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蘿藦多糖的分離純化及蘿藦多糖對CCl

來源:泰然健康網(wǎng) 時間:2024年12月21日 15:58

【摘要】: 目的建立蘿藦多糖(Japanese Metaplexis Polysaccharide)的分離與純化方法并對其保肝作用進(jìn)行初步研究。方法采用Ⅱ型ZTC1+1天然澄清劑對提取出的蘿藦多糖復(fù)合物進(jìn)行純化優(yōu)選得蘿藦粗多糖,通過中空纖維超濾膜截留去除小分子雜質(zhì)并且篩選葡聚糖凝膠柱規(guī)格,采用DEAE-52纖維素柱(二乙氨基乙基-纖維素DE-52柱)(2.6×50cm)純化蘿藦粗多糖,Sephadex G-100凝膠色譜柱進(jìn)一步分離純化蘿藦多糖;用苯酚-硫酸法跟蹤檢測蘿藦多糖含量;Sephadex G-100凝膠柱色譜,瓊脂糖凝膠電泳法進(jìn)行蘿藦多糖純度鑒定;建立CCl4誘導(dǎo)小鼠急性肝損傷模型,對小鼠CCl4肝損傷模型進(jìn)行實(shí)驗(yàn),通過全自動生化分析儀測定血清ALT活性和AST活性。結(jié)果Ⅱ型ZTC1+1天然澄清劑純化蘿藦總糖的最佳工藝為A、B組分的加入量分別為藥液體積的1%、2%,藥液的濃縮程度為10mL/g,溫度為70℃,加熱時間為1h/1h;粗多糖經(jīng)過DEAE-Cellulose-52和Sephadex G-100葡聚糖凝膠柱色譜進(jìn)一步分級純化得到兩個主要多糖組分:JMP1-A,JMP3-B。兩種多糖分別通過Sephadex G-100葡聚糖凝膠柱色譜分析檢測顯示單一峰,瓊脂糖凝膠電泳鑒定顯示唯一斑點(diǎn)。蘿藦多糖各劑量組均能對抗四氯化碳誘導(dǎo)急性肝損傷小鼠的AST和ALT的升高,說明蘿藦多糖能對抗CCl4引起的細(xì)胞膜脂質(zhì)過氧化,結(jié)論應(yīng)用Ⅱ型ZTC1+1天然澄清劑純化蘿藦多糖,不需要調(diào)整蘿藦粗多糖溶液的pH,只需要根據(jù)待處理藥液的性質(zhì)選擇A、B組分的加入量,純化溫度,藥液濃度及純化時間,就可以獲得良好的澄清效果,使用起來方便,并且去除蛋白和多糖保留效果好。蘿藦多糖能對抗CCl4引起的細(xì)胞膜脂質(zhì)過氧化,保護(hù)肝細(xì)胞和亞細(xì)胞不受損傷。

【學(xué)位授予單位】:遼寧醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013


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