì)（如細(xì)菌和病毒）為靶標(biāo)的產(chǎn)品，一般不需要進(jìn)行生殖毒性研究（參見第2.1部分）。

當(dāng)證據(jù)的權(quán)衡結(jié)果（作用機(jī)制、基因修飾動(dòng)物的表型數(shù)據(jù)、類別效應(yīng)）提示，會(huì)在生育能力或者妊娠結(jié)果方面出現(xiàn)不良反應(yīng)時(shí)，這些數(shù)據(jù)的信息足以進(jìn)行生殖風(fēng)險(xiǎn)溝通？，并且在合適的條件下，可能無需進(jìn)行額外的非臨床研究。

5.2 生育能力

如果小鼠和大鼠都是某一產(chǎn)品的藥理學(xué)相關(guān)種屬，可以在這些嚙齒類動(dòng)物的一個(gè)種屬中進(jìn)行生育能力的評(píng)價(jià)（參見ICH S5指導(dǎo)原則）。如果其他種屬也具有藥理學(xué)相關(guān)性，那么ICH S5指導(dǎo)原則也適用于其他種屬；此外，應(yīng)該酌情修改研究設(shè)計(jì)，例如說明產(chǎn)品的性質(zhì)和免疫原性的可能性。

交配研究對(duì)于NHPs并不實(shí)際。但是，當(dāng)NHPs是唯一的相關(guān)種屬時(shí)，可以在性成熟的NHPs中進(jìn)行至少持續(xù)3個(gè)月的重復(fù)給藥毒性研究，通過評(píng)價(jià)生殖系統(tǒng)（器官重量和組織病理學(xué)評(píng)價(jià)）評(píng)估對(duì)雄性和雌性生育能力的潛在影響。如果根據(jù)藥理學(xué)活性或者既往結(jié)果，存在導(dǎo)致?lián)鷳n的特殊原因，那么可以在重復(fù)給藥毒性研究中進(jìn)行特定的評(píng)價(jià)，如評(píng)價(jià)月經(jīng)周期、精子數(shù)、精子形態(tài)/精子活力、以及雄性或者雌性生殖激素水平。

如果由于在受精/著床方面有潛在影響，而存在藥理學(xué)活性相關(guān)的特殊擔(dān)憂，并且NHP是唯一的相關(guān)種屬時(shí)，可以實(shí)驗(yàn)性說明該擔(dān)憂。當(dāng)受精或者著床是特殊擔(dān)憂時(shí)，同源產(chǎn)品或者轉(zhuǎn)基因模型可能是評(píng)估此類影響唯一實(shí)際的方法。但是，不建議僅為在嚙齒類動(dòng)物中進(jìn)行交配研究，而生產(chǎn)同源產(chǎn)品或者建立轉(zhuǎn)基因模型。

在缺乏非臨床信息時(shí)，應(yīng)通過臨床試驗(yàn)管理程序、知情同意、以及適當(dāng)?shù)漠a(chǎn)品說明書來降低患者的風(fēng)險(xiǎn)。

5.3 胚胎–胎兒發(fā)育（EFD）和出生前/后的發(fā)育（PPND）

在設(shè)計(jì)和解釋發(fā)育毒性研究時(shí)，要考慮到生物藥物在胎盤轉(zhuǎn)移方面的潛在差異（參見注釋3）。

對(duì)于僅在NHPs中具有藥理學(xué)活性的產(chǎn)品，依據(jù)預(yù)期的臨床應(yīng)用和藥理學(xué)作用，可以考慮幾種研究設(shè)計(jì)。獨(dú)立的EFD和/或PPND研究、或者其他研究設(shè)計(jì)（由申辦者證明合理性）都可能適宜，尤其是存在某些擔(dān)憂，作用機(jī)制可能導(dǎo)致對(duì)胚胎–胎兒發(fā)育的不良反應(yīng)或者流產(chǎn)情況。但是，在NHPs中可以考慮設(shè)計(jì)良好且包含從妊娠第20天到出生之間的給藥研究（加強(qiáng)PPND，ePPND），而不是獨(dú)立的EFD和/或PPND研究。

