田霞

目的：食品微生物學菌落總數檢驗中不確定度的評定。方法：現選取2016年5月- 2016年6月需要進行菌落總數檢測食品樣本共20例作為調查對象，根據GB/4789.2- 2010食品微生物學進行檢測，觀察檢測結果。結果：在本次實驗中，在食品微生物學總菌落數的檢測中其不確定度的測量結果為：U為0.0219X2.086=0.046。結論：在微生物檢測中，其總菌落數檢測結果離散性比較大，因此測定的結果將取對數以后，采取合并樣本的標準差，求總菌落數，在不確定度測定檢測結果中比較適合。

隨著我國經濟的發(fā)展和提高，廣大的人們群眾越來越重視生活，尤其是食品衛(wèi)生這一塊，而且食品是否衛(wèi)生、安全，和食品有關的問題直接的關乎到人們群眾身體的健康問題。菌落總數測定是用來判定食品被細菌污染的程度及衛(wèi)生質量，它反映食品在生產過程中是否符合衛(wèi)生要求，以便對被檢樣品做出適當的衛(wèi)生學評價。根據查閱食品相關的資料，發(fā)現近年來食品存在質量問題的新聞比較頻繁，對此進行深入的了解，發(fā)現有很多的問題都是可以避免的，因此國家的有關部門，對食品安全生產采取了大力的監(jiān)管，要徹底的杜絕此類問題，要從根本上找原因，經過討論得出，導致此類問題的發(fā)生，存在兩點的不足，其一為在食品質量的問題中沒有給予高度的重視，其二為在對食品進行檢驗時在技術上還有不足之處的存在。菌落總數的多少在一定程度上標志著食品衛(wèi)生質量的優(yōu)劣，為此在本文中對食品中微生物的菌落總數檢測實驗狀況進行詳細的介紹，詳情如下。

資料和方法

資料。現選取2016年5月- 2016年6月需要進行菌落總數檢測食品樣本共20例作為調查對象，其食品樣本為奶粉。

注意事項。在選取奶粉樣品時要均勻的選?。唬?）保證每一份樣品的菌落的數量較為完全；（3）在對微生物數目進行計算時，可以保證其準確度；（4）在操作時，每一位操作人員要嚴格遵照有關規(guī)定進行操作，保證沒有誤差出現；（5）對樣本進行檢測時，需要相同的測試人員進行測試。

檢驗方法。在食品微生物學對菌落總數進行檢驗與測定中要嚴格遵照GB4789.2- 2010。

測試的流程。

（1）取樣本

將采用無菌操作進行稱量25g的樣本，取含量為225ml的滅菌生理鹽水三角瓶，將樣本放入瓶內，隨即進行振搖，當振搖充分后，將其制作成為均勻的稀釋液，為1∶10。

（2）將樣品進行稀釋

在稀釋的過程中，將采用1ml的滅菌吸管吸取1：10的稀釋液1ml，沿著管壁注入含量為9ml的滅菌生理鹽水試管內，隨即進行振搖，當振搖充分后，將其制作成1：100均勻的稀釋液；取另外一根1ml的滅菌吸管，按照同樣的操作順序，以十倍的遞增順序進行稀釋液的制作，在制作稀釋液中，每一次稀釋，將換一根滅菌吸管。

（3）稀釋倍數的選擇

依照樣品衛(wèi)生的情況在1∶1000以及1∶100的稀釋程度中選取，在做十倍遞增的稀釋同時，采取滅菌的平皿將經滅菌吸管吸取的稀釋液進行注入，其稀釋液的含量為1ml，每個稀釋將做二個平皿，取45℃的平板計數瓊脂培養(yǎng)基注入到含有稀釋液平皿當中，其平板計數瓊脂培養(yǎng)基含量為15ml，隨即對其進行轉動，將其混勻，于此同時進行空白對照的制作，瓊脂凝固之后，將其放在孵箱內進行培養(yǎng)，其孵箱溫度為36℃±1℃，培養(yǎng)時間為48h±2h。

（4）對菌落進行技術計數

將每個平皿中菌落數進行計數，其計數方式為采用菌落計數器進行記錄，菌落數則在30～300CFU之間稀釋度中進行選擇，乘以稀釋倍數為報告菌落的總數。

評定奶粉菌落總數測定中的不確定度

在本次實驗中，由實驗人員取20個奶粉的小樣，在時間間隔較短的時間內，依照GB/4789.2- 2010的方法進行重復的測試，將20個樣品的總菌落數測試的結果進行得出，在本次實驗的過程，在取樣時依照GB/4789.2-2010的規(guī)定中嚴格的執(zhí)行，可確保樣品時穩(wěn)定、均勻的。以下為不確定度的因素來源分析，如下。

（1）在稱量中，使用天平進行檢定合格，基本沒有影響；

（2）樣品的均勻性，對樣本稀釋后，為稀釋液，大致均勻，基本沒有影響；

（3）在樣品培養(yǎng)時的溫度，經過校對以后，其波幅是處于正常的范圍，沒有影響；

（4）其樣品培養(yǎng)的時間，均在正常的范圍，沒有影響；

（5）人員的不同，在這之間有一定的差異存在；

（6）同一個人員，在進行多次重復的操作，在每一次操作的過程中，可能有小誤差的存在；

（7）移液器，經過檢驗是合格，但在每一次取樣時，在液器外面的液滴量，都有一定的小差異存在；

（8）細微營養(yǎng)沒有均衡，其體現為傾倒計數瓊脂0.2mL～2mL之間的差異；

（9）在對樣品進行培養(yǎng)時，裝有樣品平皿厚薄有所不均勻，因此有可能導致培養(yǎng)溫度不均勻；

參與本次調查的20件樣品，在檢測前和檢測后存在5min時間差異，依照20min繁殖一代速度，這之間存在一定的差異，而在本次檢測過程中有可能導致誤差出現的因素，將體現于總菌落數計數之上。

實驗標準計算不確定度

依照貝塞爾公式進行計算，可將檢驗結果對數值標準偏差合并樣本的標準差計算出來，其公式為：S p={∑[（lg xi- lg x）2]/20（2-1）}1/2=[0.013823/20]1/2=0.026、uc=S p=0.026=0.019，其擴展的不確定度為U=ku c，置信水平選取為P=95%、V=20，得：t95（20）=2.086，因此擴展的不確定度：U為0.0219X2.086=0.046。

由此可見，檢測結果當采用平行樣對數值平均值進行表示，取值的區(qū)間應在0.045左右，檢測結果采用平均值進行表示時，其相對對數值取值的分布應在反對的數取值的區(qū)間值內。而檢驗結果的發(fā)散性比較高時，應采取對合并樣本標準差對檢驗結果不確定度中的最佳的選擇，這種選擇對每個樣本都適用。伴隨檢驗結果的增加，加入合并樣本的數量越來越多，將對合并樣本標準差進行重新計算，確定不確定度取值的范圍。

食品質量問題和人們生活健康有著直接的關系，在本次討論詳細的說明了在食品微生物學總菌落數的檢測中的不確定度，并將相關的數字模型進行建立，希望在我國食品安全的保障中，盡到微薄之力。

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