一種茶樹離體再生體系的構(gòu)建方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種茶樹離體再生體系的構(gòu)建方法，其離體再生體系的構(gòu)建是采用帶腋芽的莖段作為外植體，經(jīng)培養(yǎng)后腋芽萌發(fā)，向上長葉，向下生根，而不經(jīng)過誘導(dǎo)愈傷組織直接成苗。本發(fā)明以福鼎大白茶莖段為外植體，研究其再生體系的建立方法，不僅有利于保持茶樹品種的遺傳穩(wěn)定性，還可促進(jìn)茶樹種質(zhì)資源的保存。
【專利說明】一種茶樹離體再生體系的構(gòu)建方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于茶樹組織培養(yǎng)【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種茶樹離體再生體系的構(gòu)建方法。
【背景技術(shù)】 [0002]茶餓{Camellia sinensis L.Kuntze.)屬山茶科，山茶屬，是一種多年生的木本、常綠植物。茶樹組織培養(yǎng)開始于上個(gè)世紀(jì)60年代，我國關(guān)于茶樹組織培養(yǎng)的研究起步較晚，但近年來在科研人員的共同努力下也取得了顯著性的進(jìn)展，已經(jīng)通過對(duì)茶樹的種子、莖段、腋芽、花藥等進(jìn)行培養(yǎng)獲得了完整的再生植株。但茶樹組織培養(yǎng)中存在一些問題，使組織培養(yǎng)技術(shù)在茶樹中的應(yīng)用受到了很大的限制，其主要問題表現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:①將快速繁殖技術(shù)應(yīng)用于茶樹生產(chǎn)性育苗，以試管苗的不定芽或腋芽作外植體時(shí)，成梢率低，生長慢，培養(yǎng)周期長，無根茶苗生根相對(duì)較難，移栽大田成活率低對(duì)于不同茶樹品種，組織培養(yǎng)結(jié)果差異較大，可比性小，甚至于同一茶樹品種的組織培養(yǎng)結(jié)果也難以重復(fù)，穩(wěn)定性較差，無法形成一套完整可靠的方法體系基因工程已成為植物遺傳改良的有力手段，基因操作的成敗取決于離體植物的再生，但茶樹的再生技術(shù)還不夠成熟，無法建立高頻率、穩(wěn)定的再生體系。福鼎大白茶是一個(gè)綜合性狀優(yōu)良、全國推廣和引種面積最大的茶樹品種，是茶樹育種工作中的一個(gè)骨干親本，本發(fā)明以福鼎大白茶莖段為外植體，研究其再生體系的建立方法，不僅有利于保持茶樹品種的遺傳穩(wěn)定性，還可促進(jìn)茶樹種質(zhì)資源的保存。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的在于提供一種茶樹離體再生體系的構(gòu)建方法，本方法以性狀優(yōu)良的福鼎大白茶的莖段為外植體，建立其再生體系，不僅有利于保持茶樹品種的遺傳穩(wěn)定性，還可促進(jìn)茶樹種質(zhì)資源的保存。
[0004]為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案:
一種茶樹離體再生體系的構(gòu)建方法，其特征在于:所述茶樹離體再生體系的構(gòu)建是采用帶腋芽莖段作為外植體進(jìn)行培養(yǎng)，而不經(jīng)過誘導(dǎo)愈傷組織直接成苗；
其建立方法包括步驟如下:
1)、將帶飽滿腋芽的茶樹莖段滅菌后，在MS+1.5 mg/L 6-BA +0.3mg/L NAA培養(yǎng)基上培養(yǎng) 30-35d ；
2)、當(dāng)芽長至3-5cm時(shí)，將其切成長1-1.5cm的莖段接入MS+1.0mg/L 6-BA + 0.1mg/LNAA培養(yǎng)基上進(jìn)行增殖；
3)、當(dāng)增殖的芽苗長至4-5片葉時(shí)，在1/2MS+0.2 mg/L NAA培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng)；
4)、當(dāng)生根培養(yǎng)的組培苗根長至5-6cm，平均4-5條根時(shí)，進(jìn)行煉苗移栽，在室外培養(yǎng)茶樹植株。
[0005]所述的帶腋芽莖段為福鼎大白茶莖段，將所述帶腋芽莖段進(jìn)行培養(yǎng)，腋芽萌發(fā)后，向上長葉，向下生根。[0006]本發(fā)明的顯著優(yōu)點(diǎn)在于:
(I)、本發(fā)明提供的茶樹離體再生體系的構(gòu)建方法，以綜合性狀優(yōu)良、全國推廣和引種面積最大的茶樹品種福鼎大白茶的莖段作為外植體，不僅有利于保持茶樹品種的遺傳穩(wěn)定性，還可促進(jìn)茶樹種質(zhì)資源的保存，并可為日后茶樹的提純復(fù)壯提供理論基礎(chǔ)。
[0007](2)、本發(fā)明所建立的茶樹離體再生體系的構(gòu)建方法，可不經(jīng)誘導(dǎo)愈傷組織直接成苗，培養(yǎng)周期短，成梢率高，移栽大田成活率高，且方法穩(wěn)定、可靠，經(jīng)反復(fù)實(shí)驗(yàn)均能得到較好的結(jié)果。