對(duì)于上述描述的單一ePPND研究設(shè)計(jì)，無需設(shè)置剖腹產(chǎn)組，但是應(yīng)該在自然分娩時(shí)對(duì)妊娠結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)。該研究也應(yīng)該同時(shí)評(píng)價(jià)后代的生存力、外觀畸形、對(duì)骨骼的影響（如通過X-射線確定）、以及處死后尸體剖檢時(shí)的內(nèi)臟形態(tài)學(xué)。超聲檢查可用于追蹤妊娠狀態(tài)的維持，但是不適用于檢查畸形，后者的數(shù)據(jù)來源于產(chǎn)后的觀察結(jié)果。由于對(duì)母體哺育后代具有混雜的影響，所以一般不推薦母體產(chǎn)后給藥。如果與藥理學(xué)活性相關(guān)，那么也可以評(píng)價(jià)后代中的其他終點(diǎn)。產(chǎn)后階段的持續(xù)時(shí)間將取決于基于作用機(jī)制被視為相關(guān)的額外終點(diǎn)（參見注釋4）。

在NHPs中進(jìn)行的發(fā)育毒性研究只能用于確定危害？？。每組動(dòng)物的數(shù)量應(yīng)該足以對(duì)數(shù)據(jù)做出有意義的解釋（參見注釋5）。

如果使用了其他NHP種屬，則申辦者應(yīng)該證明研究設(shè)計(jì)的合理性。上述在NHPs中進(jìn)行的發(fā)育毒性研究?jī)H用于確定危害；只要已經(jīng)證明所選劑量水平的科學(xué)合理性，就可以使用一個(gè)對(duì)照組和一個(gè)給藥組來進(jìn)行研究。例如，適當(dāng)?shù)目茖W(xué)合理性證明可能是一個(gè)單克隆抗體，通過計(jì)劃達(dá)到靶結(jié)合飽和的臨床給藥方案，與可溶性靶標(biāo)結(jié)合。如果能夠在所選動(dòng)物種屬中證實(shí)達(dá)到了這種靶結(jié)合的飽和，并且不超過治療藥物水平的10倍暴露倍數(shù)以上，則設(shè)置一個(gè)劑量水平組和對(duì)照組即可提供充分的胚胎發(fā)育危害證據(jù)。

5.4 研究的時(shí)間安排

如果在獲得胚胎–胎兒發(fā)育影響的信息之前，臨床研究需要包含有生育可能的婦女，那么需要適當(dāng)?shù)呐R床風(fēng)險(xiǎn)管理措施，例如采用高效的避孕方法（參見ICH M3（R2）指導(dǎo)原則）。

對(duì)于只在NHPs中具有藥理活性的生物藥物，如果避孕措施充分（參見ICH M3（R2）指導(dǎo)原則，第11.3節(jié)，第2段），可以在III期進(jìn)行EFD或者ePPND研究，并在上市申請(qǐng)時(shí)提交報(bào)告。當(dāng)申辦者在臨床試驗(yàn)中沒有采取充分的避孕措施時(shí)，應(yīng)該在III期試驗(yàn)啟動(dòng)之前提交完整的EFD研究報(bào)告或者ePPND研究的中期報(bào)告（參見注釋6）。當(dāng)產(chǎn)品只在NHPs中具有藥理學(xué)活性，并且其作用機(jī)制在胚胎發(fā)育方面有嚴(yán)重?fù)?dān)憂時(shí)，產(chǎn)品說明書應(yīng)該反映這一情況，無需在NHPs中進(jìn)行發(fā)育毒性研究，因此應(yīng)該避免對(duì)有生育可能的婦女用藥。

如果嚙齒類動(dòng)物或者兔是相關(guān)種屬，則生殖毒性研究的時(shí)間安排應(yīng)參見ICH M3（R2）指導(dǎo)原則。當(dāng)嚙齒類動(dòng)物是相關(guān)種屬時(shí)，進(jìn)行產(chǎn)品對(duì)生育能力影響的試驗(yàn)的時(shí)間安排也應(yīng)該遵循ICH M3（R2）指導(dǎo)原則。

屬于ICH S9指導(dǎo)原則范圍內(nèi)的腫瘤產(chǎn)品，應(yīng)參見指導(dǎo)原則中與研究操作時(shí)間安排相關(guān)的部分。

6. 致癌性

應(yīng)該從臨床預(yù)期群體和治療持續(xù)時(shí)間方面，確定對(duì)生物藥物的潛在致癌性進(jìn)行產(chǎn)品特異性評(píng)價(jià)的需要（參見ICH S1A指導(dǎo)原則）。如果需要評(píng)價(jià)，申辦者應(yīng)該制定策略來說明潛在危害。

該策略可以將證據(jù)權(quán)衡法作為基礎(chǔ)，包括對(duì)不同來源相關(guān)數(shù)據(jù)的審查。數(shù)據(jù)來源可以包括已發(fā)表的數(shù)據(jù)（如來自轉(zhuǎn)基因、基因敲除或動(dòng)物疾病模型、人類遺傳疾病的信息）、類別效應(yīng)的信息、靶標(biāo)生物學(xué)和作用機(jī)制的具體信息、體外數(shù)據(jù)、慢性毒性研究的數(shù)據(jù)以及臨床數(shù)據(jù)。在某些情況下，現(xiàn)有數(shù)據(jù)即可以充分說明潛在的致癌性，并且告知臨床風(fēng)險(xiǎn)，而無需額外的非臨床研究。

某些生物藥物的作用機(jī)制，可能會(huì)引起潛在致癌性相關(guān)的擔(dān)憂（如免疫抑制劑和生長(zhǎng)因子）。如果證據(jù)權(quán)衡結(jié)果支持潛在致癌性的相關(guān)擔(dān)憂，則無需進(jìn)行嚙齒類動(dòng)物的生物試驗(yàn)。在這種情況下，最好通過產(chǎn)品說明書和風(fēng)險(xiǎn)管理來說明潛在的危害。當(dāng)證據(jù)權(quán)衡結(jié)果并不明確時(shí)，申辦者可以提議進(jìn)行額外研究，減少機(jī)制導(dǎo)致的擔(dān)憂（參見第I部分，第5.8節(jié)）。

對(duì)于產(chǎn)品具體特征和潛在致癌性相關(guān)的作用模式方面沒有充分認(rèn)知的產(chǎn)品，應(yīng)該進(jìn)行更加廣泛的評(píng)價(jià)（如理解潛在致癌性擔(dān)憂相關(guān)的靶標(biāo)生物學(xué)、在毒性研究中納入額外的終點(diǎn)）。

如果這種更加廣泛評(píng)價(jià)的證據(jù)權(quán)衡結(jié)果沒有提示潛在致癌性，則不推薦進(jìn)行額外的非臨床試驗(yàn)。或者，如果證據(jù)權(quán)衡結(jié)果提示存在潛在致癌性的相關(guān)擔(dān)憂，那么申辦者可以提議進(jìn)行附加非臨床研究，降低此類擔(dān)憂，或者在產(chǎn)品說明書中反映出這種擔(dān)憂。

產(chǎn)品特異性的潛在致癌性評(píng)價(jià)，可以用于風(fēng)險(xiǎn)溝通，并且可以與說明書建議、臨床監(jiān)測(cè)、上市后監(jiān)測(cè)或者上述方法的組合，一起完善風(fēng)險(xiǎn)管理計(jì)劃。

使用同源產(chǎn)品進(jìn)行的嚙齒類生物試驗(yàn)（或者短期致癌性研究），通常對(duì)臨床候選物潛在致癌性評(píng)價(jià)的意義有限。

如果建立了新的策略/試驗(yàn)，可以考慮作為替代方法。

注釋

注釋 1

組織交叉反應(yīng)（TCR）研究是采用免疫組織化學(xué)（IHC）技術(shù)進(jìn)行的體外組織結(jié)合試驗(yàn)，確定單克隆抗體和相關(guān)類抗體產(chǎn)品與抗原決定簇在組織內(nèi)的結(jié)合特征?？梢允褂闷渌夹g(shù)代替IHC技術(shù)，說明靶標(biāo)/結(jié)合位點(diǎn)分布。

使用一組人體組織進(jìn)行的TCR研究，是支持此類產(chǎn)品進(jìn)行初始臨床給藥的系列安全性評(píng)價(jià)試驗(yàn)推薦之一。但在某些情況下，臨床候選物并非有良好的IHC試劑，TCR研究可能在技術(shù)上并不可行。