【具體實(shí)施方式】
[0008]實(shí)施例1
一種茶樹離體再生體系的建立方法，具體包括步驟如下:
1)、將帶飽滿腋芽的茶樹莖段滅菌后，在MS+1.5 mg/L 6-BA +0.3mg/L NAA培養(yǎng)基上培養(yǎng) 30d ；
2)、當(dāng)芽長至3cm時(shí)，將其切成長I cm的莖段接入MS+1.0mg/L 6-BA + 0.lmg/LNAA培養(yǎng)基上進(jìn)行增殖；
3)、當(dāng)增殖的芽苗長至4片葉時(shí)，在1/2MS+0.2 mg/L NAA培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng)；
4)、當(dāng)生根培養(yǎng)的組培苗根長至5cm，平均5條根時(shí)，進(jìn)行煉苗移栽，將組培苗移栽至室外培養(yǎng)30d后，植株成活率為67 %，且植株生長狀況較好，葉片翠綠。
[0009]實(shí)施例2
一種茶樹離體再生體系的建立方法，具體包括步驟如下:
1)、將帶飽滿腋芽的茶樹莖段滅菌后，在MS+1.5 mg/L 6-BA +0.3mg/L NAA培養(yǎng)基上培養(yǎng) 32 d ;
2)、當(dāng)芽長至4cm時(shí)，將其切成長I cm的莖段接入MS+1.0mg/L 6-BA + 0.lmg/LNAA培養(yǎng)基上進(jìn)行增殖；
3)、當(dāng)增殖的芽苗長至5片葉時(shí)，在1/2MS+0.2 mg/L NAA培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng)；
4)、當(dāng)生根培養(yǎng)的組培苗根長至5.4 cm，平均5條根時(shí)，進(jìn)行煉苗移栽。將組培苗移栽至室外培養(yǎng)30d后，植株成活率為65 %，且植株生長狀況較好，葉片翠綠。
[0010]實(shí)施例3
一種茶樹離體再生體系的建立方法，具體包括步驟如下:
1)、將帶飽滿腋芽的茶樹莖段滅菌后，在MS+1.5 mg/L 6-BA +0.3mg/L NAA培養(yǎng)基上培養(yǎng) 35d ；
2)、當(dāng)芽長至5cm時(shí)，將其切成長1.5cm的莖段接入MS+1.0mg/L 6-BA + 0.lmg/LNAA培養(yǎng)基上進(jìn)行增殖；
3)、當(dāng)增殖的芽苗長至4片葉時(shí)，在1/2MS+0.2 mg/L NAA培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng)；
4)、當(dāng)生根培養(yǎng)的組培苗根長至6cm，平均4條根時(shí)，進(jìn)行煉苗移栽。將組培苗移栽至室外培養(yǎng)30d后，植株成活率為68 %，且植株生長狀況較好，葉片翠綠。
[0011]利用本發(fā)明的方法構(gòu)建茶樹離體再生體系，組培苗的室外移栽成活率較高，平均達(dá) 66.7%o
[0012]以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例， 凡依本發(fā)明申請(qǐng)專利范圍所做的均等變化與修飾，皆應(yīng)屬本發(fā)明的涵 蓋范圍。
【權(quán)利要求】
1.一種茶樹離體再生體系的構(gòu)建方法，其特征在于:所述茶樹離體再生體系的構(gòu)建是采用帶腋芽莖段作為外植體進(jìn)行培養(yǎng)，而不經(jīng)過誘導(dǎo)愈傷組織直接成苗；其建立方法具體步驟如下: 1)、將帶飽滿腋芽的茶樹莖段滅菌后，在MS培養(yǎng)基上培養(yǎng)30-35d； 2)、當(dāng)芽長至3-5cm時(shí)，將其切成長1-1.5cm的莖段接入MS增殖培養(yǎng)基上進(jìn)行增殖； 3)、當(dāng)增殖的芽苗長至4-5片葉時(shí)，在1/2MS生根培養(yǎng)基上進(jìn)行生根培養(yǎng)； 4)、當(dāng)生根培養(yǎng)的組培苗根長至5-6cm，平均4-5條根時(shí)，進(jìn)行煉苗移栽。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的茶樹離體再生體系的構(gòu)建方法，其特征在于:所述的帶腋芽莖段為福鼎大白茶莖段，將其進(jìn)行培養(yǎng)，腋芽萌發(fā)后，向上長葉，向下生根。
【文檔編號(hào)】A01H4/00GK103609453SQ201310639259
【公開日】2014年3月5日 申請(qǐng)日期:2013年12月4日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月4日
【發(fā)明者】孫威江, 吳婉婉, 陳志丹, 何碧珠 申請(qǐng)人:福建農(nóng)林大學(xué)

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