TCR研究可以為靶標(biāo)分布的認(rèn)知提供有用的補(bǔ)充信息，還可以提供潛在非預(yù)期結(jié)合的信息。組織結(jié)合本身并不能說明在體內(nèi)具有生物學(xué)活性。此外，在體內(nèi)與抗體一般無法達(dá)到的區(qū)域（即細(xì)胞質(zhì)）結(jié)合通常并不相關(guān)。應(yīng)該在總體藥理學(xué)和安全性評(píng)價(jià)數(shù)據(jù)的背景下評(píng)價(jià)和解釋結(jié)果。

如果在人體組織中出現(xiàn)非預(yù)期結(jié)合，對(duì)所選動(dòng)物組織進(jìn)行評(píng)價(jià)，能夠?yàn)榇嬖诨蛉狈εR床前毒性潛在相關(guān)性方面提供補(bǔ)充信息。不推薦使用全套動(dòng)物組織進(jìn)行TCR研究。

由于使用一組人體組織進(jìn)行的TCR研究將評(píng)價(jià)雙特異性抗體產(chǎn)品，因此沒有必要研究單獨(dú)的結(jié)合組分。

如果已經(jīng)在一組人體組織中使用臨床候選物進(jìn)行了TCR研究，同源產(chǎn)品的組織結(jié)合評(píng)價(jià)則不會(huì)再提供其他有價(jià)值的信息，因此不推薦進(jìn)行。

TCR研究不能檢測(cè)到關(guān)鍵質(zhì)量屬性的細(xì)微變化。因此，在整個(gè)開發(fā)項(xiàng)目中，不推薦工藝變更時(shí)用TCR研究評(píng)價(jià)受試品的可比性。

注釋 2

如果已經(jīng)使用了兩個(gè)種屬評(píng)價(jià)ADC的安全性，則應(yīng)該在至少一個(gè)種屬中，使用非結(jié)合毒素進(jìn)行額外的短期研究，或者在短期研究的一個(gè)研究臂中使用非結(jié)合毒素。在這種情況下，應(yīng)該首選嚙齒類，除非使用的毒素對(duì)嚙齒類沒有活性。如果只有一種藥理學(xué)相關(guān)的種屬，就應(yīng)該在該種屬中進(jìn)行ADC試驗(yàn)。對(duì)于新型有毒物，需要以具體情況具體分析原則為基礎(chǔ)，采用與新型化學(xué)實(shí)體種屬選擇相似的方法（如抗癌產(chǎn)品遵循ICH S9指導(dǎo)原則）。如果不是新型的毒素或者有毒物，并且其現(xiàn)有科學(xué)信息體系充分，則無需對(duì)非結(jié)合毒素進(jìn)行獨(dú)立的評(píng)價(jià)。應(yīng)該提供數(shù)據(jù)來比較ADC在動(dòng)物和人體中的代謝穩(wěn)定性。

注釋 3

在解釋研究時(shí)，應(yīng)該考慮妊娠期間胚胎暴露的種屬特異性特征。高分子量 （>5,000 D）的蛋白質(zhì)不會(huì)通過簡(jiǎn)單的擴(kuò)散而穿過胎盤。對(duì)于分子量高至150,000 D的單克隆抗體，存在特異的轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制，即能夠決定胚胎暴露并且具有種屬間差異的新生兒Fc受體（FcRn）。

在NHPs和人類中，IgG的胎盤轉(zhuǎn)運(yùn)率在器官形成期間很低，在妊娠中期的早期開始增加，在妊娠晚期的后期達(dá)到最高水平（5）。因此，盡管對(duì)胚胎的影響可以作為母體反應(yīng)的間接結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)，但是在NHPs中，給藥時(shí)間最早從妊娠第50天開始的標(biāo)準(zhǔn)胚胎研究，可能對(duì)評(píng)價(jià)器官形成期間的直接胚胎影響并沒有價(jià)值。此外，因?yàn)镮gG只通過初始乳汁分泌（即在初乳中），在哺乳期的后期不再分泌，所以在NHPs中分娩后的母體給藥通常沒有意義。

嚙齒類動(dòng)物的情況不同于NHPs和人類，因?yàn)镮gG能夠通過FcRn轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制穿過卵黃囊，而且在妊娠期間，嚙齒類動(dòng)物的暴露與NHPs和人類相比出現(xiàn)的相對(duì)較早。此外，嚙齒類動(dòng)物的分娩是在發(fā)育階段，此時(shí)的幼崽沒有達(dá)到與NHPs或者人類新生兒相同的成熟水平。因此，應(yīng)該在哺乳期對(duì)大鼠/小鼠的分娩后母體給藥，實(shí)現(xiàn)藥物經(jīng)由乳汁對(duì)幼崽的暴露，通過至少9天的哺乳直至后代達(dá)到與人類新生兒相同的發(fā)育階段。

注釋 4

出生后觀察的最短持續(xù)時(shí)間應(yīng)該為1個(gè)月，以便進(jìn)行早期功能性試驗(yàn)（如生長(zhǎng)和行
為）。

通常，如果在一般毒性研究中，有證據(jù)表明存在免疫系統(tǒng)（或者免疫功能）的不良反應(yīng)，則應(yīng)該在出生前后加強(qiáng)發(fā)育（ePPND）研究的產(chǎn)后期間，在后代中進(jìn)行免疫功能試驗(yàn)。適當(dāng)時(shí)，在出生后第28天即可盡早獲得免疫表型。根據(jù)所采用的功能性試驗(yàn)，評(píng)價(jià)免疫功能的出生后觀察的持續(xù)時(shí)間可以為3-6個(gè)月。

神經(jīng)行為學(xué)評(píng)價(jià)可能僅限于臨床行為觀察結(jié)果。工具性學(xué)習(xí)需要一個(gè)訓(xùn)練期，該訓(xùn)練期持續(xù)時(shí)間至少為出生后9個(gè)月，因此不推薦。

注釋 5

決定獼猴ePPND研究中各組動(dòng)物數(shù)量的方法詳細(xì)討論見Jarvis等2010年的文獻(xiàn)（6）。ePPND研究中各組動(dòng)物數(shù)量應(yīng)該足以獲得充分的幼崽數(shù)量（出生后第7天時(shí)，每組6-8個(gè)后代），以評(píng)價(jià)出生后發(fā)育，并在需要時(shí)（如評(píng)價(jià)免疫系統(tǒng)）能夠進(jìn)行專家評(píng)價(jià)。

大多數(shù)ePPND研究經(jīng)過數(shù)周或數(shù)月實(shí)現(xiàn)動(dòng)物妊娠。當(dāng)某個(gè)試驗(yàn)項(xiàng)目組出現(xiàn)提示治療相關(guān)作用的流產(chǎn)時(shí)，應(yīng)該考慮終止研究中妊娠動(dòng)物的進(jìn)一步增加，并調(diào)整研究設(shè)計(jì)（如采用剖腹產(chǎn)）。

提倡經(jīng)溶劑-對(duì)照處理母體動(dòng)物的再利用。

如果存在作用機(jī)制可能導(dǎo)致對(duì)EFD的影響或流產(chǎn)的擔(dān)憂，則可以在限定數(shù)量的動(dòng)物中進(jìn)行研究，以便確定危害。

注釋 6

在NHPs中進(jìn)行的ePPND研究中期報(bào)告應(yīng)該包括如下研究終點(diǎn)：

母體數(shù)據(jù)：生存情況、臨床觀察、體重、妊娠暴露數(shù)據(jù)（如果可以獲得）、任何特異性的PD終點(diǎn)；

妊娠數(shù)據(jù)：研究開始時(shí)妊娠動(dòng)物的數(shù)量、器官形成結(jié)束時(shí)（GD50）和GD100時(shí)的懷孕狀態(tài)、出現(xiàn)的流產(chǎn)和流產(chǎn)的時(shí)間。在中期報(bào)告中，不需要超聲檢查來確定胚胎大小；因?yàn)榭梢垣@得實(shí)際的出生體重，因此這些檢查并不重要；

懷孕結(jié)果數(shù)據(jù)：死胎/活胎的數(shù)量、幼崽出生體重、產(chǎn)后7天的幼崽存活情況和體重、外部形態(tài)學(xué)定性評(píng)價(jià)（即確定外觀屬于正常范圍內(nèi)）、幼崽暴露數(shù)據(jù)（如可獲得）、幼崽的任何特異性PD終點(diǎn)（如適當(dāng)）。

參考文獻(xiàn)

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